Achr receptor

松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)作为一种世界性检疫害虫,严重危害松属植物,自1982年发现于我国南京中山陵,对我国森林生态系统影响巨大,造成不可估量的经济损失。根据国家林业与草原局最新公告,目前该病已在我国19个省(市、自治区)发生,随着松材线虫不断进化,“西进北扩”的趋势也愈发严重。因此,对松材线虫病致病机理的研究刻不容缓。考虑到其病害系统复杂,还有人为因素的参与,导致多年以来,松材线虫致病机理一直存在争议。根据研究室前期的实验结果,在松材线虫的致病过程中会分泌一种与其致病密切相关的类甜蛋白“BxTLP1”,通过免疫组化组织定位及酵母双杂交筛选与寄主马尾松的互作蛋白,以期从分子、细胞层面解析关键致病因子Bxtlp1在致病过程中的分子作用机制;并通过微生物组学、代谢组学、转录组学技术研究了松材线虫入侵马尾松后,树体内微生物群落的变化、关键代谢物的筛选和早期入侵后马尾松基因组整体的转录情况。主要结果如下:(1)根据松材线虫分泌蛋白组分析和前期研究基础筛选出松材线虫致病松树过程中的重要分泌蛋白TLPs。q RT-PCR定量结果表明,Bxtlp1,Bxtlp7和Bxtlp8基因在不同虫态下的表达量差异明显。Bxtlp1在二龄幼虫(L2)表达量达到峰值,而Bxtlp7和Bxtlp8在三龄幼虫(L3)表达量达到峰值;通过原核表达体系表达得松材线虫BxTLP1蛋白不具有β-1,3-葡聚糖酶活性,BxTLP7蛋白和BxTLP8蛋白具有β-1,3-葡聚糖酶活性;通过调整优化线虫干扰体系,采用双链RNA干扰的方法分别将松材线虫体内的Bxtlp1,Bxtlp7和Bxtlp8基因沉默。结果显示,最佳ds RNA干扰引物是ds TLP1-2、ds TLP7-3、ds TLP8-1;最佳干扰时间是36 h;松材线虫的虫态对于干扰效率没有显著影响;Bxtlp1和Bxtlp7基因被干扰后会降低松材线虫的取食速率和繁殖率;对于Bxtlp8进行RNA干扰,不会影响松材线虫的繁殖和取食;在本氏烟草中瞬时表达Bxtlp1,Bxtlp7和Bxtlp8,发现Bxtlp1定位于细胞膜和细胞核,而Bxtlp7和Bxtlp8只观察到定位细胞核。在松材线虫在侵染过程中,从定位的情况来推测BxtRSL3lp1更有潜力与马尾松发生互作联系;免疫组化试验证明,松材线虫Bxtlp1定位虫体的食道腺Impoverishment by medical expenses和肠道,说明BxTLP1蛋白可以被分泌至松材线虫体外;(2)通过对马尾松转录组学数据的分析,我们筛选出早期马尾松响应松材线虫的最核心基因模块“MEmagenta”,该模块中的基因在氧化磷酸化、氨基糖和核苷酸糖代谢、植物MAPK信号通路中高度富集;(3)采用酵母双杂交膜蛋白体系,从松selleck NMR材线虫侵染马尾松的酵母文库中筛选BxTLP1的靶标互作蛋白,诱饵蛋白自激活试验证明BxTLP1没有自激活现象。在30个候选靶标基因中筛选8个阳性克隆进行酵母一对一验证,明确在酵母中的互作结果。进行免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co IP)实验发现8个阳性克隆中只有4个靶标基因可以和BxTLP1相互作用,分别是p MS-3(含有RPN7/PCI结构域的26S蛋白酶体)、p MS-6(包含Ribosomal L40e超家族的蛋白)、p MS-7(Ubiquitin-like泛素蛋白酶)、p MS-26(超氧化物歧化酶)。(4)使用LEf Se(Linear discriminant analysis Effect Size,线性判别分析)对枯萎松树和健康松树进行比较分析,以确定健康和枯萎松体内差异的主要群落。结果表明,在枯萎的松树中,放线菌和类杆菌是细菌群落的差异标志群落,而在健康的松树中,变形菌门(Proteobacteria)门中的根瘤菌目(Rhizobiales)是主要的细菌群落(图6-3B)。同时,健康松树中真菌群落的差异标记是马拉色菌目(Malasseziales),银耳目(Tremellales),粪壳菌目(Sordariales)和镰刀菌属(Fusarium),而假球壳科(Pleosporaceae)是枯萎松中的关键真菌群落;(5)利用基于LC-MS/MS的代谢组学来了解松材线虫在发病过程中寄主代谢产物的差异。共鉴定了307种差异代谢物,其中246种代谢物显著上调,61种代谢物显著下调。通过KEGG富集分析和差异代谢物注释分析,发现聚乙烯代谢物在枯萎的松树中显著积累。分析相对含量后,发现共有12种核心代谢物,其中包括10种黄酮类代谢物和2种芳香族聚酮化合物代谢物;综上所述,通过建立马尾松与松材线虫互作的酵母双杂交文库,筛选得到靶标蛋白4个,推测松材线虫关键致病因子Bxtlp1,可能通过介导寄主细胞的泛素化调节、氧化应激、MAPK分子信号转导通路去影响寄主的免疫防御过程,从而加剧病情;松材线虫入侵寄主体内对微生物群落变化的影响,可能导致分泌毒素的群落富集,从而对寄主细胞造成伤害;松材线虫的入侵造成寄主体内的聚乙烯代谢物显著富集,主要集中在黄酮类代谢物,这些物质的过量积累可能对寄主细胞发生毒害,从而影响寄主的防御反应。这些工作帮助加深了对松材线虫致病机理的研究,为松材线虫病疫情防控技术产出提供理论依据。

目的:分析永存原始玻璃体增生症(PHPV)和先天性纤维血管瞳孔膜(CFPM)的临床特征异同。方法:回顾性分析2006-03/2021-12在空军军医大学西京医院眼科接受手术治疗的PHPV(PHPV组)和CFPM患儿(CFPM组)的眼部生物测量参数、临床表现、病变的形态学特点。结果:纳入PHPV患儿56例61眼，CFPM患儿24例25眼；PHPV和CFPM的发病年龄相似、无性别差异，均以单眼患病为主，其占比分别为91%和96%。PHPV合并白内障患眼可有多种并发症和眼发育异常，CFPM主要为不同程度的瞳孔区堵塞及形态异常。PHPV组和CFPM组单眼患病患Lapatinib儿患眼前房深度(ACD)均小于对侧眼，手术年龄≤24月龄患儿患眼眼轴长度(AL)均小于对侧眼(P<0.05);PHPV组单眼患病患儿患眼角膜直径(CD)小于对侧眼、眼压高于对侧眼(均P<0.05);CFPM组单眼患病患儿患眼与对侧眼CD、IOP比较均无显著差异(P>0.05)。PHPV组患儿患眼ACD小于CFPM组患眼(P<0.05)。术中发现PHPV纤维血管膜组织位于晶状体后、玻璃体腔内，而CFPM纤维血管膜位于虹膜与晶状体前囊膜之间，很少累及确认细节晶状体。结论:PHPV和CFPM有非常相似的临床特点，提示PHPV和CFPM可能是永存胚胎血管(PFV)的不同表β-lactam antibiotic现形式，但PHPV病变范围更广、病情更复杂。

邻苯二甲酸酯类(phthalates,PAEs)是工业和消费品中的常见增塑剂,可用于增加塑料产品的柔韧性和其他理想特性,广泛应用于聚氯乙烯(PVC)产品、玩具、医疗器械、清洁产品、化妆品。邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBselleck激酶抑制剂P)作为广泛应用的增塑剂之一,主要通过吸入、皮肤接触和食物链进入人体,对生物体具有神经毒性、生殖毒性、遗传毒性、肝肾毒性和免疫毒性。过敏性哮喘是最常见的慢性呼吸道炎症,其全球患病率正逐年增加,环境因素是过敏性哮喘的重要危险因素。众多研究表明DBP与过敏性哮喘的恶化密切相关,可加重哮喘炎症与进展,然而cancer-immunity cycle这一过程的潜在机制仍不清楚。因此在本研究中,通过卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导过敏性哮喘小鼠模型,探讨DBP在过敏性哮喘的作用以及潜在的分子机制。雄性BALB/c小鼠随机分为5组,每组20只,包括阴性对照组(生理盐水SAG核磁)、DBP组、OVA组、DBP+OVA组和Ferrostatin-1拮抗组(DBP+OVA+Fer-1),DBP浓度为40 mg·kg~(-1)。使用卵清蛋白(OVA)构建过敏性哮喘模型,包括致敏和激发两个阶段,使用DBP灌胃染毒,暴露周期为36天,暴露结束后取血取材。通过肺功能分析观察小鼠的气道高反应性,使用酶联免疫吸附试剂盒(ELISA)检测小鼠血清中免疫球蛋白E(Ig E)、OVA特异性免疫球蛋白(OVA-Ig E)、OVA特异性免疫球蛋白G1(OVA-Ig G1)、小鼠肺匀浆中白介素4(IL-4)、小鼠肺匀浆中白介素13(IL-13)含量来分析气道过敏性炎症。通过苏木精-伊红(HE)染色及胶原纤维(Masson)染色分析肺组织病理变化。通过检测小鼠肺匀浆中Fe~(2+)、铁死亡蛋白(GPX4、PTGS2、SLC7A11、ALOX15、PEBP1)、脂质过氧化(ROS、lipid ROS、GSH、MDA、4-HNE)以及损伤分子相关模式(DAMPs)变化来分析铁死亡情况。与对照组相比,OVA组的气道高反应性加重、气道过敏性炎症加剧、肺组织病理学损害加重、铁死亡以及脂质过氧化加剧。与OVA组相比,DBP+OVA组的气道高反应性、气道过敏性炎症、肺组织病理学损害、铁死亡以及脂质过氧化更为严重。而铁死亡通路阻断剂Fer-1组(DBP+OVA+Fer-1),与DBP+OVA组相比较,各项指标均有明显好转,过敏性哮喘有所缓解。以上结果表明,40 mg·kg~(-1)DBP可加重过敏性哮喘,铁死亡通路阻断剂Fer-1可缓解过敏性哮喘,减轻肺部病理改变,提示铁死亡通路可能介导了DBP加重的过敏性哮喘。

海棠是重要的园林树种,其花色叶色丰富多变,具有极高的观赏性。低氮条件下海棠叶片可变红,影响其观赏价值与经济价值。为揭示低氮条件下海棠花叶片花青苷合成调控机制,本研究以海棠花(Malus spectabilis)叶片作为试验材料,对低氮条件下海棠花离体叶片进行表型观察与色素含量测定。结合全转录组测序,筛选出花青苷合成相关差异表达的m RNA、lnc RNA和mi RNA,构建了竞争性内源RNA靶标模拟调控机制,而后通过一系列分子生物学技术进行了关键基因的互作关系验证与基因功能验证,深入探讨了低氮条件下海棠花青苷合成的调控机制。主要研究结果如下:1.通过体视显微镜观察发现低氮条件下海棠花离体叶片表皮细胞和维管束中有红色色素沉积。通过高效液相色谱仪测定发现,矢车菊素-3-O-半乳糖苷的含量在低氮条件下上升,表明矢车菊素-3-O-半乳糖苷积累是低氮条件下海棠花叶片由绿变红的主要原因。2.通过全转录组测序技术筛选了低氮条件下海棠花离体叶片中的差异表达基因,获得4,030个差异表达的m RNA(DEm RNA),GO及KEGGSI-IX体内实验剂量G分析结果显示花青苷生物合成相关通路的基因在表达水平上产生了较大变化。根据转录组数据推测Ms MYB62-like可能在低氮条件下花青素生物合成中起负调控作用。此外,筛选出91CP-456773浓度2个差异表达的lnc RNA(DElnc RNA),以及389个差异表达的mi RNA(DEmi RNA)。以差异表达基因为基础,构建了竞争性内源RNA(ce RNA)靶标模拟调控网络,该调控网络由81个DEmi RNA-DEm RNA和80个DEmi RNA-DElnc RNA关系对组成。经逐步分析后预测出在低氮条件下参与花青苷合成调控的e TM(内源靶标模拟物)-mi R858-MsMYB62-like模块。3.亚细胞定位结果表明MsMYB62-like特异性定位于细胞核,酵母转录激活活性试验结果表明其具有转录激活能力。酵母双杂交和双分子荧光互补结果表明Ms MYB62-like不与被广泛报道为花青苷合成通路关键调控因子的Msb HLH3互作。酵母单杂交结果表明Ms MYB62-like可以与Ms F3’H的启动子结合,但是不能与Ms CHS、Ms CHI、Ms DFR、Ms ANS、Ms UFGT的启动子结合。双荧光素酶试验进一步验证了Ms MYB62-like具备抑制Ms F3’H的启动子活性的能力。当Ms MYB62-like在苹果愈伤组织中稳定过表达、或者在苹果果皮和海棠花叶片中瞬时过表达时,结构基因Ms F3’H的表达量明显下调,花青苷含量显著降低。当Ms MYB62-like在苹果果皮进行瞬时基因沉默时,结构基因MsF3’H的表达量上调,花青苷含量显著升高。以上结果表明在低氮条件下Ms MYB62-like通过抑制Ms F3’H的启动子活性的方式负调控花青苷合成。4.通过双荧光素酶报告系统和GUS染色及酶活测定试验证实miR858可以通过碱基互补配对的方式切割Ms MYB62-like,抑制其表达。当mi R858在苹果愈伤组织中稳定过表达或者在苹果果皮和海棠花叶片中瞬时过表达时,Ms MYB62-like的表达量显著下降,而花青苷含量上升。说明mi R858可以通过靶向切割Ms MYB62-like,削弱其对花青苷合成通路的抑制作用,促进结构基因的表达,致使花青苷合成。5.通过双荧光素酶报告系统和GUS染色及酶活测定试验发现,当eTM858-1或e TM858-2与mi R858和Ms MYB62-like共表达时,Ms MYB62-like的表达水平上升,表明e TMHomogeneous mediator858-1和e TM858-2可以通过竞争性结合mi R858,削弱其对靶基因Ms MYB62-like的切割,起到促进Ms MYB62-like表达的作用。通过苹果果皮和海棠花叶片瞬时遗传转化试验证实,当e TM858-1或e TM858-2与mi R858和Ms MYB62-like共表达时,与对照组相比,mi R858表达量下降而Ms MYB62-like表达量上升,与此同时花青苷含量降低。这表明在e TM-mi R858-Ms MYB62-like模块中,e TM858-1和e TM858-2可以通过竞争性结合mi R858,干扰mi R858对其靶基因Ms MYB62-like的切割,使MsMYB62-like的表达水平上调,通过此途径抑制花青苷的生物合成。

目的 探讨丁苯酞联合替格瑞洛对缺血性脑血管病(ICD)患者的疗效及对心理状态、认知功能的影响。方法 选取2020年1月至2022年1月新乡市中心医院收治的120例ICD患者为研究对象，并通过随机数字表法分为对照组(60例)、联合组(60例)。所有患者均接受常规治疗，对照组接受替格瑞洛治疗，联合组接受替格瑞洛www.selleck.cn/products/cx-5461联合丁苯酞治疗。治疗Pine tree derived biomass2周，对比两组疗效、心理状态、神经功能、认知功能、血清学指标[降钙素基因相关肽(CGRP)、同型半胱氨酸(Hcy)]及药物不良反应(ADR)情况。结果 联合组总有效率为93.33%,较对照组的80.00%高(P<0.05);两组治疗2周后汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、神经功能缺损(NDF)量表评分及血清Hcy水平均较治疗前低(P<0.05),联合组低于对照组(P<0.05);两组治疗2周后蒙特利尔认知功能评定表(MoCA)评分及血清CGRP水平均较治疗前高(P<0.05),联合组高于对照组(P<0.05);联合组、对照组ADR分别为8.33%、5.00%,组间比较差异无统计学意义(P>0.selleck IDN-655605)。结论 对ICD患者应用丁苯酞联合替格瑞洛治疗，疗效较佳，可调节血清CGRP、Hcy水平，改善神经功能、认知功能，减轻负面心理，且ADR较少。

【研究背景】创伤性脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)是全球创伤相关损伤中致残和瘫痪的主要原因之一。每年有5000万以上的人患有不同程度的创伤性脑损伤。仅在中国,以人口为基础的TBI死亡率约达到每10万人中有13例。在战场条件下,颅脑战伤作为战伤中的重要部分,其阵亡率和伤亡率历年来均占各类型战伤的首位,因此,对脑损伤的基础研究和临床治疗对提升部队战斗力和军人健康水平具有重大意义。铁死亡是由脂质、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和铁的异常代谢引起的一种不同于其他程序性的细胞死亡。目前在帕金森病、脑出血和创伤性脑损伤中被发现是导致中枢神经系统损伤的主要诱因之一。脑内铁积累增加所导致的脂质过氧化、线粒体功能障碍、活性氧增加等都可导致神经元的损伤。神经元是脑中的主要细胞,具有接受、整合、传导和传递信息的功能,它的病理变化主要包括神经元的急性坏死以及中央性尼氏小体的溶解等。认知功能需要依赖于神经元突触之间释放多种神经递质来进行信息传递,而释放神经递质需要触发钙离子通道以及大量能量支持。在创伤性脑损伤急性期,过度的神经炎性反应不利于神经元的存活及修复,进而加重了组织损伤,因此减少铁的过度积累、抑制脂质过氧化、维持线粒体功能稳态和调控急性期的炎症反应成为创伤性脑损伤后神经修复的重要策略。最近几年,骨来源的内分泌因子对机体多种系统的调节功能越来越受到关注。成骨细胞特异性分泌的骨钙素表现出调节全身葡萄糖和能量代谢、生殖和神经认知等功能,脑内激素改变参与突触神经传递基因产物的产生以及脑结构的重塑。骨钙素(Osteocalcin,OCN)是由骨器官分泌的具有重要调控功能的骨源性因子,有完全羧化(Carboxylated)和不完全羧化(Undercarboxylated)两种形式。前者主要沉积于骨基质,而后者则通过循环系统作用于除骨以外的多个器官来发挥调节功能。OCN可以穿过血脑屏障,结合中脑、脑干以及海马来调节单胺类神经递质的水平、维持海马的神经发生并且改善空间学习记忆的障碍。研究报道,母体来源的uc OCN在新生鼠的神经发生和发育过程中起到了非常重要的作用,但是其是否参与成年机体脑创伤后神经修复过程仍然有待探索。因此,本课题首次探究OCN在铁死亡中的作用,研究OCN在创伤性脑损伤中有关神经修复和保护方面的作用机制,为创伤性脑损伤的治疗提供新靶点。【研究目的】(1)明确TBI后OCN在神经损伤中的表达情况;(2)明确TBI后OCN在神经修复调控中的作用;(3)探索TBI后神经修复与创伤局部微环境的相互作用关系及机制。【研究方法】动物实验:建立小鼠创伤性脑损伤动物模型,通过神经行为学实验检测小鼠TBI后的运动平衡与协调能力、焦虑抑郁样情绪以及空间认知学习能力,在创伤后不同时间点留取损伤部位脑组织。利用Western blot检测OCN、Bcl2、NEUN、BDNF、PSD95蛋白以及铁死亡相关蛋白GPX4在不同时间点的表达变化;HE染色和尼氏染色检测神经元结构损伤情况;HE染色检测神经元损伤情况;利用免疫荧光检测不同胶质细胞的活化情况;免疫荧光双重染色检测OCN不同类型神经细胞中共定位情况;q RT-PCR检测炎症因子IL-1β、TNF-α的表达水平。细胞实验:Erastin诱导HT22细胞发生铁死亡,q RT-PCR检测炎症因子IL-1β和TNF-α的表达水平;Western blot检测铁死亡相关蛋白GPX4和SLC7A11的蛋白表达变化;CCK-8法检测不同浓度的Erastin对HT22细胞存活率的影响以及OCN的表达变化;si RNA转染实验检测HT22细胞中敲低OCN后铁死亡相关蛋白medical testing的表达变化并通过外源给予uc OCN进行回复实验;通过分子对接预测uc OCN与GPX4之间的相互作用力;利用GPX4 si RNA转染实验观察靶点干扰后uc OCN发挥的效应。【研究结IDN-6556使用方法果】(1)TBI后小鼠损伤部位脑组织OCN表达显著升高TBI术后1、3和7天的损伤部位脑组织OCN蛋白表达水平增高,且在第3天达到高峰并持续到7天。其中,疲劳转棒实验和平衡木测试结果表明,和sham组相比,TBI后小鼠在疲劳转棒的时间降低,通过平衡木时间有所增加,运动协调以及平衡能力均下降;悬尾实验、强迫游泳实验结果表明,TBI后小鼠的不动时间增加,出现了抑郁样行为;旷场实验检测TBI小鼠在旷场中心时间和路程显著降低,出现焦虑样行为;水迷宫实验结果表明TBI后小鼠探索时间明显升高,空间记忆能力下降。q RT-PCR检测TBI后小鼠损伤局部脑组织炎症因子表达水平增加;尼氏染色观察TBI后小鼠损伤局部脑组织神经元细胞凋亡。免疫荧光检测TBI后小鼠损伤局部的星形胶质细胞和小胶质细胞活化。(2)OCN敲除可导致小鼠焦虑抑郁样行为,并影响空间记忆能力构建基因敲除鼠,对同批次WT和OCN~(-/-)小鼠同时进行TBI造模,疲劳转棒实验和平衡木测试结果表明,与WT sham组相比,OCN敲除后并不影响小鼠的运动平衡能力,与WT TBI组相比,OCN~(-/-)TBI组运动平衡和协调能力无显著差异;悬尾实验、强迫游泳实验结果表明,OCN敲除后的小鼠不动时间延长,表明OCN敲除可导致小鼠抑郁样行为,TBI后加重了这种现象;旷场实验结果表明,与WT组相比,OCN敲除后小鼠在旷场中心时间和路程显著降低,出现焦虑样行为。水迷宫实验结果表明,与WT组相比,OCN敲除后影响小鼠的探索时间,空间记忆能力下降,OCN~(-/-)组TBI探索时间最长。NSC 127716说明书(3)神经元是小鼠TBI后OCN在损伤局部脑组织发挥神经修复作用的潜在效应细胞取TBI小鼠脑组织做冰冻切片,免疫荧光染色共定位结果显示,OCN主要在神经元上表达,且与星形胶质细胞特异性蛋白抗体GFAP不存在共定位,小胶质细胞存在部分共定位,说明神经元是小鼠TBI后OCN在损伤局部脑组织发挥神经修复作用的潜在效应细胞。q RT-PCR、Western blot检测小鼠TBI后损伤部位脑组织神经元NEUN、突触后致密蛋白PSD95、神经营养因子BDNF以及铁死亡关键蛋白GPX4在不同时间点的表达变化。(4)OCN敲除后对TBI小鼠损伤局部铁死亡及免疫微环境的影响及相关通路变化免疫荧光检测OCN敲除后不同组小鼠TBI损伤周围脑组织胶质细胞的变化,结果显示,与WT sham组相比较,OCN~(-/-)sham组没有明显的变化,OCN~(-/-)组的小鼠TBI后星形胶质细胞和小胶质细胞活化明显;q RT-PCR检测OCN敲除后TBI后不同组小鼠损伤周围脑组织炎症因子的表达变化,结果显示,与WT sham组相比较,OCN~(-/-)sham组没有明显的变化,与WT TBI组相比,OCN~(-/-)TBI组小鼠TBI损伤周围脑组织炎症因子明显升高;尼氏染色观察OCN敲除后不同组小鼠损伤局部神经元的结构损伤情况,结果显示,与WT组相比较,OCN~(-/-)sham组的尼氏体不均匀分布,受损神经元出现收缩,细胞质染色加深,而OCN~(-/-)TBI组小鼠神经元数目比WT TBI组小鼠显著减低;Western blot检测OCN敲除后的小鼠铁死亡相关蛋白GPX4的表达情况,与WT组相比,OCN~(-/-)sham组GPX4表达降低,OCN~(-/-)TBI组GPX4表达最低,并检测了OCN敲除后小鼠不同组小鼠损伤脑组织相关通路的变化,结果显示,提示OCN可能通过调节Akt-m TOR和Sirt1/PGC1a通路进一步发挥对TBI后神经损伤的保护作用。(5)干扰OCN的表达后加重海马神经元HT22细胞发生铁死亡采用不同浓度Erastin对HT22细胞进行处理,来诱导HT22细胞铁死亡。30μmol/l Erastin作用于HT22细胞24h后细胞贴壁能力下降,间隙变宽,呈现出细胞损伤的形态表现;加入5ng/ml uc OCN后,单层培养细胞中的漂浮细胞明显减少,贴壁性增强,细胞间隙恢复,有效缓解了细胞损伤状态,显示出uc OCN对细胞具有一定保护作用。Western blot实验检测表明,OCN敲低后,与Eratin单独处理组相比,HT22细胞中GPX4和SLC7A11蛋白表达进一步减少,说明细胞内OCN的存在有助于维持神经元细胞内铁死亡关键蛋白的稳定性。接着在敲低OCN并诱导发生铁死亡的细胞模型中再次补充uc OCN进行回复实验,结果显示,给予外源性uc OCN后铁死亡相关蛋白GPX4和SLC7A11的表达水平得到恢复,进一步印证了uc OCN对HT22细胞的保护效应。通过Western blot发现,体外实验再次验证OCN缓解HT22细胞发生铁死亡有可能通过调节Akt-m TOR和Sirt1/PGC1a通路实现的。【研究结论】TBI后小鼠损伤部位脑组织OCN表达水平显著升高,OCN敲除可导致小鼠的焦虑与抑郁样行为,并且影响其空间记忆能力;神经元是小鼠TBI后OCN在损伤局部脑组织发挥神经修复作用的潜在效应细胞;OCN敲除后导致TBI小鼠损伤局部免疫微环境炎症因子的升高,加重胶质细胞活化和铁死亡;干扰OCN的表达后进一步导致海马神经元HT22细胞发生更为严重的铁死亡;uc OCN能够部分抑制HT22细胞死亡,这一作用有可能通过调节Akt-m TOR和Sirt1/PGC1a通路介导的。该研究结果不仅明确了OCN对TBI神经损伤中发挥积极调控作用,同时为治疗创伤性脑损伤提供了潜在的干预靶点和治疗策略。

青稞是藏区人民的Lorlatinib研究购买主要粮食，含有丰富的淀粉、脂肪、蛋白质、维生素、膳食纤维、β-葡聚糖、多酚、氨基酸等多种营养和功能成分，SB203580体外具有降血脂、降血糖、降胆固醇、抗氧化、调节胃肠道等保健功能。青稞麸皮厚、口感差、难消化，经常需通过加工处理才可食用。过热蒸汽、烘烤、炒制、蒸、煮等热加工方法以及萌发是青稞常见的加工方式，青稞经过不同的加工过程中会对其营养成分的含量和结构产生一定的影响，其降血糖、降血脂等生物活性也会有所改变。本文就近10年来不同加工方式对青稞营养成分及生物活性的影响进行了综述，并对青稞加工过程变化规律和影响因素进行了探讨，最后对营养健康产品开发进行了展望。以期对青稞营养功能的深入研究、品质提升、加工工艺创新cost-related medication underuse、新产品开发等具有一定的参考价值。

目的 基于蛋白酶激活受体2(PAR-2)/瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)信号通路探讨低分子肝素钠联合醋酸地塞米松治疗小鼠瘙痒模型的有效性。方法 选取6周龄C57小鼠48只，采用随机数字表法将其中24只制成干皮症(AEW)慢性瘙痒小鼠模型，剩余24只制成DMK-2206化学结构NFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型。将AEW慢性瘙痒、DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型均按照随机数字表法分为模型对照组、地塞米松组、肝素组、联合用药组，每组6只。模型对照组仅在小鼠脱毛部位给予0.9%氯化钠溶液；地塞米松组在小鼠脱毛部位涂抹醋酸地塞米松乳膏；肝素组在小鼠脱毛部位涂抹低分子肝素钠软膏；联合用药组在小鼠脱毛部位涂抹醋酸地塞米松乳膏、低分子肝素钠软膏。各组小鼠均持续干预7 d。比较各组小鼠干预前、干预7 d后瘙痒次数及PAR-2、TRPV1蛋白表达量。结果 在AEW慢性瘙痒、DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型中，干预7 d后，联合用药组、肝素组、地塞米松组小鼠瘙痒次数均少于模型对照组，且联合用药组小鼠瘙痒次数少于肝素组、地塞米松组(P<0.05)。干预7 d后，在AEW慢性瘙痒小鼠模型中，肝素组、联合用药组TRselleckchem LEE011PV1蛋白表达量低于模型对照组，联合用药组低于地塞米松组、肝素组(P<0.05);地塞米松组、肝素组、联合用药组PAR-2蛋白表达量低于模型对照组，联合用药组低于地塞米松组、肝素组(P<0.05)。干预7 d后，在DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型中，肝素组、联Gadolinium-based contrast medium合用药组TRPV1、PAR-2蛋白表达量低于模型对照组，联合用药组低于地塞米松组、肝素组(P<0.05)。结论 低分子肝素钠软膏可通过阻断PAR-2/TRPV1信号通路改善瘙痒症状，将其与醋酸地塞米松联合治疗对该通路的抑制效果更加显著。

食物中丙烯酰胺(AA)来源广泛,接触丙烯酰胺会有很多危害,可引发神经毒性、免疫毒性、致癌等,丙烯酰胺也能够导致机体产生过敏反应,引起机体释放组胺,然而有关丙烯酰胺的致敏活性研究较少。本文以丙烯酰胺为研究对象,以RBL-2H3细胞作为脱颗粒模型,结合网络毒理学,证明了丙烯酰胺能够通过影响肥大细胞脱颗粒诱导过敏反应发生,并且采用邻苯二胺和柠檬酸合成碳点,初步将其应用于丙烯酰胺诱导肥大细胞脱颗粒的研究中。由于碳点具有高荧光稳定性和低毒性的特点,使其成为被研究的对象,为检测丙烯酰胺致敏活性的研究提供一定的方法。具体内容如下:(1)网络毒理学研究:收集丙烯酰胺及其代谢产物潜在的作用靶点,收集与过敏疾病有关的靶点,获得与丙烯酰胺及其代谢产物和过敏疾病的交集靶点,采用STRING数据库得到交集靶点的PPI网络,通过Cytoscape软件(version3.9.0)匹配Cytohubba插件,对靶点网络进行优化,获得Degree排名前十的相关核心靶点,采用Metascapvirologic suppressione对交集靶点的相关通路进行富集,得到GO分析和KEGG分析结果。富集分析结果表明,丙烯酰胺及其代谢产物与过敏疾病相关的靶点主要为EGFR、CASP3、ICAM2、PTGS2、ACE等,通过分析表明,丙烯酰胺及其代谢产物参与过敏的机制与PI3K/AKT信号通路相关。(2)采用RBL-2H3肥大细胞脱颗粒模型,测定丙烯酰胺对细胞释放β-氨基己糖苷酶(β-Hex)、组胺以及IL-6释放水平,利用荧光显微镜观察细胞钙离子内流情况。结果表明,在0-1.0 m M的浓度范围内,丙烯酰胺促进致敏的肥大细胞释放更多的的炎性介质,促进细胞钙离子内流,与丙烯酰胺浓度呈一定的依赖性,说明丙烯酰胺可以增强致敏肥大细胞炎性介质的释放。(3)以邻苯二胺为氮源、柠檬酸为碳源,采用微波辅助合成的方法制备氮掺杂碳点(N-CDs),优化反应条件,制备碳点。FG-4592体外采用紫外吸收光谱仪、荧光光谱仪、傅里叶红外光谱仪和X射线光电子能谱仪(XPS)进行表征,最后实现肥大细胞标记并将其应用于丙烯酰胺致敏活性的研究。结果表明,邻苯二胺和柠檬酸的质量比为1:1,反应时间为2 min,微波功率850 W的条件下合成的碳点荧光强度最佳。通过对碳点进行表征可知,碳点的紫外吸收波长在310 nm左右,不同激发波长的荧光光谱表明,碳点的最佳荧光强度对应的激发波长为310 nm,傅里叶红外光www.selleck.cn/products/wnt-c59-c59谱与X射线光电子能谱表示该碳点含有C=N、-COOH、C-N/C-O等化学键。CCK8法检测发现在0-3.0 mg/m L的浓度范围内,碳点对肥大细胞无毒作用,并且β-Hex、组胺的释放结果表明碳点在一定浓度范围内不会诱导肥大细胞脱颗粒。此外,将碳点作用于细胞进行成像,经过丙烯酰胺处理后,碳点在荧光显微镜照射下表现出理想的荧光性能。因此,碳点可作为细胞成像的工具,应用于丙烯酰胺诱导的肥大细胞脱颗粒的研究中。

目的：研究预见性护理对减少Staurosporine万珂皮下注射治疗多发性骨髓瘤患者不良反应的作用。方法：选取2021年5月至2022年4月在本院进行治疗的78例多发性骨髓瘤患者的临床资料，随机数表法作为分组依据，分成2组，每组39例。对照组行常规护理，观察组行预见性护理，比较两组不良反应(血小板减少、周围神经病变、胃肠道反应、局部注射反应)发生情况。结果：观察组共1例患者出现血小板减少，NCI-CTCAE分级为Ⅰ级；共3例患者出现胃肠道反应，NCI-CTCAE分级为1级1例，Ⅱ级2例；共3例患者出现周围神经病变，其中NCI-CTCAE分级为Ⅰ级2例，Ⅱ级1例；无局部注射反应。对照组共3例患者出现血小板减少，其中NCI-CTCAE分级为Ⅰ级1例，Ⅱ级2例；共6例患者出现胃肠道反应，其中NCI-CTCAE分级为Ⅰ级3例，Ⅱ级3例；共5患者出现周围神经病变，其中NCI-CTCAE分级为Ⅰ级3例，Ⅱ级2例；共5例患者出现局部注射反应，其中NCI-CTCAE分级为Ⅰselleck AZD6738级3例，Ⅱ级2例。观察组不良反应总发生率为17.95%(7/39),与对照组的48.72%(19/Medical drama series39)相比较低，差异有统计学意义(χ~2=8.308,P<0.05)。结论：预见性护理可降低万珂皮下注射治疗多发性骨髓瘤患者发生血小板减少、胃肠道反应、周围神经病变等不良反应的发生率。