Achr receptor

目的：探讨硼替佐米为主的化疗方案治疗新发多发性骨髓瘤(MM)的效果。方法：随机选取南华大学附属长沙中心医院收治的81例新发MM患者为研究对象，分为观察组(n=40)和对照组(n=41),对照组予以硼替佐米、环磷酰胺联合地塞米松(VCD)药物治疗，观察组予以硼替佐米、沙利度胺联合地塞米松(VTD)方案治疗，观察两组患者临床疗效、骨髓瘤指标、内皮因子水平以及不良反应发生率。结果：治疗后，观察组总有效率高于对照组，差异有统计学FUT-175使用方法意义(P<0.05);治疗前，两组血清M蛋白、免疫固定电泳(IFE)、骨髓浆细胞、血清游离轻链(κ-λ)比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后，两组均下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);治疗前，两组血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、statistical analysis (medical)可溶性内皮细胞间黏附分子(sICAM-1)比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后，两组均BI 10773半抑制浓度下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应总发生率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：VTD化疗方案应用于MM患者可以调节血管内皮因子水平，降低骨髓瘤指标水平，提高临床疗效，且降低不良反应发生率。

目的:探讨美托洛尔联合稳心颗粒对心房颤动(简称房颤,atrial Fibrillation,AF)患者导管消融术后房性心动过速(简称房速)的治疗价值,以期望进一步减少导管消融术后AF复发,优化AF患者导管消融术后抗心律失常治疗方案。方法:本研究选取AF行导管消融术后空白期(3个月内)出现房速,但无AF发作的患者290例。采用掷币法随机分为四组,分别为:稳心颗粒组(即W组,n=65)、美托洛尔组(即M组,n=91)、美托洛尔联合稳心颗粒组(即MW组,n=88)、空白对照组(即C组,n=46)。又根据患者干预前房性早搏(简称房早)次数及分布特点,将房早进行分组,Ⅰ组:房早次数<1000次/48h,Ⅱ组:房早次数1000-3000次/48h,Ⅲ组:房早次数>3000次/48h。收集患者一般资料,治疗前后生化指标、N端前脑钠肽、动态心电图、超声心动图。比较四组患者房速次数、最长房速心搏次数、房早次数/48h、平均心率,左房内径(Left Atrial Diameter,LAD),左心室舒张末期内径(Left Ventricular End-diastolic Diameter,LVDCH-223191体外d)、N端前脑钠肽(N-terminal Forebrain Natriuretic Peptide,NT-Pro BNP)、生化结果、AF复发情况以及患者研究过程中不良反应情况。使用SPSS 26.0软件进行统计分析。结果:1、本研究计划纳入290例患者,W组65例,M组91例,WM组88例,C组46例。在研究过程中,W组失访1例,复发8例;M组失访2例,复发10例;MW组失访1例,复发8例,C组失访1例,复发6例。总失访率1.72%(5/290),总复发率11.23%(32/285)。四组患者术后复发率进行比较,W组复发率12.50%(8/64),M组复发率11.23%(10/89),MW组复发率9.19%(8/87),C组复发率13.33%(6/45)。四组进行比较,MW组复发率最低,但差异不明显(P=0.881),无统计学意义。最终有效数据共253例。W组56例、M组79例、MW组79例,C组39例。2、基线比较:四组患者在性别、年龄、体重指数(Body Mass Index,BMI)、既往合并基础病、术前AF类型、合并用药等方面没有显著差别(P>0.05)。在干预前四组患者在心功能相关指标(即LAD、LVDd、LVEF与NT-proBNP)方面均差异不明显(P>0.05)。3、疗效比较:3.1四组患者房速变化情况:药物干预的三组房速阵数均较1年前减少,C组患者房速阵数较1年前增加。MW组、M组、W组、C组1年后房速阵数进行比较(6.25±5.86vs.6.44±5.68 vs.10.33±5.42vs.13.96±5.01)其中MW减少最明显,有统计学意义(P<0.05)。3.2四组患者各组房性早搏变化情况:药物干预的三组患者各组Lipid Biosynthesis房性早搏数量均较1年前减少,C组患者各组房性早搏数量较1年前增多。MW组、M组、W组、C组患者随访1年后每组房性早搏数量进行比较分别为I组(155.76±128.72vs.159.14±104.48vs.240.83±134.00vs.577.29±275.89,P<0.01)。II组(786.69±202.01vs.921.91±556.37vs.1498.17±316.31vs.2090.81±745.28,P<0.01)。III组(812.20±273.50vs.1315.68±439.86 vs.2276.20±853.19vs.3598.44±282.89,P<0.01)。三组房性早搏均为MW减少最明显,差异均具有统计学意义。3.3四组ABT-263化学结构患者房速最长心搏次数变化情况:药物干预的三组患者1年后最长心搏次数均较1年前减少,C组患者房速最长心搏次数较1年前增多。MW组、M组、W组、C组患者进行比较(6.27±3.82 vs.6.76±3.71vs.7.22±3.88vs.12.46±6.06)其中MW减少最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。3.4四组患者平均心率变化情况:药物干预的三组患者1年后平均心率均较1年前下降,C组患者平均心率较1年前升高。MW组、M组、W组、C组患者1年后平均心率进行比较(67.56±9.29 vs.68.52±9.77 vs.72.22±9.93vs.75.01±6.49),MW组患者平均心率较其他三组显著降低(P<0.05)。3.5四组患者随访1年后LA、LVD,LVEF,NT-proBNP与1年前相比均无明显差异(P>0.05)。4、安全性比较:4.1四组患者1年后血常规、肝肾功能与1年前均未见明显差异(P>0.05)。4.2进行药物干预三组患者服药后不良反应发生率分别为:W组7.1%(4/56),M组13.9%(11/79),MW组8.9%(7/79),W组不良反应发生率最低,但三组之间进行比较,差异不明显(P>0.05)。本研究未出现与药物相关严重不良反应及过敏事件。结论:1、AF消融术后出现房速应用美托洛尔联合稳心颗粒在减少房速阵数、及房速最长心搏次数、平均心率、房早次数方面有一定疗效。2、应用美托洛尔联合稳心颗粒治疗AF消融术后房速,对减少AF的复发率有一定作用,但作用不明显。3、AF消融术后应用美托洛尔联合稳心颗粒可能对患者术后心房、心室大小和心功能的改善有一定作用,但无明显疗效。4、美托洛尔联合稳心颗粒治疗AF导管消融术后房速,可以减少因美托洛尔增量产生的副作用,提高安全性,具有临床价值。

目的 探究通过监测基础阻抗变化辅助损伤指数(LSI)指导房颤射频消融术的临床疗效及安全性。方法 回顾2019年5月至2021年5月应用LSI指导房颤射频消融病例50例为对照组。2021年6月至2022年6月新入选符合房颤射频消融适应证患者50例为研究组，初始消融仍按对照组模式，术中监测每个消融点的基础阻抗变化，如1selleck0 s内基础阻抗下降>5Ω,或消融点完成后阻抗下降不足10Ω,调整消融参数再次消融。如5 s内阻抗下降>15%或升高，立即终止消融。比较两组消融效果、随访情况及并发selleck HPLC症。结果 研究组PVI消融时间显著少于对照组；研究组PVI一次性单圈隔离率明显高于对照组(P<0.05);研究组术中透视X射线剂量显著低于对照组，研究组消融点的基础阻抗下降率显著高于对照组(P<0.05);随访发现，两组术后空白期内复发率，6个月和1年成功率比较无统计学差异；研究组通过监测阻抗优化手术，无气爆及心包Serologic biomarkers填塞等并发症，对照组有4例患者发生5次气爆，其中1例气爆后出现心包压塞，发生气爆消融点的基础阻抗下降率均>20%,前5 s内下降均≥15%。结论 监测基础阻抗变化可辅助LSI指导房颤消融术中每个消融点的消融终点，提高了手术效率及安全性。

目的 探讨KIFC1基因在宫颈癌细胞中的功能及对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法 设计靶向KIFC1基因的sgRNAs并基于p Sp Cas9(BB)-2A-GFP载体构建重组质粒，共转染至He La细胞。通过流式细胞Anticancer immunity分选、有限稀释和测序验证筛选单克隆敲除细胞株。采用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光法检测敲除细胞的KIFC1转录及蛋白表达水平，利用相差显微成像、荧光共聚焦显微成像观察细3-MA小鼠胞核、微管骨架等细胞表型。通过生长曲线绘制、EdU标记、吖啶橙染色分析细Transmembrane Transporters抑制剂胞增殖、细胞周期及细胞凋亡情况。结果KIFC1基因缺失导致He La细胞形态结构发生显著变化，多核、微核及异常微管骨架的细胞明显增加，细胞周期紊乱，细胞晚期凋亡数量显著升高，细胞增殖能力下降（均P<0.05）。结论KIFC1基因缺失影响He La细胞微管骨架的组装并形成异常延伸和细胞分裂，进而导致细胞核形态异常、染色质丢失、细胞周期停滞、凋亡增加。

目的:观察并分析温阳通络调和营卫法治疗系统性硬化症的临床疗效,客观评价其疗效及安全性。方法:选取2020年10月-2022年12月期间于临沂市中医医院风湿免疫科治疗的阳虚兼营卫不和型系统性硬化症患者44例,分组采用随机对照的方法,将44例患者分为对照组和试验组,每组患者各22例。对照组采用常规西医治疗,试验组在西医治疗的基础上加用自拟“温阳通络调营方”。观察治疗前和治疗12周后患者的症状和实验室理化指标,应用SPSS26.0比较中医证候积分、实验室理化指标、改良的Rodnan皮肤评分(m RSS)、雷诺情况评分(RCS)等的变化并进行分析讨论。结果:最终纳入研究结果分析的病例41例;其中试验组RAD001分子式入组22例,完成观察21例,脱落1例;对照组入组22例,完成观察20例,脱落2例。1.中医证候积分比较:与对照组相比,试验组中医证候总积分改善情况更显著,差异具有统计学意义(P<0.05);分别比较分析两组患者治疗后的皮肤硬化、雷诺现象、指趾末端溃疡、关节痛、神疲乏力、形寒肢冷、恶风寒及时有汗出8个单项证候积分,其中雷诺现象、关节痛、神疲乏力、恶风寒四症,差异具有统计学意义(P<0.05),试验组比对照组疗效更显著;皮肤硬化、指趾末端溃疡、形寒肢冷、时有汗出四Z-VAD-FMK临床试验症,差异无统计学意义(P>0.05),两组疗效相当。2.实验室指标比较:比较两组患者治疗后的抗核抗体(ANA)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)四项指标的下降水平,其中试验组CRP下降水平优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后RF、ESR水平较治疗前明显下降,组内差异有统计学意义(P<0.01),组间差异无统计学意义(P>0.05);治疗后的ANA滴度均较治疗前有所下降,其中试验组的组内差异有统计学意义(P<0.05),组间差异无统计学意义(P>0.05)。3.RCS评分、m RSS评分比较:与对照组相比,治疗后试验组的雷诺情况改善更明显,组间RCS评分差异有统计学意义(P<0.05);m RSS评分差异无统计学意义(P>0.05),两组疗效相当。4.总体疗效评价:对两组患者治疗后的总体情况进行中医疗效评定,试验组总有效率为93.2%,对照组总有效率为70.0%,差异有统计学意义(P<0.05),试验组中医疗效优于对照组。5.安全性评价:试验组未发生不良反应,对照组发生1例不良反应,患者胃肠道不适,与应用羟氯value added medicines喹可能有关,加用奥美拉唑肠溶胶囊治疗,经治疗症状消失,两组均完成观察。结论:“温阳通络调营方”可显著改善SSc中医证候积分,有效缓解SSc相关雷诺现象、关节受累、神疲乏力以及恶风寒等症状,明显降低RCS评分,有效改善ANA滴度水平,安全性良好。

目的:研究肿瘤相关巨噬细胞通过调控VEGF干预食管癌细胞的放射敏感性,并初步探讨其机制。方法:通过佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)和人白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)的刺激将人单核细胞THP-1诱导为肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs);采用免疫荧光实验检测CD68、CD163的表达;将人食管鳞癌细胞株KYSE-150、TE-1与诱导成功的TAMs通过Transwell小室进行非接触式共培养后进行后续实验;采用CCK-8法、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验、TUNEL凋亡实验和克隆形成实验检测细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡和Nirogacestat放射敏感性;将TAMs与KYSE-150细胞按照3:1的比例混合接种于BALB/c裸鼠,并对荷瘤小鼠进行局部照射,观察各组辐照前后小鼠的成瘤率、成瘤时间和瘤体体积变化,评估肿瘤的生长情况,并通过HE染色、免PD-0332991供应商疫组化法检测辐照前后肿瘤组织的病理形态及Ki-67蛋白表达水平;以LV-VEGFA-RNAi慢病毒为载体构建KYSE-150、TE-1稳转细胞株;采用q RT-PCR技术检测VEGFA m RNA的表达;采用Western blotting法检测VEGFA、MAPK、p-MAPK、BCL-2、Snail、CD68、CD163蛋白的表达水平。结果:THP-1细胞经过PMA、IL-4依次作用得到的M2型巨噬细胞与只经PMA作用得到的M0型巨噬细胞相比,表面分子CD68表达下降(P<0.01),而CD163表达明显升高(P<0.0001)。共培养后,KYSE-150、TE-1细胞增殖率明显增加(P<0.05);共培养组穿透Transwell小室基底膜的食管癌细胞数量明显高于对照组(P<0.01);与对照组相比共培养组的划痕愈合宽度更窄(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.01);随着辐照剂量的增加,两组细胞的克隆形成率均逐渐减弱,但共培养组的克隆形成率明显强于对照组。与对照组相比,共培养组D_0、D_q、SF_2均升高(P<0.05),KYSE-150共培养细胞的SER_(Do)和SER_(Dq)分别为0.94和0.92,TE-1共培养细胞的SER_(Do)和SER_(Dq)分别为0.90和0.88;共培养组VEGFA m RNA和蛋白的表达均升高(P<0.01);共培养组在辐照前后肿瘤体积和重量均显著高于其他各组(P<0.01);各组裸鼠移植瘤组织细胞形态和大小不同,辐照组出现了较多的坏死肿瘤组织,而共培养组中坏死肿瘤组织相对较少;共培养组肿瘤组织中Ki-67蛋白的表达在辐照前后均高于其他各组。下调KYSE-150、TE-1细胞的VEGFA后,将TAMs与VEGFA-nc细胞和VEGFA-si细胞共培养后行辐照,与VEGFA-nc组相比,VEGFA-si组放疗后细胞增殖率明显降低(P<0.01),VEGFA-si组穿透Transwell小室基底膜的细胞数量显著减少(P<0.001),划痕愈合宽度增加(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.01);随着辐照剂量的增加,VEGFA-si组的克隆形成能力也显著降低,VEGFA敲除后,D_0、D_q、SF_2均降低(P<0.05),KYSbelowground biomassE-150共培养细胞的SER_(Do)和SER_(Dq)分别为1.18和1.18,TE-1共培养细胞的SER_(Do)和SER_(Dq)分别为1.21和1.22;与对照组相比,共培养组能促进VEGFA、p-MAPK、BCL-2和Snail蛋白表达,而抑制VEGFA表达后,p-MAPK、BCL-2、Snail的表达明显下降(P<0.05)结论:1、TAMs可促进食管癌细胞的增殖、侵袭、迁移、辐射抵抗并抑制其凋亡;2、TAMs可促进食管癌细胞VEGFA的表达;3、TAMs通过调控VEGF影响食管癌细胞的放射敏感性。

目的 研究邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)是否诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡并影响其增殖。方法 取对数增长期的人卵巢颗粒细胞系KGN细胞，给予不同浓度(0、100、200、400、800、1 600μmol/L)MEHP处理24 h。通过普通光镜观察不同浓度MEHP处理后KGN细胞形态的改变；用CCK-8检测MEHP对细胞活力和增殖能力的影响；采用蛋白免疫印迹(WB)观察铁死亡相关蛋白(ACSL4、GPX4、SLC7A11、FTH1)在KGN细胞中的表达情况；使用细胞铁含量检测试剂盒、丙二醛(MDA)含量检测试剂盒、活性氧(ROS)荧光探针(DCFH-DA)及超氧化物阴离子荧光探针(DHE)分别检测对照组和400μmol/L MEHP处理组细胞的铁含Genomic and biochemical potential量、MDA、ROS和超氧化物阴离子水平。结果 (1)光镜观察显示，400μmol/L及以上MEHP处理使KGN细胞皱缩变圆，形态异常。(2)CCK-8结果显示400μmol/L及以上MEHP处理抑制细胞增殖，且具有剂量依赖性(P<0.05)。(3)100、200μmol/L MEHP处FUT-175 IC50理组KGN细胞铁死亡相关蛋白表达无显著改变(P>0.05);400μmol/L MEHP处理组KGN中ACSL4蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而GPX4、SLC7A11、FTH1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。(4)400μmol/L MEHP处理使得KGNPexidartinib MW细胞的铁含量、MDA水平显著上升(P<0.05),细胞ROS、超氧化物阴离子荧光染色强度明显增加。结论 MEHP诱导KGN细胞铁死亡，抑制细胞增殖能力，但MEHP诱导铁死亡的具体作用机制还需进一步探讨。

目的 初步探讨lncRNA AC079466.1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织和细胞中的表达https://www.selleck.cn/products/byl719.html，Stress biomarkers及其过表达对A549和H1299细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法 收集20例NSCLC患者癌组织及相应的癌旁组织，qRT-PCR检测lncRNA AC079466.1在组织和细胞中的表达。转染过表达质粒为AC079466.1组，转染空质粒为NC组，无转染为Blank组。MTT、流式细胞术、Transwell检测过表达lncRNA AC079466.1对A549和H1299细胞活力、凋亡、迁移和侵袭的影响；Western blot检测过表达lncRNA AC079466.1对内质网应激相关因子GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHPARP抑制剂OP,以及Bax、caspase-3表达的影响。结果 与癌旁组织相比，癌组织中lncRNA AC079466.1的表达水平明显降低；与HBE细胞相比，lncRNA AC079466.1在A549和H1299细胞的表达量明显降低。与Blank组和NC组相比，AC079466.1组A549和H1299细胞的活力、迁移、侵袭能力均明显下降，凋亡率明显升高，内质网应激相关因子GRP78、p-PERK、eIF2α、ATF4、CHOP,以及Bax、caspase-3表达均明显上调。结论 过表达lncRNA AC079466.1可明显抑制A549和H1299细胞的活力、迁移和侵袭能力，并促进细胞的凋亡，其机制可能与促进内质网应激介导的细胞凋亡有关。

目的建立尾静脉注射阿霉素联合灌胃甲状腺素片所致肾阴虚水肿模型大鼠,观察泽泻、盐泽泻防治肾阴虚水肿模型大鼠的药效差别,探讨其作用机制,并进行泽泻、盐泽泻饮片体内外的成分差异比较,初步阐述药效差异与成分的关系。方法1.泽泻、盐泽泻对肾阴虚水肿模型大鼠的药效评价:雄性SD大鼠适应性饲养后按体质量随机分为正常组、模型组(甲状腺素75 mg·kg~(-1)+阿霉素2 mg·kg~(-1)/次)、阳性药组[六味地黄丸,1.4 g·(kg~(-1)·d~(-1))]、泽泻低剂量组[1 g·(kg~(-1)·d~(-1))]、泽泻高剂量组[4 g·(kg~(-1)·d~(-1))]、盐泽泻低剂量组[1 g·(kg~(-1)·d~(-1))]、盐泽泻高剂量组[4 g·(kg~(-1)·d~(-1))],共计7组,每组6只。造模第1天开始灌胃给药,正常组和模型组灌胃等体积饮用水,其余组以相应药物进行灌胃给药,连续给药28天,灌胃体积为1 m L·(100 g~(-1)·d~(-1))。造模14 d及最后1 d称重给药结束后立即将各组大鼠置于代谢笼中,24 h后取出,记录各笼大鼠的饮水量、尿量,并留取各笼大鼠尿液适量,采用全自动生化分析仪测量尿液中尿蛋白、尿肌酐、尿白蛋白含量;同时检测最后1 d尿液中钠、钾、氯离子的浓度水平。采用全自动生化分析仪测定血清CREA、UREA、ALB、TP、CHOL、TG的含量。采用HE染色法观察肾脏病理变化情况,免疫组化法检测肾脏AQP-1、AQP-2、NHE3、γ-ENa C蛋白的表达量,Real-time PCR测定肾脏中AQP-1、AQP-2 m RNA的转录水平。2.泽泻、盐泽泻防治肾阴虚水肿模型大鼠的机制研究:基于Illumina Hi Seq X测序平台,对正常组、模型组、泽泻低剂量组和盐泽泻低剂量组的大鼠肾脏组织样本进行转录组学的测序分析。通过分析各个组别大鼠肾脏的基因的表达差异情况,构建差异基因集并对差异基因集进行GO和KEGG富集分析,同时对泽泻和盐泽泻的结果进行比较,筛选关键的信号通路,并分析泽泻和盐泽泻低剂量组两者共有的关键基因的互作情况。筛选出核心靶点,从分子层面探究泽泻及其炮制品改善肾阴虚水肿症的潜在机制,同时探讨泽泻盐炙后增效的潜在原因。3.泽泻、盐泽泻化学成分的变化研究:(1)对泽泻盐炙前后的体外差异成分分析,通过UHPLC-Q-TOF-MS对泽泻炮制前后的化学成分进行测定,并结合SIMCA14.1软件分析,比较泽泻、盐泽泻在化学成分上的异同。(2)对泽泻盐炙前后的血清药物化学进行比较分析,SD雄性大鼠适应性饲养后随机分为正常组、泽泻组和盐泽泻组,每组3只,给药组灌胃相应药物水提液,给药剂量为10 g·kg~(-1)(大鼠生物等效剂量10倍),早晚各1次,连续3 d,空白组给予等体积饮用水,末次给药60 min后进行眼眶取血收集样品,离心收集上清,将同一组别的血清样品混合均匀后采用乙腈沉淀蛋白法沉淀蛋白,离心浓缩后用乙腈复溶,取上清进UPLC-Q-TOF-MS检测获得各样品总离子流图,并利用UNIFI软件对数据进行分析处理。结果1.泽泻盐炙前后对肾阴虚水肿模型大鼠的药效评价:结果显示泽泻盐炙前后均可改善肾脏滤过率、T3、T4、c AMP、c GMP及脂代谢水平,相关评价指标有所回调,其作用机制可能与纠正HPG轴紊乱,抑制AQP-1、AQP-2相关水钠通道蛋白表达有关,并且在HPG轴、肾脏滤过率、阴虚程度及水钠通道等指标上发现盐泽泻低剂量组效果优于泽泻低剂量组。2.泽泻盐炙前后防治肾阴虚水肿模型大鼠的机制研究:转录组测序结果发现与模型组相比,泽泻continuing medical education、盐泽泻低剂量组分别有522、682个差异基因,并且分别有352、480个差异基因在给药后表达量有显著回调(P<0.05)。富集分析结果表明,泽泻、盐泽泻低剂量组均能调控相关炎症反应和免疫过程,且盐泽泻低剂量组调控的基因靶点数目远远多于泽泻低剂量组,两者在PI3K-获悉更多Akt signaling pathway均有显著富集,可能是泽泻、盐泽泻改善肾阴虚水肿症的重要通路,通过PPI蛋白网络互作结果筛选出PTPRC、CD4、LCP2等10个核selleckchem心靶点。3.泽泻盐炙前后化学成分的变化研究:(1)通过UPLC-Q-TOF-MS对泽泻炮制前后的化学成分进行了测定,比较发现泽泻盐炙前后萜类成分的种类改变并不明显,实验中尚未发现炮制后增加或减少的化学成分。以各化合物的峰面积作为变量进行多元统计分析,结果显示两者在化合物含量上发生了明显改变,呈现聚类分布,表明泽泻盐炙前后含量上有显著变化。(2)通过血清药物化学分析比较泽泻盐炙前后入血成分的差异,发现在给予泽泻、盐泽泻水提液大鼠血清中分别推测得到20、14个成分,其中两者共有成分13个,包括5个原型成分和8个代谢成分,猜测泽泻、盐泽泻发挥肾阴虚水肿症治疗效果的可能物质基础是16-氧代泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、C和泽泻醇A、B、C 7个成分。结论1.泽泻盐炙前后对肾阴虚水肿模型大鼠均有治疗作用,且盐泽泻低剂量组疗效优于泽泻低剂量组。2.泽泻与盐泽泻可能通过调控PI3K-Akt signaling pathway改善肾阴虚水肿症,且盐泽泻低剂量组调控的靶点数目多于泽泻低剂量组,功能更加广泛,可能是盐泽泻低剂量组药效优于泽泻低剂量组的潜在原因。3.泽泻盐炙过程中对化学成分的种类影响较小,主要改变了化合物的含量;但两者体内入血成分的种类差别不大,泽泻的代谢产物较盐泽泻丰富,盐炙可能增加了某些入血成分的含量。

目的:探讨生物钟(circadian clock)相关蛋白隐花色素1(cryptochrome 1,CRY1)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscular cells,VSMCs)从收缩型细胞向合成型细胞转化中的作用。方法:首先应用AngⅡ体外构建VSMCs表型转化模型,用不同浓度(10~(-8) mol/L、10~(-7) mol/L、10~(-6) mol/L、10~(-5) mol/L)的AngⅡ刺激C57小鼠主动脉VSMCs不同时间(12 h、24 h、48 h、72 h),RT-q PCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及CRY1在m RNA和蛋白水平的表达,确定构建表型转化模型的最佳浓度及最佳时间;然后在分别构建CRY1的干扰RNA(si CRY1)、Yes相关蛋白1(yes-associated protein 1speech-language pathologist,YAP1)的干扰RNA(si YAP1))进行基因沉默,构建CRY1的过表达质粒(pc DNA-CRY1)进行过表达,RT-q PCR、Western blot技术双重验证CRY1与YAP1在各组中m RNA和蛋白表达情况;最后将VSMCs分为4组,对照组、AngⅡ组、AngⅡ+si CRY1组、AngⅡ+pc DNA-CRY1组,将si CRY1、si YAP1、pc DNA-CRY1转染VSMCs表型转化模型,RT-q PCR和Western blot检测α-SMA、OPN、CRY1、YAP1 m RNA和蛋白的表达及CCK-8法检测细胞增殖情况。结果:不同浓度AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,VSMCs收缩型标志物在m RNA和蛋白水平表达减少,VSMCs合成型标志物在m RNA和蛋白水平表达增加,同时发现不同浓度AngⅡ刺激VSMCs后CRY1在m RNA和蛋白水平表达减少;转染si CRY1、si YAP1、pc DNA-CRY1处理VSMCs后,CRY1在siZD1839 CRY1组中m RNA及和蛋白水平表达下降,在pc DNA-CRY1组中m RNA和蛋白水平表达升高,YAP1在si YAP1组中m RNA及蛋白水平表达下降,在si CRY1组中m RNA及蛋白水平表达升高;转染si CRY1进一步减少AngⅡ诱导VSMC收缩型标志物的表达(P<0.05),增加合成型标志物、YAP1的表达,以及促进VSMCs的增殖(P<0.05);转染pc DNA-CRY1质粒增加AngⅡ诱导VSMCs收缩型标志物的表达(P<0.05),减弱合成PF-03084014使用方法型标志物、YAP1的表达(P<0.05)及抑制VSMCs的增殖(P<0.05)。结论:生物钟蛋白CRY1抑制血管紧张素Ⅱ诱导小鼠主动脉VSMCs表型转化和VSMCs增殖,该过程可能与Hippo-YAP信号通路有关。