Achr receptor

背景与目的 奥希替尼是治疗表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor,EGFR）突变肺腺癌患者的有效靶向治疗药物，然而，出现继发脑膜转移的耐药患者的后续治疗方式仍有待探讨。本研究旨在分析奥希替尼耐药后继发脑膜转移的患者接受甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）、鞘内注射的疗效、安全性和预后。方法 回顾性分析2018年6月至2022年11月期间，34例接受甲氨蝶呤鞘内注射的奥希替尼治疗继发肺腺癌脑膜转移患者的临床资料。对比治疗前后患者的症状、实验室化验结果，分析治疗不良反应及生存期。结果 进行MTX鞘内注射后，67.6%(23/34)的患者脑膜转移症状改善。其中，31例患者接受了增强头颅磁共振成像（magnetic selleckchem Mirdametinibresonance imaging,MRICutimed® Sorbact®）复查，MRI结果提示，治疗前存在脑膜异常强化的10例患者中，30%(3/10)的患者强化较治疗前更多减轻。脑脊液化验提示，蛋白水平及肿瘤标志物水平较治疗前均有所下降，差异具有统计学意义（P <0.05）。奥希替尼联合MTX鞘内注射的中位无进展生存期为2.6个月，中位总生存期为12.7个月。结论 奥希替尼联合甲氨蝶呤鞘内注射治疗继发脑膜转移的EGFR突变型肺腺癌患者疗效显著，可延长患者生存期。

白藜芦醇与黄酮类化合物都来源于苯丙烷代谢途径,是一类重要的次生代谢产物,不仅在植物抗逆过程中发挥重要作用,而且具有多种生理活性。白藜芦醇与黄酮类化合物的生物合成不仅涉及多个结构基因的参与,还受到多种转录因子的调控,具有复杂的调控机制。MYB转录因子家族广泛参与调控植物的生长发育、抗逆胁迫、次级代谢产物的积累,对白藜芦醇和黄酮类化合物的合成也具有重要的调控作用。目前,关于植物体内MYB转录因子协调白藜芦醇与黄酮类化合物合成的机制还不清楚。本研究通过对不同发育时期桑椹中MYB基因的表达水平与白藜芦醇和黄酮类化合物含量的分析,发现一个R2R3-MYB转录因子MbMYB306基因的表达量变化与桑椹中白藜芦醇含量变化趋势呈正相关,而与黄酮类化合物含量变化呈负相关。因此,推测该转录因子对白藜芦醇和黄酮类化合物的合成具有一定的调控作用,但其具体的功能和作用机制还不清楚。本文研究了MbMYB306对白藜芦醇与黄酮类化合物合成的调控作用,鉴定了MbMYB306基因的上游调控因子及其互作蛋白质,初步揭示了MbMYB306协调白藜芦醇与黄酮类化合物合成的分子机制。研究结果不仅为白藜芦醇与黄酮类化合物合成机制的研究奠定了基础,同时也为桑树育种提供了基因资源,对于揭示桑树次生物质代谢调控机制具有重要意义。主要研究结果如下:(1)MbMYB306基因的克隆及其编码蛋白的结构特性。通过对不同发育时期桑椹的转录组及白藜芦醇和类黄酮含量变化的联合分析,发现MbMYB306基因的表达量变化与白藜芦醇含量的变化趋势一致,而与类黄酮含量的变化趋势相反。克隆得到了MbMYB306基因,其编码的蛋白质包含349个氨基酸,N端含有保守的R2和R3结构域,R3结构中包含有一个b HLH结合结构域。(2)MbMYB306基因的表达特性及MbMYB306蛋白的亚细胞定位。MbMYB306基因在叶中表达量相对较高,茎和根中相对较低。MbMYB306的启动子(p MbMYB306)包含有多种激素和光响应元件等,p MbMYB306具有ABA、GA、Me JA、光照诱导表达活性。MbMYB306定位于细胞核内。(3)MbMYB306基因促进白藜芦醇合成,抑制类黄酮的合成。MbMYB306基因在桑树叶片中瞬时表达,以及在毛状根中过表达都可促进转基因组织中白藜芦醇的积累,而抑制类黄酮的合成。MbMYB306可以促进苯丙烷途径上游的Mb4CL基因和白藜芦醇合成分获悉更多支途径中的MbSTS7基因的表达,但能抑制类黄酮合成分支途径的MbCHS、MbF3H、MbDFR、MbANS等结构基因的表达。酵母单杂交实验证明MbMYB306能够与MbSTS7基因启动子结合,能够显著增强MbSTS7基因启动子的转录活性,而抑制MbCHS、MbF3H、MbDFR和MbANS基因启动子的转录活性。(4)MbMYB306基因增强桑树的抗病性。灰霉菌侵染可以诱导MbMYB306和MbSTS7基因的表达。桑树叶片瞬时过表达MbMYB306或MbSTS7基因都可以显著增强受灰霉菌侵染叶片的过氧化物酶和过氧化氢酶活性,减少叶片中活性氧的积累,增强对灰霉菌的抗性。(5)调控MbMYB306基因表达的转录因子及MbMYInfectious hematopoietic necrosis virusB306相互作用蛋白的鉴定。通过酵母单杂交实验发现MbbZIP60能够直接与MbMYB306的启动子结合,荧光素酶报告基因实验和GUS活性检测实验结果CP-456773供应商表明MbbZIP60能够抑制MbMYB306启动子的转录活性;MbbZIP60基因在桑树叶片中瞬时超表达能抑制MbMYB306和MbSTS7基因的表达,促进MbDFR,MbCHS和MbANS基因的表达。荧光素酶互补实验证明MbMYB306与MbWRKY49之间存在相互作用。MbWRKY49基因在桑树叶片中瞬时超表达能够促进MbMYB306和MbSTS7基因的表达。

【目的】联合网络药理学和分子对接技术，挖掘扶元和中膏君药党参、麸炒白术等各单味药物及复方改善功能性消化不良（Functional dyspepsia，FD）的潜在靶点和分子机制。【方法】对扶元和中膏中各单味药物改善功能性消化不良的研究进展进行综述；构建“FD-靶点-有效成分-扶元和中膏”网络，筛选出的交集基因进行GO分析和KEGG相关通路富集，分子对接分析。【结果】扶元和中膏14味药中有10味药具有改善FD的作用，其机制是通过调节胃肠激素水平发挥作用；网络药理学共获得扶元和中膏有效成分149个，与FD相关靶点2641个，扶元和中膏与FD的交集靶点281个，PPI网络筛选获得前5Belnacasan细胞培养个核心靶点，从构建的“FD-作用靶点-有效成分-扶元和中膏”网络筛选获得扶元和中膏前25个有效成分，对281个交集靶点的GO分析和KEGG分析表明，扶元和和中膏可能通过癌症通路、PI3K-Akt、MAPK等途径发挥治疗作用；分子对接结果表明2个主要成分（槲皮素和山奈酚）和3个关键靶点（AKT1、TNF、IL-6）均具有较好的亲和力。【结论】扶元和中膏的主要活性成分槲皮素和山奈酚可能通过癌症通路、PLX3397临床试验PI3K-Akt、MAPK等信号通路，作用于AKT1、TNF、IL-6等关键靶点改善功能性消化不genetic divergence良。

目的：探析补肾通络方对子宫内膜损伤后人脐静脉内皮细胞模型（HUVECs）促增殖、血管生成和迁移作用，及对调控血管内皮生长因子（VEGF）信号通路的影响。方法:选择2020年1月-2021年12月，购自武汉大学典型培养物保藏中心的12份HUVECs，bio-orthogonal chemistry给予50nselleck激酶抑制剂g/mlVEGF处理后，分别实施20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预处理。比较补肾通络方对子宫内膜损伤后，VEGF信号通路的影响及对HUVECs增殖、迁移、血管生成ZD1839试剂的影响。结果：比较20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预后24h的HUVECs活性和24h细胞生长检测所得OD值，差异无统计学意义（P>0.05）；20%补肾通络方含药血清组48h、72h的HUVECs活性、细胞生长检测所得OD值及VEGF表达量、HUVECs细胞迁移数均高于10%、5%补肾通络方含药血清组和无补肾通络方血清组，差异有统计学意义（P<0.05）。20%补肾通络方含药血清干预组的血管网状结构完整度优于10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方血清，无补肾通络方血清干预组的血管网状结构完整度最差，补肾通络方可逆转VEGF抑制细胞活性的趋势，促进HUVECs的血管形成。结论：将补肾通络方应用到子宫内膜损伤中，可逆转VEGF抑制细胞活性的趋势，增强HUVECs的细胞活性，促进细胞增殖、迁移，促进血管新生，促进内皮细胞网络结构的重建，利于促进内皮细胞损伤的修复，利于子宫内膜功能的恢复，且与补肾通络方含药血清浓度呈一定量效关系。

急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是以异常分化的髓系细胞在骨髓(Bone marrow,BM)与外周血中(Peripheral blood,PB)不受控制的克隆性扩增为特征的一种造血系统的恶性肿瘤。在过去的几年中,尽管人们通过化疗、免疫治疗以及骨髓移植等方式针对AML的治疗已经取得了相当不错的进展,但大多数患者的复发率极高,预后较差。从分子机制上看,表观遗传(Epigenetics)的动态可逆修饰导致了包括白血病在内的多种疾Immuno-chromatographic test病的发生与发展,N6-甲基腺苷(m~6A)是人们在AML中发现的最丰富的表观遗传修饰mRNA,它通过调节RNA的结构、功能、稳定性和翻译等参与到白血病演进的关键过程中。因此对m~6A甲基化修饰的深入研究将有助于我们更好的理解表观转录组异常导致疾病发生机制,为开发靶向m~6A调节蛋白的新药提供新的思路与切入点。肥胖相关基因FTO(fat mass and obesity-associated)作为最早被发现的m~6A去甲基化酶,通过降低ASB2和RARA mRNA转录本上的m~6A丰度来破坏ASB2和RARA mRNAselleck Cobimetinib的稳定性,从而促进白血病的发生并抑制全反式维甲酸(ATRA)介导的白血病细胞分化。近年来,科研人员不断开发出新的FTO抑制剂用于白血病的治疗,然而,由于稳定性差、毒副作用大、易出现耐药等问题的存在使这种单一的表观遗传小分子药物治疗方案受到了诸多限制,开发新的联合治疗策略是当下急需解决的问题。无机纳米材料具有稳定性高、体内相容性好、具有多孔结构等优点,在药物递送、诊断和成像、筛查和治疗、疫苗合成与开发等生物医学领域得到了广泛应用。为此,我们设计了一种基于表观遗传修饰的硫化铜纳米复合材料(PCCR),该材料由硫化铜纳米颗粒(CuSNP)、FTO抑制剂R-2HG、壳聚糖CS以及靶向肽P29组成。PCCR通过29肽的特异性靶向作用识别白血病干细胞,随后通过内吞作用进入细胞,由于Beclin-1可与高尔基体表面的自噬相关蛋白GAPR-1结合并诱导自噬,从而使内部的R-2HG以及Cu~(2+)释放出来。R-2HG抑制了FTO蛋白的酶活性,增加了总体m~6A修饰,使相关癌基因失活;同时Cu~(2+)通过类芬顿反应诱导细胞发生铁死亡。本文的主要研究内容如下:1)设计并合成了PCCR纳米表观药物平台,对其结构、形貌、理化性质、载药量与包封率、稳定性及药物释放机制等进行了研究。2)通过共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)、电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)、小动物活体光学Galunisertib价格成像系统(IVIS)检测PCCR的体内外靶向能力。3)通过GSH/GSSG和GPX4检测、基因特异性m~6A qPCR、LC-MS/MS、mRNA降解、蛋白质印迹分析(Western Blotting)、ELISA(酶联免疫吸附测定)、流式细胞术等方法研究PCCR对白血病细胞的作用机制。4)通过构建C1498白血病小鼠模型,对PCCR的疗效、生物安全性、药物分布进行了评估,同时还对PCCR激活免疫的效果进行了检测。总体而言,我们成功设计合成了稳定性高、生物相容性好、靶向性强的PCCR纳米表观药物平台,这种新型纳米表观药物能够逆转由于表观遗传网络调控引起的细胞无序化,对癌细胞或癌症干细胞进行重塑(Re-modeling),实现了对FTO的抑制作用;同时具备多功能化的特点,能协同多种诱导细胞死亡方式克服细胞对单一死亡方式的依赖性,为纳米材料与表观遗传药物的联合使用提供了新的见解。

背景和目的骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种累及全身多个关节的退行性疾病,在全世界各类人群中具有较高的患病率和致残率。终末期骨关节炎患者往往需要行关节置换手术以减轻痛苦和恢复生理功能,但关节置换手术往往伴随着诸多并发症和失败率,患者满意度不高。骨关节炎以软骨损伤和软骨退变为重要病理表现。基于软骨组织的特殊性,软骨细胞是唯一能够合成并维持软骨组织形态的细胞,任何对软骨细胞的损伤,都会最终损害软骨组织的功能和完整。最新的研究表明,机械应力负荷在骨关节炎的发生、发展中发挥着重要作用,并被广泛研究。有研究发现,高的机械应力负荷与多种细胞的程序性死亡事件密切相关。铁死亡是新近发现的一种区别于细胞凋亡、坏死、焦亡的细胞程序性死亡方式,以细胞内膜结构的脂质过氧化损伤为特征,主要表现为细胞内ROS含量增多,关键调控蛋白GPX4的活性和表达下降,线粒体皱缩、线粒体膜增厚。Piezo1蛋白(机械敏感性离子通道蛋surgeon-performed ultrasound白1)是被证实存在于人类软骨细胞上的一种离子通道蛋白,通过响应不同形式的机械应力刺激,选择性通透以Ca2+为主的多种离子,最终实现将压力信号转化为电化学信号。基于软骨细胞在骨关节炎发展中的重要地位,以及机械应力,Piezo1蛋白,细胞铁死亡与软骨细胞损伤的潜在联系,因此本研究主要想探讨以下几点问题:(1)高机械应力诱发的骨关节炎中,铁死亡、Piezo1蛋白是否参与其中。(2)软骨细胞铁死亡在骨关节炎的发生、发展中发挥何种作用,调控软骨细胞铁死亡会对骨关节炎产生何种影响。(3)高机械应力激活Piezo1蛋白后,将如何调控软骨细胞的活性,以及机械应力、Piezo1蛋白、软骨细胞铁死亡三者间是否具有某种联系,这种联系是通过何种分子途径实现的。方法(1)收集人类膝关节骨关节炎患者负重区与非负重区软骨组织,进行mRNA转录组测序,以探究高机械应力所引起的蛋白表达差异,同时部分软骨组织送透射电镜观察,明确高机械应力下,软骨细胞是否具有铁死亡的特征性表现。设计并制备体外细胞机械应力刺激培养模型,提取小鼠原代软骨细胞,进行高机械应力刺激,检测铁死亡关键调控蛋白GPX4的表达水平,透射电镜观察软骨细胞线粒体,以明确高机械应力是否能诱发软骨细胞铁死亡。(2)构建铁死亡调控蛋白GPX4软骨细胞特异性敲除小鼠(Col2a1-CreERT GPX4flox/flox),通过特异性敲除软骨细胞上GPX4的表达并诱导骨关节炎,行Micro-CT,番红固绿染色,免疫组化染色等检测方法,来验证软骨细胞铁死亡对于骨关节炎进展的影响。另一方面,通过过表达铁死亡旁路调节途径的调控蛋白FSP1(铁死亡抑制蛋白1)和补充调控因子辅酶Q10,来抑制因GPX4敲除而诱发的软骨细胞铁死亡,探讨软骨细胞铁死亡在骨关节炎发生发展中的作用。(3)提取野生型小鼠原代软骨细胞,给予体外机械应力刺激,同时加入Piezo1蛋白抑制剂(GsMTx4),检测细胞内钙离子含量变化情况,细胞活性,细胞内还原型谷胱甘肽GSH水平,线粒体形态、活性和膜电位以及GPX4、代谢相关指标的表达情况,明确Piezo1蛋白是否参与高机械应力诱发的软骨细胞铁死亡,及其具体发挥的作用。其次,利用野生型小鼠建立DMM骨关节炎模型,通过关节腔内注射GsMTx4,并进行Micro-CT,番红固绿染色,免疫组化染色等检测方法,明确Piezo1蛋白在骨关节炎进展中发挥的作用。提取GPX4软骨细胞特异性敲除小鼠(Col2a1-CreERT GPX4flox/flox)的原代软骨细胞,添加4-OH-TAM行体外软骨细胞GPX4敲低,然后行体外机械应力刺激培养,观察细胞内钙离子含量变化情况,细胞活性,细胞内还原型谷胱甘肽GSH水平,线粒体形态、活性和膜电位以及GPX4、代谢相关指标的表达情况,明确GPX4介导的软骨细胞铁死亡是否是高机械应力激活Piezo1蛋白后的关键下游通路。最后,我们移除细胞外的钙离子,再次进行体外机械应力刺激培养,观察细胞内钙离子含量变化情况,细胞活性,细胞内还原型谷胱甘肽GSH水平,线粒体形态、活性和膜电位以及GPX4、代谢相关指标的表达情况,以探讨Piezo 1介导的钙离子内流是否是高机械应力激活Piezo1蛋白与GPX4蛋白介导的软骨细胞铁死亡之间的关键因子。结果(1)高机械应力可降低GPX4蛋白的表达水平,同时诱导软骨细胞线粒体膜增厚、线粒体皱缩。骨关节炎患者负重区与非负重区软骨组织转录组基因测序结果显示,相较于非负重区软骨组织,负重区软骨组织中铁死亡生物标记物GPX4的水平显著降低(P<0.01),同时,软骨组织透射电镜结果显示,负重区软骨细胞表现出了铁死亡的特征,包括线粒体膜增厚、线粒体皱缩和线粒体嵴消失。进一步,体外高机械应力(1MPa,1HZ)刺激软骨细胞,可显著降低GPX4的表达和转录水平(P<0.01)。软骨细胞的透射电镜分析显示,接受高机械应力刺激后,软骨细胞内线粒体表现出铁死亡的特征性表型。收集正常软骨细胞与接受高机械应力后的软骨细胞,mRNA转录组分析显示,GPX4水平显著降低(P<0.01)。在小鼠骨关节中,GPX4蛋白主要定位与软骨浅表层,同时,建立小鼠膝关节DMM骨关节炎模型后,小鼠膝关节软骨表层中GPX4的表达水平显著降低。(2)敲除小鼠骨关节软骨细胞中的GPX4蛋白,加剧骨关节炎程度,而针对性的抑制软骨细胞铁死亡能缓解骨关节软骨的损伤。在小鼠关节膝关节中,GPX4蛋白主要定位于表层软骨细胞,通过构建GPX4软骨细胞特异性敲除小鼠(Col2a1-CreERT GPX4flox/flox)发现,GPX4的缺失,可以加重骨关节炎的程度,同时软骨细胞的合成代谢产物降低,基质蛋白酶表达增多。进一步,向GPX4软骨细胞特异性敲除小鼠关节腔内转染FSP1过表达腺相关病毒以增强FSP1的表达水平,结果表明FSP1的过表达,缓解了因GPX4缺失而加重的骨关节炎程度LY294002纯度。FSP1在铁死亡代谢中以辅酶Q10为关键底物,因此我们通过口服辅酶Q10的方法,来研究其对因GPX4缺失而加重的骨关节炎的治疗价值。结果表明,通过口服辅酶Q10能够有效缓解因GPX4缺失而加重的骨关节炎程度。(3)高机械应力通过激活Piezo1蛋白介导的钙离子内流诱发软骨细胞铁死亡。在之前的实验中,我们发现机械应力除了造成GPX4蛋白的表达差异,同时也会造成Piezo1蛋白的差异性表达,具体为在高机械应力组中,Piezo1蛋白的转录水平升高。在小鼠软骨细胞中,予以高机械应力刺激,并添加Piezo1蛋白抑制剂(GsMTx4),结果表明:相较于高机械应力组,抑制Piezo1蛋白后,细胞内钙离子含量降低,细胞内GSH水平升高,GPX4蛋白表达升高,细胞内ROS含量降低,线粒体活性和膜电位升高,细胞损伤减轻。此外,在小鼠骨关节炎模型中,关节腔内注射Piezo1蛋白抑Belumosudil小鼠制剂(GsMTx4)能够升高小鼠骨关节软骨细胞中GPX4蛋白水平,减轻关节软骨的破坏程度。进一步,我们提取了 GPX4软骨细胞特异性敲除小鼠(Col2a1-CreERT GPX4flox/flox)的原代软骨细胞,并体外敲低GPX4的表达,然后予以高机械应力刺激和Piezo1蛋白抑制剂(GsMTx4),结果显示:GPX4敲低后,高机械应力刺激仍能诱导细胞内钙离子增多,GSH水平降低,加入GsMTx4后,能够抑制钙离子的水平和恢复GSH的含量。但GPX4敲低后,同样引起了大量软骨细胞失活,予以高机械应力刺激,或者加入GsMTx4,软骨细胞活性不会出现显著性的改变。同样,线粒体膜电位和线粒体活性均在GPX4敲低后出现低表达,机械应力刺激不会再诱发相应改变。最后,为了证明钙离子内流在机械应力诱导的软骨细胞铁死亡中的关键作用,我们制备了无钙离子培养基,并在软骨细胞接受机械应力刺激时和刺激结束后24小时内均采用无钙培养基培养。结果显示:移除细胞外钙离子后,高机械应力刺激无法再降低GSH水平,细胞内ROS含量明显下降,且线粒体活性增强,膜电位升高,GPX4表达水平升高,Col2水平升高,基质蛋白酶ADAMTS5和MMP-13表达水平明显降低,软骨细胞活性明显升高。结论1、高机械应力负荷可诱发软骨细胞铁死亡。2、条件敲除软骨细胞内GPX4的表达,可加重小鼠骨关节炎程度,加剧软骨细胞分解代谢,抑制合成代谢。3、条件敲除软骨细胞内GPX4的表达后,可通过过表达FSP1或补充辅酶Q10以强化铁死亡旁路途径,减轻骨关节炎软骨损伤程度,表明软骨细胞铁死亡会促进OA的进展。4、离子通道蛋白Piezo1参与高机械应力诱导的软骨细胞铁死亡。5、抑制Piezo1蛋白的活性可减轻骨关节炎软骨损伤程度。6、高机械应力诱导的软骨细胞铁死亡是通过Piezo1介导的钙离子内流实现的。

目的 探讨不同剂量吲哚布芬联合替格瑞洛对老年冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后主要不良心血管事件(MACE)发生情况及血小板功能的影响。方法 选取2019年5月至2022年3月在河北港口集团港口医院接受PCI术的178例老年冠心病患者作为研究对象，采用随机数字表法分为A组(59例)、B组(59例)和C组(60例)。A组在PCI术前给予阿司匹林肠溶片300 mg,替格瑞洛片180 mg负荷PF-07321332纯度，行PCI术后给予阿司匹林肠溶片100 mg/次、1次/d,替格瑞洛片90 mg/次、2次/d。B组在PCI术前给予吲哚布芬片200 mg,替格瑞洛片180 mg负荷，行PCI术后给予吲哚布芬片100 mg/次、2次/d,替格瑞洛片用法同A组。C组吲哚布芬片和替格瑞洛片用法同B组，1个月后给予吲哚布芬片100 mg/次、2次/d,替格瑞洛片60 mg/次、2次/d。术后随访6个月，比较3组术后6个月的临床疗效，治疗前和治疗1个月、治疗3个月后的血小板功能，术后6个月内的MACE事件、不良反应。结果 术后6个月，A组、B组及C组临床有效率分别为89.83%、93.22%、88.33%,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月后，3组血小板凝聚率水平及花生四烯酸诱导的最大聚集率、二磷酸腺苷诱导的最大聚集率均低于治疗前Hardware infection、治疗1个月后，治疗1个月后低于治疗前，但3组间比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月后，3组血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肌酐水平均高于治疗前、治疗1个月后，治疗1个月后高于治疗前，但3组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月内，C组的MACE发生率为20.00%,均高于A、B组的15.25%、13.56%,但差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月内，C组的不良反应发生率为1.67%,低于A组的28.81%(P<0.05)。术后6个月内，A、B组轻微出血发生率较C组高(P=0.03);A、B组呼吸困难发生率较C组高(P=更多0.01)。结论 吲哚布芬联合替格瑞洛治疗老年冠心病的疗效确切，而减量替格瑞洛治疗安全性较高，不增加MACE事件发生风险。

目的:探索局部枸橼酸抗凝在高危出血风险合并急性肾损伤的肝衰竭患者中行人工肝血液净化技术治疗的有效性和安全性。方法:本研究通过回顾性收集2020年12月-2022年12月在新疆医科大学第一附属医院住院治疗的肝衰竭患者的临床资料,共计145例,根据血液净化治疗选取的抗凝方式分为局部枸橼酸钠组(Regional citrate anticoagulation,RCA)、无抗凝组和肝素组,以比较不同抗凝方式的疗效。分析枸橼酸的抗凝效果、安全性及不良反应等,比较三组患者基线资料、滤器运行寿命、出血情况、枸橼酸蓄积情况、代谢性酸中毒、代谢性碱中毒等相关并发症情况及临床疗效。评估抗凝剂类型与透析时长的关系,透析时www.selleck.cn/products/liproxstatin-1长与滤器运行寿命的关系,滤器运行寿命的危险因素,滤器和静脉壶凝血级别构成比例之间的差异。结果:有效性:滤器透析时长与抗凝剂类型之间有显著正相关关系(r=0.706,P<0.001)。滤器透析时长与滤器运行寿命的关系:在人工肝DPMAS+PE阶段,RCA组与另外两组相比,滤器寿命明显延长(10.0小时VS5.5小时VS5.5小时(P<0.001)。在序贯CVVHDF阶段,RCA组与无抗凝及肝素组相比,滤器寿命明显延长(56.0小时VS15.0小时VS24.0小时(P<0.001)。滤器运行寿命的危险因素为血小板升高(HR=1.006,95%CI1.000-1.012,P<0.05),而局部枸橼酸抗凝方式(HR=0.274,95%CI0.153-0.493,P<0.001)为保护性因素。比较三组抗凝方式的安全性,结果显示枸橼酸钠组血清总钙/离子钙≥2.5的发生率显著高于另外两组(P<0.05),但通过调整枸橼酸钠抗凝方案均能继续完成治疗,患者并未出现枸橼酸钠蓄积加重的表现及严重副反应。三组患者代谢性酸碱中performance biosensor毒的发生率无显著差异(P>0.05),比较三组出血风险,肝素组出血情况高于无肝素组及RCA组(P<0.05)。结论:对于高危出血风险合并急性肾损伤的肝衰竭患者,应用RCA行DPMAS+PE序贯CVVHDF治疗抗凝效selleckchem MK-1775果优于无抗凝组和肝素组,且枸橼酸蓄积及电解质紊乱风险低,出血风险明显低于肝素组;在严密监测的情况下对于高危出血风险合并急性肾损伤的肝衰竭患者具有一定安全性及有效性。

目的:本研究旨在探讨PM2.5是否会诱导H9c2心肌细胞发生铁死亡,以及芝麻素在PM2.5诱导H9c2心肌细胞铁死亡发生发展过程中的保护作用,为从营养膳食层面指导心血管防治提供参考依据和理论指导。方法:将H9c2细胞分为Control组、Erastin组、PM2.5组、PM2.5+Fer-1组、Erastin+Fer-1组,利用i CELLigence RTCA实时无标记的细胞功能分析仪及CCK-8法进行细胞活性测定;采用试剂盒检测LDH、MDA、GSH-Px、SOD、GSH等指标;采用铁离子试剂盒检测细胞内Fe~(2+)的浓度;采用ELASA试剂盒检测细胞内AA(花生四烯酸)的浓度;采用Western Blot检测GPX4、xCT、FADS1、ACSL4、LPCAT3蛋白的表达水平;用荧光显微镜观察细胞内ROS的水平;流式细胞仪检测脂质ROS和线粒体膜电位,以检测PM2.5能否诱导H9c2细胞发生铁死亡。将H9c2细胞分为Control组、Erastin组、Erastin+100μMses组、ErasBYL719小鼠tin+Fer-1组,以检测芝麻素对Erastin诱导铁死亡的保护作用。在此基础上,给予H9c2细胞3个芝麻素干预浓度,研究芝麻素对PM2.5诱导的H9c2细胞铁死亡是否具有剂量依赖的抑制作用。使用TCSMP和FerrDb两个数据库筛选出既是person-centred medicine芝麻素的靶基因,又是铁死亡的驱动基因,探索芝麻素抑制铁死亡的可能机制。结果:1.试剂盒的结果显示Erastin组和PM2.5组的趋势大体一致。相比于DMSO组,Erastin组和PM2.5组细胞活力下降,SOD、GSH和GSH-Px活性明显下降,而MDA含量明显上升,加入Fer-1后细胞损伤、氧化应激和脂质过氧化受到抑制(P<0.05);Western Blot结果显示PM2.5组的GPX4、xCT明显下降,加入Fer-1后铁死亡明显受到抑制(P<0.05);2.与Erastin组相比,Erastin+100μMses组的细胞活力上升,LDH漏出率减少,细胞内GSH含量明显上升(P<0.001),而MDA含量明显下降(P<0.001),且芝麻素处理结果与Fer-1处理结果相当;3Compound 3价格.与PM2.5组相比,给予低、中、高剂量芝麻素干预后,细胞活力逐渐恢复,ROS、脂质ROS水平有所下降,SOD、GSH和GSH-Px活性显著增加,而MDA含量明显下降,且具有剂量依赖效应(P<0.05)。同时,芝麻素预处理后,细胞Fe~(2+)水平逐渐下降,线粒体膜电位有所增加,GPX4、xCT蛋白的表达水平增加;4.TCSMP数据库筛选出23个芝麻素的靶基因,FerrDb数据库筛选出265个铁死亡驱动基因,两者取交集得到G6PD、FADS1、NOX1、NOX3四个靶基因。Western Blot结果显示,与对照组相比,PM2.5组的FADS1、ACSL4和LPCAT3蛋白水平明显增加,不同浓度芝麻素预处理组FADS1、ACSL4和LPCAT3水平有下降趋势(P<0.05)。AA试剂盒的结果显示,与PM2.5组相比,芝麻素预处理组可以抑制PM2.5诱导的细胞内AA含量的增加(P<0.01)。结论:PM2.5可以诱导H9c2细胞铁死亡,芝麻素干预对PM2.5诱导的H9c2细胞铁死亡具有一定的保护作用,其可能与下调FADS1,减少AA生物合成,阻碍ACSL4/LPCAT3脂质代谢通路有关。

桑黄作为我国传统名贵的药用真菌之一,含有多糖、三萜、多酚等活性成分,具有抗肿瘤、抗氧化、降糖、抑菌等生物活性。肿瘤是一种对人类生命造成严重威胁的疾病,也是至今人类不能攻克的一种疾病。目前,从具有抗肿瘤活性的药用真菌中筛选抗肿瘤药物已成为现在的研究热点之一。桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)是桑黄的一种,本研究在Support medium单因素实验的基础上优化了桑树桑黄总三萜的提取工艺,使用大孔树脂法联合葡聚糖凝胶LH-20柱层析法分离纯化出桑树桑黄总三萜,通过UHPLC-ESI-MS鉴定其三萜成分,使用CMirdametinib核磁CK8法研究其对人前列腺癌细胞PC3、人肝癌细胞Hep G2、人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞HCT-116和人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用,并结合网络药理及分子对接技术对其抗肿瘤的作用机理进行了探讨。本文主要研究内容与结果如下:1.研究超声辅助法提取桑树桑黄总三萜的工艺。在单因素实验的基础上,利用响应面法,以桑树桑黄中总三萜含量为响应值,最佳提取工艺为:乙醇浓度72.93%、料液比1:35.56(g/v)、温度45.15℃,最佳提取条件下总三萜含量10.34 mg/g,理论值为10.84mg/g,即实际值与理论值之间的拟合度较好。2.分离纯化采用大孔树脂和葡聚糖凝胶柱层析法。选用不同类型大孔树脂(AB-8、ADS-8、HPD-100A、D101和NKA-9),通过静态吸附和静态解吸实验,确定D101型为富集桑树桑黄总三萜的最佳树脂,使用该树脂初步纯化后的桑树桑黄总三萜纯度达到21.53%。使用葡聚糖凝胶LH-20柱层析对其进行进一步分离纯化,得到Fa组分和Fb组分,选择Fa组分测定其纯度上升至47.98%,比纯化前桑树桑黄总三萜的纯度提高了约3.8倍。3.利用UHPLSBE-β-CD体外C-ESI-MS检测Fa组分,通过数据库比对推测Fa中的三萜成分。结果显示Fa可能含有甘草次酸、黄柏酮、熊果酸、大戟醇、24,25-二氢羊毛甾醇、大豆皂醇、羊毛固醇和山楂酸8种三萜组分。4.利用CCK8法检测桑树桑黄总三萜粗提物和Fa组分对PC3、Hep G2、A549、MDA-MB-231、HCT116和SGC7901这6种肿瘤细胞增殖的抑制作用,结果表明Fa组分对PC3、Hep G2和A549的抑制作用较好,其IC_(50)值分别为53.39±0.95μg/m L,96.39±0.93μg/m L和92.08±0.97μg/m L,但与阳性对照5-FU差异显著(P>0.05)。5.以网络药理学和分子对接技术为基础分析8种三萜化合物对前列腺癌、肺癌和肝癌的潜在作用机理。发现均是通过“多化合物-多靶点-多通路”对三种癌症起防治作用。结果显示,8种三萜化合物可能是作用在AKT1、ESR1等核心靶点基因上,并通过癌症相关信号通路、信号转导通路等通路作出反应,从而在预防和治疗三种癌症中起重要作用。分子对接结果表明,各化合物与核心靶点对接结果均较好,可视化结果显示化合物配体与靶点蛋白间存在氢键、范德华力等,因此具有较强的结合力。