3种外源因子对家蚕围食膜结构及功能的影响

研究3种外源因子(荧光增白剂FB28、凝集素和灭幼脲)对家蚕围食膜结构、通透性和围食膜蛋白的影响.利用Thermo Scientific Quattro环扫电镜观察围食膜表面结构,尤斯灌流室测量围食膜对不同葡聚糖分子(180 D, 5 kD, 40 kD, 110 kD, 2 000 kD)的透过性,利用蛋白质谱检测围食膜蛋白的变化.结果表明:荧光增白剂FB28、凝集素和灭幼脲均对家蚕围食膜结构和功能有一Galunisertib小鼠定影响,但围食膜形态、表面结构和通透性改变程度有所不同.凝集素使围食膜中部增厚,48 h时观察到膜内表面有球形的电子致密结构,通透性显著增大;灭幼脲处理后,围食膜多层结构异常,层与层之间变得疏松,皱褶增多,通透性降低;荧光Median sternotomy增白剂FB28对围食膜的破坏最为迅速和剧烈,添食4 h时围食膜能透过2 000 kD的葡聚糖分子,6 h后围食膜基本消失.对荧光增白剂FB28处理后的围食膜进行SDS-PAGE电泳检测发现,在2 h和4 h时蛋白条带与对照组相比差异有统计学意义.质谱分析结果表明:处理后的围食膜新增了与免疫(Apolipophorin-Ⅲ, Beta-1, 3-glucanase)、昆虫生殖能力和抗逆能力(Methuselah-like protein 5)和蛋白质结合(60s ribosomal export prNirogacestat使用方法otein NMD3)相关的12种蛋白.

湖南草芍药籽仁蛋白质和脂肪酸的分析研究

【目的】为湖南草芍药的油用开发提供理论依据。【方法】分别用茚三酮反应和气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对草芍药籽仁氨基酸和油脂成分等进Fulvestrant溶解度行分析。【结果】湖南草芍药籽仁蛋白质含量为11.20%,其中清蛋白3.42%、球蛋白0.30%、醇溶蛋白2.30%、谷蛋白3.10%。含有17种氨基酸,在7种必需氨基酸中,蛋氨酸的AAS最低,为0.14,属第一限制氨基酸;苯丙氨酸的AAS为0.75,属第二限制氨基酸。籽仁含油率为28.37Medical Doctor (MD)%,含有14种脂肪酸Empagliflozin使用方法,不饱和脂肪酸含量为95.00%,饱和脂肪酸含量为4.05%,其中α-亚麻酸含量最高,为36.70%,其次是油酸和亚油酸,分别为29.02%和28.70%。不饱和脂肪酸含量比‘凤丹’高2.25个百分点,油酸和亚油酸含量分别比‘凤丹’高5.76个百分点和0.09个百分点,α-亚麻酸含量比‘凤丹’低3.70个百分点。【结论】湖南草芍药籽仁油不饱和脂肪酸总含量较高,具有开发为高含量亚麻酸、亚油酸和油酸优质食用油的潜力。

采前钨酸钠处理对龙眼果实退糖特性和抗氧化能力的影响

为延缓龙眼退糖及品质劣变的速度,从花后89 d开始,每隔7 d~10 d以500 mL/穗的清水(对照)、20 mmol/L和40 mmol/L钨酸钠连续喷施‘石硖’龙眼果实,并分析各处理对果实退糖特性和抗氧化能力的影响。结果表明,留树至花后130 d,对照和20 mmol/L Na_2WO_4喷施的果实可溶性固形物(total soluble solids,TSS)含量分别下降了8.69%、8.93%,而40 mmol/L Na_2WO_4处理组果实TSS含量仅下降4.10%,退糖被明显延缓。与对照组相比,40 mmol/L Na_2WO_4处理后的龙眼果Cytoskeletal Signaling抑制剂皮总类黄酮含量在花后130 d增加2.32 mg/g,总酚含量增加3.54 mg/g,留树中后期Biosafety protection过氧化物酶(peroxidase,POD)活性明显提高;同时,40 mABT-199mol/L Na_2WO_4处理后的龙眼果肉总类黄酮含量在花后130 d增加0.02 mg/g,总酚含量增加0.12 mg/g,苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)活性明显提高。因此,40 mmol/L Na_2WO_4喷施可明显延缓‘石硖’龙眼退糖并维持抗氧化物质的含量。

ALDH2基因多态性与局部晚期食管鳞癌患者放化疗预后的关系分析

目的 分析乙醛脱氢酶2(ALDH2)在食管鳞癌中的表达状态,研究基因是否影响放化疗预后,为食管癌预后提供新的生物学指标。方法 收集济南市章丘区人民医院2019-09-01-2021-10-30收治的接受同步放化疗治疗的不可切除局部晚期食管鳞癌患者80例,放疗采用调强适形放疗技术,化疗采用替吉奥联合铂类的方案,在治疗前抽取外周静脉血,采用sanger测序检selleck NMR测ALDH2基因多态性在食管鳞癌中的表达情况,采用生存分析方法分析无进展生存期(PFS)及总生存期(OS)影响因素,应用Kaplan-Meier行单因素分析,Cox回归行多因素分析。结果 食管鳞癌患者ALDH2 rs671GG(野生型)和AG(杂合突变型)表达率分别为57.50%和42.50%;ADH1B rs1229984TT(野生型)、TC(杂合突变型)和CC(纯合突变型)表达率分别为40.00%、41.25%和18.75%;所有患者中位随访时间为22.8个月,中位PFS为13.5个月(95%CI为10.022~16.978),section Infectoriae中位OS为22.8个月(95%CI为19.265~26.335)。单因素分析结果显示,影响PFS因素为T分期(P<0.001)、临床分期(P<0.001)、大体肿瘤体积(GTV,P=0.013)、ALDH2 rs671(P<0.001);影响OS因素为T分期(P=0.019)、临床分期(P=0.003)、肿瘤长度(P=0.011)、GTV(P=0.001)、肿瘤部位(P=0.049Captisol供应商)。多因素分析显示,影响PFS的因素为临床分期(HR=4.170,95%CI为1.719~10.114,P=0.002)、GTV(HR=2.087,95%CI为1.069~4.073,P=0.031)、ALDH2 rs671(HR=2.746,95%CI为1.476~5.110,P=0.001);影响OS的因素为GTV,HR=2.834,95%CI为1.295~6.201,P=0.009。结论 表达ALDH2 rs671 AG杂合突变基因型食管癌患者同步放化疗后复发风险高,其PFS与OS较短。ALDH2 rs671可作为接受同步放化疗治疗的不可切除局部晚期食管鳞癌患者预后标志物。

转录组和代谢组联合解析金花葵花生长过程中黄酮类含量差异

金花葵是锦葵科秋葵属植物,主要功效为清热、解毒、镇痛、抗疲劳、抗衰老、抑制肿瘤、抗氧化等;含有多种代谢产物,其中类黄酮化合物含量丰富。金花葵花中类黄酮含量最高,显著高于其他部位。本研究对金花葵花类黄酮进行了提Amycolatopsis mediterranei取纯化并对其体外抗氧化活性进行了研究,通过转录组与代谢组联合分析对金花葵花苞(HA)与花朵(HB)类黄酮生物合成途径进行了分析,克隆得到类黄酮生物合成途径重要酶基因——F3’H,并对其功能进行了初步分析。具体结果如下:1、金花葵花黄酮提取纯化及体外抗氧化活性研究。采用超声波辅助提取法提取金花葵黄酮类物质,用80%的乙醇浸泡12 h,提取时间为35 min,料液比为1﹕30,黄酮得率为8.17%。采用透析法进行纯化用于后续实验。金花葵黄酮浓度为1.0mg/m L时总还原能力为18.25%,铁离子还原能力为61.2%,羟基自由基清除率为57.41%,DPPH自由基清除率为93.63%。2、对金花葵花苞与花朵进行代谢组学分析,共鉴定到23类459种代谢物,其中酚酸类和黄酮醇类最多。金花葵花中花青素类物质含量最高,占总代谢物含量的73.95%。金花葵花中检出180种黄酮类化合物,共有89个差异代谢物。其中黄酮类差异代谢物21Tofacitinib生产商种。3、对金花葵花苞与花朵差异基因参与的代谢通路进行了富集,33899个差异基因富集在139条代谢通路上,代谢途径上分布的差异基因是最多的。GO功能分类和KEGG通路富集分析表明部分差异基因与类黄酮生物合成途径相关。类黄酮生物合成相关差异基因荧光定量PCR分析结果表明,CHS、CHI、FLS、F3H和F3’H等关键酶基因在HA中表达量高于HB。4、根据KEGG富集结果,选取类黄酮通路、黄酮和黄酮醇通路、异黄酮生物合成通路差异基因与差异代谢物进行联合分析,网络图表明,类黄酮3’-羟化酶基因——F3’H与差异代谢物槲皮素具有相关性。与HA相比,HB中类黄酮生物合成途径相关差异基因表达量降低,类黄酮合成减少。5、通过RT-PCR技术,克隆得到Hm F3’H的c DNA全长为1392 bp,ORF长度为1137 bp,编码378个氨基酸。生物信息学分析预测了其分子量52.14 k Da,等电点7.22,分子式为C_(2344)H_(3716)N_(620)O_(676)S_(23);为稳定的亲水性蛋白;二级结构以α-螺旋为主;Hm F3’HCanagliflozin体内实验剂量蛋白含有细胞色素P450功能区域,是细胞色素P450家族成员之一;亚细胞定位于细胞质;Hm F3’H具有多个磷酸化位点,有信号肽。系统进化分析表明该基因与大豆的F3’H亲缘关系最近。

传统五加皮酒的制备及其初步药效学研究

目的:随着生活质量的日益提高,口感柔和、保健滋补的新型低度酒越来越受到消费者的欢迎。目前市售的五加皮酒,大多是以粮食白酒为酒基,配以多味药材经浸泡、配制、调色等工艺制备而成。当前对于使用传统黄酒酿造工艺制备五加皮酒的研究未见报道,五加皮含有丰富的营养物质和多种功能性成分,开发以五加皮为原料的酿造酒,这既能扩大五加皮的产品用途,还能满足人们日益增强的健康饮酒意识,并且具有较大的经济利益及健康效益。本课题参考《本草纲目》、唐代《外台秘要》对五加皮酒的记载,优化其制备工艺,将制得的五加皮酒进行质量评价,并对其酚类成分含量进行测定,对其抗疲劳、抗炎镇痛作用进行初步研究。方法:1.以浸出物含量和绿原酸含量为指标,选取浸泡时间、溶剂量、提取时间3个因素进行五加皮水提工艺的单因素考察,结合单因素考察结果设计L_9(3~4)正交试验,得到五加皮水提液制备最佳工艺,并对最佳工艺进行验证;以还原糖含量的综合评分为指标,选取加曲量、糖化时间、糖化温度3个因素进行五加皮酒糖化工艺的单因素考察,结合单因素考察结果设计L_9(3~4)正交试验,得到五加皮酒糖化最佳工艺,并对最佳工艺进行验证。2.以前期研究所得最佳工艺制备五加皮酒,对其理化指标糖含量、非糖固形物含量、酒精度、p H值、总酸含量、氨基酸态氮含量和氧化钙含量进行评价;对其主要功能性成分绿原酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸进行含量测定,并进行方法学考察;对其挥发性风味成分进行气质联用仪分析;建立五加皮酒HPLC指纹图谱。3.选择运动耐力、运动所需的能源物质肝糖原以及运动代谢产物血清尿素氮进行动物药理实验,研究五加皮酒对小鼠负重游泳时间、小鼠血清尿素氮含量、小鼠肝糖原含量的影响,探讨五加皮酒对小鼠抗疲劳的作用。4.选用二甲苯致炎和醋酸致痛两个动物模型,对小鼠耳肿胀、小鼠耳组织中抗炎因子和致炎因子水平变化、小鼠醋酸扭体、小鼠血清中镇痛物质和致痛物质水平变化进行研究,探讨五加皮酒抗炎镇痛的药效学特点。结果:1.经单因素考察和正交试验,确定了五加皮最佳水提工艺为加12倍量水,浸泡40 min,煎煮90 min;五加皮酒的最佳糖化工艺为加曲量14%、糖化温度65℃,糖化50 min;经验证,优选的提取工艺提取效率高,重复性好,工艺稳定可行。2.按照国家黄酒标准GB/T13662-2010《黄酒》标准检测了五加皮酒的理化指标。五加皮酒总糖含量为15.5 g/L;非糖固形物含量为116.5 g/L;酒精度为10.3%vol;p H值为3.6;五总酸为8.0 g/L,氨基酸态氮为0.25 g/L;氧化钙含量为0.31 g/L,均符合传统半干型黄酒的要求;对三批五加皮酒中绿原酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸进行含量测定,拟定了五加皮酒中绿原酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸的含量限度,分别为每1m L五加皮酒中绿原酸的含量不低于0.14 mg、原儿茶酸的含量不低于0.024 mg、咖啡酸的含量不低于0.026 mg、阿魏酸的含量不低于0.0073 mg;通过GC-MS联用对五加皮酒挥发性成分进行分析,可知五加皮酒发酵结束初期时含有主要的挥发性物质有35种,其中酯类化合物10种,总含量为14.02%,以乙酯类种类最多;醇类化合物15种,总含量为71.84%,苯乙醇含量最高;建立了五加皮酒的高效液相色谱指纹图谱分析方法,并利用相似度指标对10个批次的五加皮酒进行质量评价;对不同批次的五加皮酒高效液相色谱图进行比较,对组分峰进行筛选,优选得到其中的16个共有组分峰作为特征蜂,指认了4个共有峰,指纹图谱的特征峰选择这16个峰,作为该产品质量鉴别的主要指标之一。3.在小鼠负重游泳实验中,白酒浸渍五加皮组小鼠负重游泳时间较五加皮酒三个剂量组;阳性对照组的小鼠负重游泳时间显著高于正常对照组(P<0.01),说明阳性药西洋参含片可显著延长小鼠负重游泳时间;同时五加皮酒中高剂量组也较正常对照组存在显著性差异(P<0.01),说五加皮酒中高剂量组可显著延长小鼠负重游泳时间。在小鼠血清尿素氮含量测定实验中,阳性对照组的小鼠尿素氮含量显著低于正常对照组(P<0.01),说明阳性药西洋参含片可显著降低小鼠血清中尿素氮含量;同时五加皮酒中高剂量Emricasan生产商组也均与正常对照组存在显著性差异(PPD0325901化学结构<0.01),说五加皮酒中高剂量组可显著降低小鼠血清中尿素氮含量。在小鼠肝糖原含量测定实验中,阳性对照组的小鼠肝糖原含量显著高于正常组。对照组(P<0.01),说明阳性药西洋参含片可提高降低小鼠体内肝糖原含量;同时五加皮酒中高剂量组也均与正常对照组存在显著性差异(P<0.01),说五加皮酒中高剂量组可显著降低小鼠体内肝糖原含量。4.在二甲苯致炎模型中,阳性药和五加皮酒中高剂量组对小鼠耳片肿胀抑制率分别为38.87%、36.99%、32.96%,与模型组小鼠相比小鼠耳片重量存在显著性差异(P<0.01)。与模型组相比,五加皮酒中高剂量组能够有效降低机体TNF-α(P<0.001,P<0.05)、组胺(P<0.01,P<0.05)水平,升高机体IL-10(P<0.01)水平。在醋酸致痛模型中,腹腔注射0.6%醋酸后模型组小鼠扭体阳性率为100%,出现典型的扭体动作躯干和后肢因刺激而伸长、腹腔凹陷、臀部高起。五加皮酒低、中、高剂量组扭体潜伏期与模型组相比扭体潜伏期有一定的延长,中、高剂量组有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,五加皮酒中、高剂量组能提高醋酸扭体小鼠血清中β-EP含量(P<0.01,P<0.05);显著降低醋酸扭体小鼠血清中PGE_2的含量(P<0.01,P<0.05)。结论:本研究优选的五加皮酒制备工艺稳定性好、操作性强,所酿制的五加皮酒理化指标均符合国家GB/T13662-2010《黄酒》标准。初步药效学研究发现五加皮酒高剂量组能显著延长小鼠负重游泳时间、降低运动时小鼠血清尿素氮的含量,增加小鼠肝糖原的储备从而发挥抗疲劳作用;五加皮酒中高剂量组能够有效抑制二甲苯引起的炎症反应,并且能够有效降低机体TNF-α、组胺水平,从而抑制炎症反应,同时提高机体抗炎因子IL-10的含量达到抑制炎症作用;五加皮酒中高剂量组能抑制醋酸扭体小鼠的扭体次数,并且提高醋酸扭体小鼠血清中β-EP的含量,抑制PGE_2的含量。课题对五加皮酒制备工艺、五加皮酒质量研究以及初步药效学3个方面进行了系统研究,确定了其最佳制备工艺,初步队其进行了质量评urogenital tract infection价,药效学研究证明了五加皮酒具有抗疲劳、抗炎镇痛的作用,为五加皮酒的进一步开发奠定了基础。

原发性开角型青光眼患者外路巩膜静脉窦精准定位方法

目的 探讨原发性开角型青光眼(POAGMedicina defensiva)患者外路巩膜静脉窦精准定位方法。方法 选取2020年8月至2021年10月于潍坊眼科医院就诊,确诊为POAG需行外路巩膜静脉窦相关手术治疗的患者40例(40眼)。根据术中测量方法不同将患者随机分为两组,每组各20例(2selleck产品0眼)患者。高清图像组患者采用显微镜截取高清图像后划线测量;无菌图纸组患者采用测绘圆规标记于无菌图纸后完成显微镜下测量。采用角巩膜分光照明法标记巩膜床半透明与不透明组织交界线并将其作为基线,内窥镜光纤前房内透照可于巩膜床清晰透见巩膜静脉窦返流血带,定位巩膜静脉窦后完整切除其外侧壁进行相关指标的长度测量。术前采用IOL-Master记录患者白到白距离(WTW)、眼轴长度(AL),术中测量患者巩膜静脉窦宽度(SW)、基线到巩膜静脉窦后缘距离(d1)、球结膜反折线到巩膜静脉窦前缘距离(d2)、基线到球结膜反折线距离(d3);分析各指标间差异及相关性。结果 高清图像组患者d2[(1.85±0.28)mm]和d3 [(2.63±0.30)mm]均3-MA抑制剂高于无菌图纸组[分别为(1.61±0.37)mm和(2.41±0.38)mm],差异均有统计学意义(均为P<0.05)。高清图像组和无菌图纸组患者WTW、d1与AL均呈正相关关系(均为P<0.05),d1、d2与d3亦均呈正相关关系(均为P<0.05),其余指标间均无明显相关性(均为P>0.05)。将40眼按照AL不同划分为3组:AL<23 mm为短眼轴组,23 mm≤AL<25 mm为中眼轴组,AL≥25 mm为长眼轴组。短、中、长眼轴组患者d1分别为(0.30±0.08)mm、(0.37±0.10)mm、(0.57±0.09)mm,组间差异有统计学意义(F=14.915,P<0.05);长眼轴组患者d1较短、中眼轴组更长(均为P<0.05)。结论 采用内透照法可于深层巩膜床上清晰透见巩膜静脉窦返流血带从而实现术中对巩膜静脉窦的精准定位;d1与POAG患者AL呈正相关关系。

膜结合型亚油酸异构酶BBI的纯化、酶学性质及活性位点分析

短双歧杆菌亚油酸异构酶(Bifidobacterium breve isomerase,BBI)是乳酸菌中单酶催化生成顺9,反11-共轭亚油酸单体(c9,t11-CLA)的亚油酸异构酶。作为一种具有九次跨膜结构的膜结合蛋白,BBI在原始菌中表达量极低,导致该酶的结构与功能关系研究变得困难,也限制了其进一步开发应用。本文通过比较BBI在模式微生物大肠杆菌和毕赤酵母中的表达水平差异,确定了BBI在两种表达系统中的适用范围,并在此基础上建立BBI的纯化流程,开展了酶动力学研究,同时预测和验证了该酶的活性位点,这些研究结果为该酶的进一步开发应用打下了坚实的基础。本文的主要研究结果如下:(1)膜结合型亚油酸异构酶BBI表达系统的优化与适用范围的确定。对大肠杆菌BBI的表达宿主、标签位置、诱导条件进行优化,确定最佳表达条件为:羧基端融合His标签的BBI在E.coli Rosetta菌株中进行表达,以1.0 mmol/L的IPTG诱导8 h。比较BBI在大肠杆菌和毕赤酵母系统中的蛋白表达水平,分析后确定利用毕赤酵母系统表达BBI并进行后续纯MLN8237研究购买化研究,利用大肠杆菌系统进行BBI的功能验证。(2)膜结合型亚油酸异构酶BBI纯化流程的构建。为实现九次跨膜的膜结合型蛋白BBI的高效分离和提取,首先进行膜组分分离条件的优化,确定10000 g、1 h作为膜组分富集的条件;接着通过对离子型、非离子型和两性离子型在内的10种去垢剂进行筛选,确定2%(w/v)的十二烷基-β-D-麦芽糖苷、4°C孵育2 h作为BBI的提取条件;最后联用亲和层析和凝胶分离层析,获得了分子量约为40 k Da的电泳纯BBI,比酶活为17.44μmol·min~(-1)·mg~(-1),纯化约669.54倍。(3)膜结合型亚油酸异构酶BBI酶学性质的研究。BBI纯酶的最适作用温度为37°C,最适p H为7.5~8.5,在37°C时半衰期为32.24 min,在p H 7.5~8.5范围内可以维持较高的催化活性。Ni~(2+)和Zn~(2+)可将BBI的酶活性提升至150%~160%,而Cu~(2+)、Fe~(2+)、Al~(3+)使BBI活力基本丧失。当以亚油酸、α-亚麻酸和γ-亚麻酸为底物时,BBI与γ-亚麻酸亲和度最高,其Km值为125.89 mg/L,k_(cat)/K_m值大小依次为α-亚麻酸、亚油酸和γ-亚麻酸,BBI对α-亚麻酸的催化效率最高。(4)膜结合型亚油酸异构酶BBI活性位点的预测与验证。基于蛋白结构模拟、分子对接和虚拟突变技术,分别构建了片段截短和点突变的重组菌进行验证。研究结果显示截去氨基端跨膜螺旋可能会造成BBI三维结构发生不利变化,影响其催化活性;截去羧基端跨膜螺旋可能导致BBI无法定位到膜上或者无法正确组装。活性空腔远端的跨膜螺旋结构对于BBI的活性构象,具有同样重要的作用。进一步利用分子对接模拟氨基酸突变前后的能量变化,利用大肠杆菌表达系统筛选了潜在的活性位点,通过毕赤酵母表Sickle cell hepatopathy达系统对潜在活性位点进行AMG510验证,最终确认了Y205为关键氨基酸残基,同时筛选获得了一株Y205M突变体株可使BBI相对酶活性提升至111%。

荔枝霜疫霉PlMAPK2在无性繁殖和致病过程中的功能研究

荔枝是中国重要的热带和亚热带水果,而荔枝霜疫病严重影响主产区荔枝的品质产量以及荔枝贮藏、运输。因此该研究以该病病原菌荔枝霜疫霉Peronophythora litchii为研究对象,研究其致病机制,以期发现新的致病关键基因和病害防控的分子靶标。本研究首先通过生物信息学方法,鉴定了荔枝霜疫霉MAPK家族成员PlMAPK2是Kss1/Fus3型丝裂原活化蛋白激酶,具有保守功能域STKc_MAPK。PlMAPK2在孢子囊和侵染1.5 h上调表达15倍以上,表明这阶段起着重要的调控作用。然后运用CRISPR/Cas9基因编辑技术对PlMAPK2进行敲除,成功得到PlMAPK2的两个敲除突变体:M113和M115。对PlMAPK2敲除突变体的游动孢子释放率、孢子囊数量及大小、菌丝生长、卵孢子大小及数量、细胞壁胁迫、过氧化氢胁迫和高渗胁迫等进行了测定。结果显示PlMAPK2的敲除突购买VX-661变体游动孢子释放率较野生型WT和对照组CK显著降低,但PlMAPK2的敲除不影响孢子囊数量及大小、菌丝生长和卵孢子大小及数量、细胞壁胁迫、过氧化氢胁迫和高渗胁迫,表明PlMAPK2在游动孢子的释放过程中发挥功能。为了探究游动孢释放率下降的原因,了解PlMAPK2是否参与孢子囊原生质割裂过程,利用特异性标记染料FM4-64、DAPI对PlMAPK2的敲除突变体的孢子囊细胞膜和细胞核进行染色,结果表明PlMAPK2在荔枝霜疫霉孢子囊割裂过程中发挥关键作用。为进一步分析PlMAPK2孢子囊不正常割裂的分子机制,我们分析了2个已报道的与孢子囊割裂相关的基因PlMYB1和PlMAD1与PlMAPK2之间的关系,结果表明PlMYB1和PlMAD1在PlMAPK2敲除突变体中显著下调表达。因此,PlMAPK2可能调控PlMAB1和PlMAD1进而影响孢子囊割裂过程。对PlMAPK2基因敲除突变体进行了致病力测定,结果显示PlMAPK2敲除突变体致病力较WT显著减弱,揭示了PlMAPK2对荔枝霜疫霉的致病性起重要作用。植物病原菌可分泌漆酶到胞外清除寄主植物产生的胼胝质和活性氧等,随后探究PlMAPK2的敲除是否会影响漆酶活性,结果显示intramedullary tibial nail,PlMAPK2基因敲除导致漆酶活性减弱;进一步分析了8个漆酶编码基因(Pl103272、Pl1104952、Pl106181、Pl106923、Pl106924、Pl106183、Pl111416、Pl111417)在PlMAPK2突变体中的转录水平,结果发现3个漆酶编码基因(Pl104952,Pl106183和Pl111417)显著下调,推测PlMAPK2的敲除影响了漆酶基因的转录水平进而影响漆酶活性。本研究发现了荔枝霜疫霉PlMAPK2在荔Trichostatin A体内枝无性繁殖和致病过程中发挥关键作用,为荔枝霜疫霉的病害防控提供了新的理论基础和靶标基因。

大豆酸奶对秀丽隐杆线虫体内抗氧化和寿命的影响

该研究寻找更多旨在利用野生型秀丽隐杆线虫N2对一款富含大豆异黄酮苷元的大豆酸奶进行生物活性评价。采用高效液相色谱法对该大豆酸奶中大豆苷元、黄豆黄素和染料木素的含量进行分析表明,结果表明其苷元含量比未发酵豆乳增加了26.4倍。采用体外抗氧化实验和野生型秀丽隐杆线虫N2对大豆酸奶的抗氧化活性进行评价,发现发酵后的Tamoxifen供应商混合豆乳对DPPH自由PSMA-targeted radioimmunoconjugates基、超氧自由基、ABTS+自由基的清除率分别为98.03%、73.77%、83.37%,比发酵前显著提高(P<0.05)。大豆酸奶样液可将秀丽隐杆线虫的平均寿命和最大寿命分别延长21.57%和22.58%;饲喂大豆酸奶样液后,线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性显著增强,体内活性氧(ROS)水平显著下降(P<0.05),线虫抗应激能力显著增加(P<0.05)。说明通过乳酸菌发酵制备高苷元含量的大豆酸奶,可有效提高产品抗氧化活性,并能延长秀丽隐杆线虫寿命。