胃癌ACRG分子分型及临床病理特征的相关性研究

目的:了解本地区胃癌(Gastric cancer,GC)组织中分子病理改变情况,结合亚洲癌症研究小组(Asidilation pathologican Cancer Research Group,ACR获悉更多G)分子分型,采用免疫组织化学方法对各个亚型的临床病理特征进行相关性分析。方法:收集新疆医科大学附属肿瘤医院病理科2020年2月至2021年7月确诊胃癌的病例185例,应用免疫组织化学检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、E-Cadherin和P53蛋白表达情况,结合ACRG分子分型,统计分析使用SPSS 2Akt抑制剂2.0采用卡方检验、Fisher确切概率法及卡方组间多重比较对各亚型与临床病理特征进行相关性分析。结果:得到MSI亚型13例、MSS/TP53-亚型64例、MSS/TP53+亚型96例、MSS/EMT亚型12例,四种亚型在肿瘤原发部位、肿瘤分化程度、Lauren组织学分型、WHO组织学分型、淋巴结转移、临床分期、p T分期、p N分期均存在相关性。结论:使用免疫组化方法得到的胃腺癌的分子分型与ACRG分子分型的病例特征基本相符,MSI型,胃窦或幽门多见,淋巴结转移率最低,此型在所有分型中预后最好。MSS/TP53-(突变型)型,Lauren肠型与弥漫型相当,淋巴结转移率较高,多为p T_3、p T_4期且比例相当,在TP53相关分型中预后较差。MSS/TP53+(野生型)型,多见于胃窦或幽门,Lauren弥漫型,肿瘤浸润深度浅,多为p T1/2期,临床分期相对低,预后次于MSI型。MSS/EMT型,多见于胃体,分化差,Lauren弥漫型,部分为印戒细胞癌及黏液腺癌,临床分期高,淋巴结转移率最高,预后最差。

阿扎胞苷治疗老年骨髓增生异常综合征的效果

目的 分析阿扎胞苷治疗老年骨髓增生异常综合征患者的临床效果。方法 选取2019年2月至2022年2月濮阳市人民医院收治的老年骨髓增生异常Crizotinib价格综合征患者56例为研究对象。根据随机数字表法分为常规组与研究组,每组28例。常规组予以地西他滨治疗,研究组予以阿扎胞苷治疗。对比两组疗效、血常规[血红蛋白(hemoglobin, Hb)、骨髓有核细胞(all nucleated cells, ANC)、血小板(platelet, Plt)]、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、铁蛋白、维生素B12水平及不良反应发生率。结果 治疗后,研究组治疗总有效率(89.29%,25/28)较常规组(64.29%,18/28)高(χ~2=4.909,P=0.027<0.05)。治疗前,两组Hb、ANC、Plt水平比较差异未见统计学意义(P>0.05);治疗8个周期后,研究组Hb、ANC、Plt水平较常规组高(P<0.05)。治疗前,两组VEGF水平比较差异未见统计学意义(P>Hereditary cancer0.05);治疗8个周期后,研究组VEGF水平较常规组低(P<0.05)。治疗前,两组铁蛋白、维生素B12水平比较差异未见统计学意义(P>0.05);治疗8个周期后selleck NMR,研究组铁蛋白、维生素B12水平较常规组低(P<0.05)。研究组不良反应发生率(10.71%,3/28)较常规组(35.71%,10/28)低,差异有统计学意义(χ~2=4.909,P=0.027<0.05)。结论 阿扎胞苷治疗老年骨髓增生异常综合征患者可提高治疗效果,改善血常规指标,调节VEGF、铁蛋白、维生素B12水平,降低不良反应发生率。

一氧化氮处理对采后枸杞鲜果贮藏品质的影响及其机制

近年BYL719来,枸杞鲜果可以直接作为水果食用被广泛食用,但由于枸杞鲜果皮薄肉嫩的特性在采后极易发生腐烂,延长其果实的货架期,对枸杞鲜果的推广具有重要的意义。NO是一种微小的气体信号分子,也是生物体内分布广泛的信号分子之一,NO对非呼吸越变型果实的成熟衰老有明显的延缓作用。但是NO对采后枸杞鲜果的保鲜作用的研究尚未见过报道。本文将以宁夏枸杞鲜果为实验材料,以NO供体硝普钠溶液进行浸泡处理枸杞鲜果,明确NO处理对采后枸杞鲜果的生理生化、抗氧化酶系、抗氧化能力及代谢水平的影响。主要研究结果如下:(1)NO处理显著提高采后枸杞鲜果贮藏期的品质。设置不同浓度硝普钠溶液处理鲜果枸杞,都能显著延缓采后枸杞鲜果的成熟衰老,0.6m M硝普钠溶液处理效果最好,并显著降低了果实的腐烂率和失重率,延缓了果实硬度和可溶性固形物含量的下降,稳定果实表观色差的变化,使果实保持新鲜饱满、色泽红润的外观品质;同时延缓了采后枸杞鲜果中可滴定酸、可溶性蛋白质、叶绿素和类胡萝卜素含量的降解,同时降低H_2O_2、·O_2~-等活性氧产物及膜脂过氧化产物MDA在枸杞鲜果中的积累,提高了果实中的CAT、APX、POD等抗氧化酶的活力,提高了总酚、类黄酮和抗坏血酸等非酶抗氧化物质的含量;NO提高了采后枸杞鲜果的FRAP铁离子还原能力,提高了DPPH、ABTS自由基清除能力。以上结果表明,NO处理能够保持采后枸杞鲜果的营养物质在较高的水平,并增强了抗氧EPZ-6438半抑制浓度化酶系的活力,对其活性氧产物的积累起到了一定抑制作用,提高了非酶抗氧化物质的含量,提高了抗氧化能力,增强了采后枸杞鲜果的抗衰老能力。(2)NO处理对采后枸杞鲜果代谢水平的影响。对NO处理采后枸杞鲜果T2-Cgreenhouse bio-testK2、T4-CK4和T6-CK6三个比较组中的主要的差异显著代谢物进行筛选,主要差异代谢物分为两大类:一类为黄酮类代谢物如新橙皮苷、二氢查尔酮、芦丁、山茶甙A、槲皮素、橙皮素5-O-葡萄糖苷、三叶草素、荭草苷、异牡荆黄素、七叶苷和桑色素,另一类差异代谢物主要为脂质和类脂分子如栀子苷酸、亚甲基琥珀酸、甜菊双糖甙等。聚类分析结果表明,NO处理后,枸杞鲜果中黄酮类化合物落妇新苷、山茶苷A、芦丁、槲皮素、表没食子儿茶素、橙皮素5-O-葡萄糖甙、荭草苷、异牡荆黄素、七叶苷和桑色素等在贮藏的不同时间均有不同程度的升高,说明NO处理显著性诱导了黄酮类化合物含量的升高,从而提高了采后枸杞鲜果的抗氧化能力,延缓了采后枸杞果实的衰老。相关性分析结果表明:NO处理采后枸杞鲜果贮藏中黄酮类代谢物落妇新苷、山茶苷A、芦丁、槲皮素、表没食子儿茶素、橙皮素5-O-葡萄糖甙、荭草苷、异牡荆黄素、七叶苷和桑色素的升高,提高了采后枸杞鲜果的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和FRAP抗氧化能力,从而提高了采后枸杞鲜果的抗氧化能力,延缓了采后枸杞鲜果的成熟、衰老,延长了货架期。

外周血循环miRNA表达水平与卵巢癌术后铂类药物化疗效果及预后的关系研究

目的:探究卵巢癌患者外周血循环微小核糖核酸(miRNA)分子标志物表达水平与卵巢癌术后铂类药物化疗效果及预后的关系。方法:选取2018年1月—2019年12月于我院接受卵巢癌术后铂Pidnarulex半抑制浓度类药物化疗的患者50例为观察组,同期选择50例健康体检者为对照组。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组外周血血浆中miRNA的表达水平,观察分析卵巢癌术后患者铂类药物化疗的疗效及预后的关系。结果:在选择的11种miRNA中(miR-22、miR-29b、miR-106a、miR-106b、miR-130a、miR-124、miR-145、miR-150、mTetracycline antibioticsiR-199、miR-142、miR-493),仅有miR-22、miR-145、miR-124、miR-142、miR-106a被检出,其中miR-142、miR-22、miR-106a在健康体检者与卵巢癌患者的外周血表达中具有显著差异(P<0.05);通过检测得出,仅有miR-22水平在患者进行化疗后升高,其中miR-22水平高的患者多数对化疗敏感,卵巢癌患者外周血miR-22表达水平与预后情况呈正相关(P<0.05)。结论:卵巢癌的发展可能与血浆中的miR-22、miR-106a和miR-142水平升高有关,在化疗患者中PF-6463922 IC50,miR-22表达水平较高者表现出一定的敏感性,而miR-22表达水平较低者则不敏感,因此miR-22水平变化可作为预测化疗患者敏感性和预后的重要指标之一。

MeCP2 AT-hook1变异导致的基因表达差异的研究

研究背景和目的Rett综合征(RTT),是一种以神经发育倒退为特征的遗传罕见病,临床表现为出生后6-18月的正常发育期后,开始出现认知和运动发育退化,呈进行性加重,主要表现如语言技能下降和有目的地使用手能力丧失;同时,患者还往往出现疼痛感觉迟钝和自闭症行为等伴随症状。致病基因MECP2编码表观遗传蛋白MeCP2A/2B,它们高度同源,在人类中仅在N端12个氨基酸不同,其中2B在神经系统高表达。MeCP2含有功能已知的DNA结合域和转录抑制域,也包含功能未知的AT-hook1保守结构域。前期我们发现一例非典型RTT患者携带有位于AT-hook1功能域的临床意义未明错义变异R190H(对应于2A的位点,2B相当于R202H),并构建了 MeCP2位于AT-hook1(aa 184-195)部位八个保守氨基酸缺失(aa186-193,RGRGRPKG)的Mecp2ΔAT-hook1/y突变雄性小鼠,再现了部分RTT表型,如认知功能下降、焦虑、疼痛异常等,且小鼠海马区病理分析发现:CA1区细胞层变薄,其机制不清。qPCR发现抑制性神经元相关基因表达失调。本研究目的为了进一步深入探讨AT-hook1功能域对下游基因的表达影响。研究方法1.体内实验:Mecp2ΔAT-hook1/y突变雄性小鼠进行全脑组织转录组数据分析及qPCR验证相关差异基因的表达;2.体外实验:构建稳定表达MeCP2B、MeCP2BAT-hook1点突变(R202H)和MeCP2B AT-hook1缺失突变(ΔAT)的SH-SY5Y和HEK-293T稳定表达细胞株:SH-SY5Y/MeCP2B、SH-SY5Y/MeCP2B-R202H、SH-SY5Y/MeCP2B-ΔAT,以及 HEK-293T/MeCP2B、HEK-293T/MeCP2B-R202H、HEK-293T/MeCP2B-ΔAT,观察以下各种指标:1)突变的MeCP2的亚细胞定位;2)对抑制性神经元相关基因进行qPCR验证表达水平;3)对动物转录组学提示的G蛋白偶联受体(GPCRs)相关基因进行qPCR验证表达水平;4)细胞活力测定;5)凋亡信号通路检测:WB 检测 MeCP2B、MeCP2B-R202H 和 MeCP2B-ΔAT稳转株凋亡相关指标Cleaved Caspase-3;6)对基因HTR7编码受体蛋白5-HT7R通过WB验证表达水平;通过5-HT7R拮抗剂和激动剂的处理,观察稳定表达野生型MeCP2B和突变型MeCP2B的SH-SY5Y稳转株的活力变化;7)统计方法:本研究使用SPSS 22.0统计软件对数据进行分析,统计方法为单因素方差分析(one-way analysis of variaselleck抑制剂nce,ANOVA)或 T 检验(Student’s t test),p<0.05认为差异有统计学意义。研究结果1.Mecp2ΔAT-hook1/y突变雄性小鼠的转录组学分析显示GPCRs家族表达显著失调,与行为和情绪调节相关的G蛋白偶联受体中Htr1d、Drd3、Tacr2、Avpr1b、Gabra6和Adra2b 6种基因在Mecp2ΔAT-hook1/y突变雄性小鼠脑组织内呈显著下调,而Htr7、Chrnb4和Prdm2 3种基因显著上调。2.成功构建了 8种稳定表达细胞株:SH-SY5Y/MeCP2B、SH-SY5Y/MeCP2B-R202H、SH-SY5Y/MeCP2B-ΔAT、SH-SY5Y/Cstomach immunityN,以及 HEK-293T/MeCP2B、HEK-293T/MeCP2B-R202H、HEK-293T/MeCP2B-ΔAT、HEK-293T/CN,并在这些稳转株中进行了以下分析:1)MeCP2AT-hook1突变的蛋白核定位正常;2)AT-hook1突变引起抑制性神经元相关基因的表达发生变化;3)AT-hook1突变导致GPCRs相关基因表达发生变化;4)AT-hook1突变引起细胞活力下降和凋亡;5)激活5-HT7受体对AT-hook1突变引起的神经元细胞活力下降起保护作用。结论1.体内实验:MeCP2 AT-hook1突变导致模型鼠的GPCRs相关基因的表达和对神经活性配体-受体的相互作用的影响最为显著;2.体外实验:(1)MeCP2 AT-hook1突变影响抑制性神经元和GPCRs相关基因的表达;(2)MeCP2 AT-hook1突变不影响MeCP2蛋白的PD-0332991生产商亚细胞定位,但影响了细胞的活力并出现凋亡,通过激活5-HT7受体能够改善稳定表达MeCP2 AT-hook1 点突变和缺失突变的 SH-SY5Y 细胞的活力。

NLR联合PLR在预测早期儿童全身炎症反应综合征中的应用

目的 探究外周血中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)联合血小板淋巴细胞比值(PLR)在预测早期儿童全身炎症反应综合征(SIRS)中的应用。方法 选取2021年8月至2022年8月于东莞市Fluimucil Antibiotic IT妇幼保健院儿科就诊的60例SIRS患儿作为观察组,并选取同期于本院进行健康体检的60名儿童作为对照组;检测两组外周血常规指标、C-反应蛋白(CRP),计算NLR、PLR;Logis寻找更多tics回归分析各指标与早期SIRS的关系;绘制受试者操作特性曲线(ROC)分析各指标对早期SIRS的预测价值。结果 观察组患儿体内CRP、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(ANC)、血小板计数(PLT)、NLR、PLR水平显著高于对照组,淋巴细胞计数(LYMProteases抑制剂)含量显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistics回归分析显示,CRP、NLR、PLR水平升高为早期SIRS发生的危险因素(OR=4.813、22.607、1.022,P<0.05);ROC曲线分析显示,CRP、NLR、PLR以及NLR和PLR联合检测曲线下面积分别为0.764、0.720、0.752、0.996(P<0.05)。结论 NLR、PLR在早期SIRS患儿中水平升高,可单独或联合预测疾病的发生,联合检测的预测价值更高。

磁共振波谱相关代谢产物与人脑胶质细胞瘤基因分型及预后的相关性研究

目的:神经胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤,其早期定性诊断与分级对于患者手术方式的选择与预后的判断有着不可估量的价值。目前临床上根据世界卫生组织(WHO)引入的分子病理学检测指标可对胶质瘤进行基因分型,包含异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态、06-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化状态、端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变状态及染色体臂1p/19q的共缺失状态在内的大量的生物标志物为胶质瘤患者的预后和术后的治疗提供指导。磁共振波谱(MRS)是一种可以检测脑肿瘤代谢产物的影像学方式,在确定大多数脑肿瘤的类型和分级中发挥重要作用,明确胶质瘤代谢差异,或将为术前胶质瘤的分级以及基因分型的预测及手术方案的制订提供帮助。本研究旨在使用多体素磁共振波谱成像建立肿瘤中心区域、肿瘤周围区域以及对侧正常白质区域的代谢产物峰值,分析不同区域代谢产物与胶质瘤临床常见的基因分型及免疫组化标记物之间的差异及相关性,以确定不同基因类型的胶质瘤是否存在明显的脑代谢物的全局变化,进一步为胶质瘤的临床诊断及预后的判断提供影像学方面的依据。方法:我们的研究通过对79例胶质瘤患者临床信息(包括完整的术前MRS影像学资料、术后分子病理检测资料、随composite genetic effects访数据等)的采集,使用Mann-Whitney U检验及秩和检验对不同类别分子病理学指标与MRS在肿瘤中心区域、肿瘤周围区域以及对侧正常白质区域所测得的相关代谢产物进行比较,并将术中所获得的病灶组织进行免疫组化检测,使用spearman方式分析脑胶质瘤不同区域组织代谢成分与Ki-67及p53的相关程度。整理患者随访数据(包括存活时间、复发时间、是否进行放化疗等),利用Kaplan-Meier生存分析、单因素及多因素COX回归分析不同基因组别的胶质瘤患者预后情况,采用Logistic-Rank回归分析并结合MRS诊断效能较高的参数作为预后风险评估指标。本研究以P<0.05作为统计学意义指标。结果:肿瘤中心区域中,Cho/NAA及Cho/Cr与肿瘤的分级有着正向相关趋势,然而在瘤周区域及对侧正常白质区域中并没有发现类似的相关性;Cho/NAA及Cho/Cr比值在不同IDH1类型的胶质瘤中的差异具有统计学意义(Z值分别为-1.848和-2.234,P<0.05);在MGMT甲基化与非甲基化、TERT基因突变型和未突变型以及1p/19q不同缺失类型之间Cho/NAA、Cho/Cr及NAA/Cr的比值均无明显差异(P>0.05);此外Cho/NAA及Cho/Cr与Ki-67的表达有着不同程度的正向相关趋势(P<0.05),相关系数分别为0.286、0.352,Cho/Cr在与p53的表达上有着中等程度的正向相关趋势(P=0.012),相关系数为0.424,差异均有统计学意义,然而Cho/NAA在肿瘤中心区域与p53的表达之间尚不能认为存在正相关(P=0.051)。肿瘤周围区域中,Cho/NAA比值在IDH突变型与野生型胶质瘤之间存在显著差异(Z值为-2.719,P<0.01),Cho/Cr比值在MGMT启动AZD2281子甲基化型与非甲基化型之间具有差异(Z=-2.942,P<0.01),Cho/Cr、Cho/NAA和NAA/Cr的比值在不同TERT基因类型之间的差异不具有统计学意义(P>0.05),Cho/Cr在四种1p/19q分子亚型中的差异具有统计学意义(P<0.05),NAA/Cr比值由于样本量较少的原因其差异显示并不明显,其差异尚不具备统计学意义(P=0.053),Cho/Cr、Cho/NAA和NAA/Cr比值与Ki-67的表达在瘤周区域中没有明显的相关性(P>0.05),而Cho/NAA与p53的表达呈正相关,相关系数为0.317,NAA/Cr与p53的表达呈负相关,相关系数为-0.498,均有统计学意义(P<0.05),瘤周区域的Cho/NAA比值在五种分子亚型胶质瘤之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。肿瘤对侧正常白质区域中,Cho/NAA、Cho/Cr及NAA/Cr比值与胶质瘤WHO分级、IDH基因类型、MGMT启动子类型、TERT基因类型及1p/19q染色体缺失类型中的差异均不存在显著差异(P>0.05)根据多因素分析结果显示WHO分级、是否进行过放化疗、Cho/Cr及MGMT甲基化状态是患者生存相关因素,其中胶质瘤4级相对于2级是生存的危险因素HR:7.685(2.545-16.856),P<0.01,术后放化疗与否是患者生存的保护因素HR:0.110(0.017-0.716),P<0.05,肿瘤区域Cho/Cr的比值是患者生存的危险因素HR:3.396(1.133-9.098),P<0.05,MGMT甲基化状态是胶质瘤生存的保护因素HR:0.274(0.086-0.873),P<0.05。最后根据WHO4级、术后未进行放化疗、Cho/Cr>2.195及MGMT未甲基化的各项指标构建出不同风险评分的患者生存曲线图,结果显示Z-VAD-FMK低、中、高风险组平均生存时间分别为46.5、36.2、9.3个月,根据log-rank检验差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:胶质瘤分子病理学基因(IDH、TERT、1p/19q)的状态可能与脑代谢产物分布情况有关,通过磁共振波谱学可以进一步显示Cho、NAA、Cr的差异变化,并且初步发现MRS的相关参数与胶质瘤的增殖及肿瘤预后有关。

甲氨蝶呤鞘内注射对EGFR突变型奥希替尼耐药后肺腺癌脑膜转移患者的疗效及生存分析

背景与目的 奥希替尼是治疗表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)突变肺腺癌患者的有效靶向治疗药物,然而,出现继发脑膜转移的耐药患者的后续治疗方式仍有待探讨。本研究旨在分析奥希替尼耐药后继发脑膜转移的患者接受甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)、鞘内注射的疗效、安全性和预后。方法 回顾性分析2018年6月至2022年11月期间,34例接受甲氨蝶呤鞘内注射的奥希替尼治疗继发肺腺癌脑膜转移患者的临床资料。对比治疗前后患者的症状、实验室化验结果,分析治疗不良反应及生存期。结果 进行MTX鞘内注射后,67.6%(23/34)的患者脑膜转移症状改善。其中,31例患者接受了增强头颅磁共振成像(magnetic selleckchem Mirdametinibresonance imaging,MRICutimed® Sorbact®)复查,MRI结果提示,治疗前存在脑膜异常强化的10例患者中,30%(3/10)的患者强化较治疗前更多减轻。脑脊液化验提示,蛋白水平及肿瘤标志物水平较治疗前均有所下降,差异具有统计学意义(P <0.05)。奥希替尼联合MTX鞘内注射的中位无进展生存期为2.6个月,中位总生存期为12.7个月。结论 奥希替尼联合甲氨蝶呤鞘内注射治疗继发脑膜转移的EGFR突变型肺腺癌患者疗效显著,可延长患者生存期。

桑树MbMYB306调控白藜芦醇和类黄酮合成的机制研究

白藜芦醇与黄酮类化合物都来源于苯丙烷代谢途径,是一类重要的次生代谢产物,不仅在植物抗逆过程中发挥重要作用,而且具有多种生理活性。白藜芦醇与黄酮类化合物的生物合成不仅涉及多个结构基因的参与,还受到多种转录因子的调控,具有复杂的调控机制。MYB转录因子家族广泛参与调控植物的生长发育、抗逆胁迫、次级代谢产物的积累,对白藜芦醇和黄酮类化合物的合成也具有重要的调控作用。目前,关于植物体内MYB转录因子协调白藜芦醇与黄酮类化合物合成的机制还不清楚。本研究通过对不同发育时期桑椹中MYB基因的表达水平与白藜芦醇和黄酮类化合物含量的分析,发现一个R2R3-MYB转录因子MbMYB306基因的表达量变化与桑椹中白藜芦醇含量变化趋势呈正相关,而与黄酮类化合物含量变化呈负相关。因此,推测该转录因子对白藜芦醇和黄酮类化合物的合成具有一定的调控作用,但其具体的功能和作用机制还不清楚。本文研究了MbMYB306对白藜芦醇与黄酮类化合物合成的调控作用,鉴定了MbMYB306基因的上游调控因子及其互作蛋白质,初步揭示了MbMYB306协调白藜芦醇与黄酮类化合物合成的分子机制。研究结果不仅为白藜芦醇与黄酮类化合物合成机制的研究奠定了基础,同时也为桑树育种提供了基因资源,对于揭示桑树次生物质代谢调控机制具有重要意义。主要研究结果如下:(1)MbMYB306基因的克隆及其编码蛋白的结构特性。通过对不同发育时期桑椹的转录组及白藜芦醇和类黄酮含量变化的联合分析,发现MbMYB306基因的表达量变化与白藜芦醇含量的变化趋势一致,而与类黄酮含量的变化趋势相反。克隆得到了MbMYB306基因,其编码的蛋白质包含349个氨基酸,N端含有保守的R2和R3结构域,R3结构中包含有一个b HLH结合结构域。(2)MbMYB306基因的表达特性及MbMYB306蛋白的亚细胞定位。MbMYB306基因在叶中表达量相对较高,茎和根中相对较低。MbMYB306的启动子(p MbMYB306)包含有多种激素和光响应元件等,p MbMYB306具有ABA、GA、Me JA、光照诱导表达活性。MbMYB306定位于细胞核内。(3)MbMYB306基因促进白藜芦醇合成,抑制类黄酮的合成。MbMYB306基因在桑树叶片中瞬时表达,以及在毛状根中过表达都可促进转基因组织中白藜芦醇的积累,而抑制类黄酮的合成。MbMYB306可以促进苯丙烷途径上游的Mb4CL基因和白藜芦醇合成分获悉更多支途径中的MbSTS7基因的表达,但能抑制类黄酮合成分支途径的MbCHS、MbF3H、MbDFR、MbANS等结构基因的表达。酵母单杂交实验证明MbMYB306能够与MbSTS7基因启动子结合,能够显著增强MbSTS7基因启动子的转录活性,而抑制MbCHS、MbF3H、MbDFR和MbANS基因启动子的转录活性。(4)MbMYB306基因增强桑树的抗病性。灰霉菌侵染可以诱导MbMYB306和MbSTS7基因的表达。桑树叶片瞬时过表达MbMYB306或MbSTS7基因都可以显著增强受灰霉菌侵染叶片的过氧化物酶和过氧化氢酶活性,减少叶片中活性氧的积累,增强对灰霉菌的抗性。(5)调控MbMYB306基因表达的转录因子及MbMYInfectious hematopoietic necrosis virusB306相互作用蛋白的鉴定。通过酵母单杂交实验发现MbbZIP60能够直接与MbMYB306的启动子结合,荧光素酶报告基因实验和GUS活性检测实验结果CP-456773供应商表明MbbZIP60能够抑制MbMYB306启动子的转录活性;MbbZIP60基因在桑树叶片中瞬时超表达能抑制MbMYB306和MbSTS7基因的表达,促进MbDFR,MbCHS和MbANS基因的表达。荧光素酶互补实验证明MbMYB306与MbWRKY49之间存在相互作用。MbWRKY49基因在桑树叶片中瞬时超表达能够促进MbMYB306和MbSTS7基因的表达。

扶元和中膏单味药改善功能性消化不良的研究进展及网络药理学分析

【目的】联合网络药理学和分子对接技术,挖掘扶元和中膏君药党参、麸炒白术等各单味药物及复方改善功能性消化不良(Functional dyspepsia,FD)的潜在靶点和分子机制。【方法】对扶元和中膏中各单味药物改善功能性消化不良的研究进展进行综述;构建“FD-靶点-有效成分-扶元和中膏”网络,筛选出的交集基因进行GO分析和KEGG相关通路富集,分子对接分析。【结果】扶元和中膏14味药中有10味药具有改善FD的作用,其机制是通过调节胃肠激素水平发挥作用;网络药理学共获得扶元和中膏有效成分149个,与FD相关靶点2641个,扶元和中膏与FD的交集靶点281个,PPI网络筛选获得前5Belnacasan细胞培养个核心靶点,从构建的“FD-作用靶点-有效成分-扶元和中膏”网络筛选获得扶元和中膏前25个有效成分,对281个交集靶点的GO分析和KEGG分析表明,扶元和和中膏可能通过癌症通路、PI3K-Akt、MAPK等途径发挥治疗作用;分子对接结果表明2个主要成分(槲皮素和山奈酚)和3个关键靶点(AKT1、TNF、IL-6)均具有较好的亲和力。【结论】扶元和中膏的主要活性成分槲皮素和山奈酚可能通过癌症通路、PLX3397临床试验PI3K-Akt、MAPK等信号通路,作用于AKT1、TNF、IL-6等关键靶点改善功能性消化不genetic divergence良。