TGFA过表达对水牛卵巢颗粒细胞功能的影响

本试验旨在探索转化生长因子α（transforming growth factor alpha，TGF-α）的SBE-β-CD供应商编码基因TGFA对水牛卵巢颗粒细胞（BGCs）增殖、凋亡和类固醇激素分泌能力的影响，为进一步探明TGFA在调控水牛卵泡发育中的作用提供理论支持。构建TGFA过表达载体，采用脂质体将其转染至BGCs，CCK-8、EdU、流式细胞术、ELISA等技术分别检测细胞活力、增殖、凋亡和类固醇激素分泌情况，同时运用qRT-PCR和Western Blot检测相关基因和蛋白的表达变化。结果表明，TGFA过表达后BGCs活力显著提高，EdU阳性细胞率显著升高，增殖相关基因PCNA和CyImmunomganetic reduction assayclinD1的表达量显著上调。同时，细胞凋亡率显著降低，促凋亡基因CASPASE 3、BAX和P53的表达量显著降低，促凋亡蛋白CASPASE 3的表达量显著下调；雌激素（Estradiol，E_(2)）和孕酮（Progesterone，也称黄体酮，缩写：PROG）的分泌量显著降低，类固醇激素合成相关基因3-βHSD和CYP19A1的表达量显著下调，其蛋白表达量也显著降低。综上，TGFA过表达促进BGCs增殖，抑制细胞凋亡和类固醇激素分泌，从而调节水牛GSI-IX浓度卵泡发育。