Achr receptor

慢性心力衰竭(Chronic Heart Failure,CHF)是一种在中老年患者中发病率较高的心血管疾病,而心肾阳虚型慢性心衰(chronic heart failure with heart-kidney yang deficiency,CHF-HKYd)是由于肾阳不足所致的一种CHF常见证型,心室重构是慢性心衰的病理机制,心室重构的病理基础是心肌纤维化(MWomen in medicineyocardial Fibrosis,MF)。二参真武汤(Er Shen Zhen Wu Decoction,ESZWD)是安中医一附院新安医学传人程晓昱主任根据多年临床经验,基于古代经典selleck LEE011名方真武汤一方,另添加了红参和丹参两味药材组成,在临床上对CHF-HKYd疗效显著,经过前期研究基础,ESZWD的药效物质基础已经明晰,但是作用机制还不清楚,本文基于前期研究基础,探究ESZWD对CHF-HKYd药理作用机制。目的:(1)探究二参真武汤对CHF-HKYd心肌纤维化的药物疗效;(2)基于TGF-β1/Smads和PI3K/AKT/mTOR通路探究二参真武汤对心肌纤维化细胞模型的作用;(3)基于TGF-β1/Smads和PI3K/AKT/mTOR通路探究二参真武汤对心肾阳虚型CHF大鼠心肌纤维化的治疗作用。方法:在动物方面,将大鼠平均分为六组,正常组、模型组、二参真武汤低、中、高剂量(3.96、7.92、15.84 g/kg)组和阳性药贝那普利组(0.5 mg/kg),通过双侧甲状腺切除联合阿霉素(0.02%阿霉素1 m L/100g腹腔注射,每周2次)注射,建立CHF-HKYd大鼠模型,检测大鼠心功能,眼眦取血,检测氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro brain natriuretic peptide,NT-pro BNP)、三点甲状腺氨酸(Triiodothyronine,T3)Staurosporine溶解度、甲状腺素(Thyroxine,T4)水平验证模型成功后,灌胃ESZWD四周后取心脏组织做HE染色、Masson染色、免疫组化标记α-SMA检测纤维化程度,Western blot法检测心脏组织collagen I、collagen III、α-SMA的蛋白水平和m RNA含量;在细胞方面,使用乳鼠提取原代心肌成纤维细胞,台盼蓝染色检测细胞活性,免疫荧光检测波形蛋白验证细胞纯度,符合要求后使用2到3代细胞进行后续实验,使用含有不同浓度的Ang II(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)培养基刺激细胞,CCK-8确定血管紧张素II(Ang II)刺激原代心肌成纤维细胞的时间与浓度,建立纤维化细胞模型,取30只大鼠平均分为三组分别灌胃生理盐水,ESZWD(15.84 g/kg)和贝那普利(0.5 mg/kg),每天一次连续7天,末次灌胃1小时后取血制备血清,细胞分为四组,正常组、模型组(1μmol/L Ang II刺激24h)、ESZWD组和贝那普利组,检测细胞内collagen I、collagen III、α-SMA的蛋白水平和m RNA含量;最后取大鼠心脏组织和原代心肌成纤维细胞检测TGF-β1/Smads和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白水平和m RNA含量,免疫荧光检测大鼠心肌组织和原代心肌成纤维细胞中的TGF-β1和PI3K的表达。结果:(1)ESZWD可显著抑制心肾阳虚型慢性心衰大鼠心功能下降。(2)ESZWD能有效减轻CHF-HKYd大鼠的心脏损伤。(3)ESZWD能有效减轻CHF-HKYd大鼠心肌纤维化。(4)ESZWD含药血清改善Ang II诱导的细胞纤维化。(5)ESZWD可以抑制TGF-β1/Smads和PI3K/AKT/mTOR信号通路减轻MF而改善CHF-HKYd。结论:ESZWD可以调控TGF-β1/Smads和PI3K/AKT/mTOR信号通路减少胶原的产生,提高细胞自噬,减轻心肌纤维化,抑制心室重构,最终改善了心肾阳虚型慢性心衰。

selleck合成目的：探讨芒果苷通过MMP9调控M2型巨噬细胞极化治疗胰腺癌的作用及机制。方法：在体内水平绘制肿瘤生长曲线，免疫组化染色评价芒果苷对胰腺癌的治疗效果；免疫荧光、ELISA检测芒果苷对胰腺癌中M2型巨噬细胞表达的影响；免疫荧光、ELISA、Western blot及qRT-PCR检测芒果苷对MMP9以及EPZ-6438作用下游M2型巨噬细胞极化相关信号通路表达的影响。在体外水平利用MTT检测M2型极化巨噬细胞对胰腺癌的作用及芒果苷对胰腺癌的治疗效果；ELISA检测芒果苷对M2型极化巨噬细胞的影响；免疫荧光及Western blot检测芒果苷对MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路表达的影响。结果：小鼠胰腺癌模型中，芒果苷可抑制胰腺癌生长，且可抑制胰腺癌中M2极化巨噬细胞表达；同时芒果苷可抑制胰腺癌中MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路表达。在M2型极化巨噬细胞-胰腺癌细胞共培养模型中，芒果苷抑制胰腺癌细胞增殖，抑制巨噬细胞M2型极化，同时抑制MMP9及下Phycosphere microbiota游M2巨噬细胞极化相关信号通路表达。结论：芒果苷可通过抑制MMP9及下游M2巨噬细胞极化相关信号通路抑制巨噬细胞M2极化治疗胰腺癌。

目的 本研究旨在探讨橙皮素（hesperetin, Hes）能否通过调控沉默信息调节因子1(silent information regulator 1, SIRT1)/核转录因子E2相关因子2(nuclear transMK-4827生产商cription factor E2-related factor 2, NRF2)信号减轻氧化应激改善阿霉素（doxoPredictive medicinerubicin, DOX）诱导的H9c2心肌细胞毒性。方法 采用DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性模型，随机分为4组：对照组（Control）、DOX处理组（DOX）、Hes加DOX处理组（DOX+Hes）以及Hes加SIRT1抑制剂EX527联合DOX处理组（DOX+Hes+EX527）。光镜下观察细胞形态，CCK-8检测各组细胞活力，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，DCFH-DA染色观察各组ROS水平，ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase, LDH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、过氧化氢酶（catalase, CAT）和SIRT1活性以及丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量，Western blot检测裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)、细胞色素c(cytochrome c)、SIRT1、Ac-FOXO1、NRF2和血红素加氧酶1(heme oxygenase1, HO-1)Erastin研究购买的表达。结果 和Control组相比，DOX组细胞形态肿胀，密度减小，细胞活力降低，培养基中LDH活性增加（P<0.01）；细胞凋亡增多，cleaved caspase-3和cytochrome c表达增加（P<0.01）;CAT和SOD活性降低，MDA含量和ROS水平增加（P<0.01）;SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性降低，Ac-FOXO1表达增加（P<0.01）；与DOX组相比，DOX+Hes组细胞形态改善，密度和细胞活力增加，培养基中LDH活性降低（P<0.01）；细胞凋亡减少，cleaved caspase-3和cytochrome c表达降低（P<0.01）;CAT和SOD活性升高，MDA含量和ROS水平降低（P<0.01）;SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性增加，Ac-FOXO1表达降低（P<0.01）；而与DOX+Hes组相比，EX527阻断Hes对DOX诱导的H9c2细胞损伤、氧化应激和SIRT1/NRF2信号的作用。结论 Hes可以通过调控SIRT1/NRF2信号抑制氧化应激和细胞凋亡减轻DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性。

目的 明确多层螺旋CT鉴别腹盆腔霍奇金病(HD)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)的价值。方法 腹盆腔恶性淋巴瘤66例，其中HD 16例，NHL 50例。通过多层螺旋CT增强检查，观察腹盆腔淋巴结大小、形态、密度及解剖分布。结果 恶性淋巴瘤CT增强，HD中13例为均匀密度，3例为部分坏死；NHL中39例为均匀密度，11例为部分坏死，两者强化类型差异Regorafenib体外无统计学意义(P>0.05)。HD和NHL均优势累及腹主动脉周围上下部、肠系膜根部、肝十二指肠韧带及肝胃韧带；盆腔淋巴结肿大多发生在髂总动脉，HER2 immunohistochemistry其次为髂内动脉；两EPZ-6438者解剖分布差异无统计学意义(P>0.05)。HD和NHL多同时累及2个部位以上的淋巴结。恶性淋巴瘤亦累及肝、脾、肾、胃肠等淋巴结外器官，其中以脾受累最为常见。HD和NHL之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 多层螺旋CT增强扫描可显示HD和NHL累及腹盆腔淋巴结的病理改变及优势解剖分布，有利于两者诊断、分期及治疗。

研究背景及目的:在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中,随着利妥昔单抗的应用,现有的初期IPI评分及其风险分层及中期多维尔评分评估疗效已不能满足临床预后预测需要。随着18F-FDG PET/CT技术升级及其在临床的广泛应用,多种参数已被证明在不同的肿瘤及淋巴瘤中有预后价值,本文拟结合临床特征全面评估初期及中期PET/CT参数,并将其与IPI评分及多维尔评分相结合,建立更精准的预后评价体系,从而将高危复发人群及对化疗不敏感人群筛选出来,进一步提供精准治疗,改善患者预后。方法:1.研究对象:选取2012年1月1日至2021年9月30日在南方医科大学南方医院首诊初治的DLBCL患者,建立随访数据,收集其临床数据;2.PET/CT图像处理及参数测量:由两名高年资核医学医师共同阅片确定病灶,记录病灶特征,测量参数包括:基线及中期SUVmax、MTV、TLG及相应参数变化量;3.统计分析:使用R软件及相关程序包进行统计分析,分析临床特征及PET/CT各参数与DLBCL患者预后的关系;4.建立预后模型:并使用列线图进一步建立预测模型。结果:1、病历资料:根据纳排标准,共计纳入262例DLBCL患者,其中228例患者具有完善的中期PET/CT资料,中位随访时间34个月;2、基线PET/CT参数及临床参数对预后的影响:本研究中发现以IPI≥4作为临界值对IPI进行分层优于传统的四分层方式。利用Kaplan-Meier法进行生存分析发现,MTV、TLG、结外数目、最大病灶直径、COO病理分型均与预后相关,各组3年PFS和OS均体现出统计学差异,而SUVmax并未体现出预后价值。COX单因素及多因素分析得出,IPI二分层、MTV、CO获悉更多O病理分型、大包块(4cm)均是预后独立危险因素,基于此建立可视化列线图及其网页计算器,其AUC值为0.759,提示预测价值较高;3、中期18F-FDG PET/CT影像特征及对预后的影响:以多维尔评分≤4分为临界值进行分组,可更好区分预Baf-A1后较差的患者,中期SUVmax、MTV、TLG及LLR均有预后相关,其中,中期MTV较其他参数更具预后价值;4、基线及中期18F-FDG PET/CT参数变化量对预后的影响:ΔSUVmax、ΔMTV、ΔTLG均与不良预后相关,ΔSUVmax具有更好的预后价值。结论:1.对基线PET/CT参persistent infection数及临床参数进行分析,结果显示基线MTV、大包块(4cm)、COO病理分型是独立于IPI评分预后预测因子,而SUVmax与预后关系无统计学意义。以MTV、大包块(4cm)、COO病理分型结合IPI评分建立可视化列线图相对于单独使用IPI评分具有更好的预后预测价值。2.中期PET/CT参数SUVmax、MTV、TLG及其变化量均与DLBCL预后相关,通过与多维尔评分进行比较,发现中期MTV和ΔSUVmax是独立预后因子且预后价值优于多维尔评分。

目的：检测miR-451、ABCB1、ABCC2在白血病药物敏感细胞株K562及其耐药株K562/A02中的差异表达，探讨miR-451与ABCB1、ABCC2表达的调控关系及miR-451参与白血病耐药的相关机制。方法：CCK-8法检测K562/A02及K562细胞的耐药性，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证miR-451在K562及K562/A02细胞中的差异表达，将miR-451模拟物(mimic)及其阴性对照(miR-NC)、miR-451抑制剂(inhibitor)及其阴性对照(miR-inNC)分别转染K562及K562/A02细胞，应用q RT-PCR、Western blot检测ABCB1、ABCC2在K562、K562/A02细胞及转染后各组细胞中的mRNA、蛋白表达水平。结果：K562/A02细胞对阿霉素的耐药是其亲本细胞系K562的177倍。与K562细胞相比，K562Genetic map/A02细胞中miR-451明显高表达(P<0.001),ABCB1、ABCC2在K562/A02中的mRNA及蛋白表Pevonedistat达水平均显著高于K562细胞(P<0.001)。KBMS-354825研究购买562/A02细胞转染miR-451 inhibitor后，miR-451表达显著下调(P<0.001)，对化疗药物的敏感性显著增强(P<0.05),ABCB1、ABCC2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。K562细胞转染miR-451 mimic后，miR-451表达显著上调(P<0.001),ABCB1、ABCC2 mRNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01)。结论：miR-451、ABCB1及ABCC2在白血病敏感细胞株K562及其耐药株K562/A02中的表达存在显著差异，miR-451可能通过调控ABCB1、ABCC2的表达对白血病细胞的耐药性产生影响。

目的:胰腺癌(Pancreatic adenocarcinoma,PAAD)是恶性程度极高的消化道系统肿瘤之一,是癌症死亡的第四大原因。虽然目前已经确定了胰腺癌部分发病的危险因素,如肥胖、糖尿病等,但具体病因仍不清楚。因胰腺癌发病隐蔽,恶性程度高,且预后差,因此进一步了解胰腺癌发生发展机制,寻找潜在的诊断标志物或治疗靶标仍然尤为重要。MYEOV是一种肿瘤相关基因,在多种肿瘤中异常表达,并且与肿瘤的发生发展密切相关。Rho GTP酶活化蛋白1(ARHGAP1)在多种肿瘤中异常表达,在胰腺癌中与MYEOV的表达具有相关性,并且与肿瘤的发生发展密切相关。MYEOV与ARHGAP1在胰腺癌的生物学功能及潜在机制尚未完全清楚,因此,有待于进一步的研究。方法:1、利用UCSC Xena数据库分析MYEOV在胰腺癌及正常组织中的表达水平,利用ICGC数据库分析MYEOV与胰腺癌患者预后的关系。2、利用荧光定量PCR检测MYEOV在胰腺癌细胞中的表达情况。3、设计过表达质粒和敲低质粒,分别转染至状态良好的胰腺癌细胞中,分别进行MYEOV表达上调及表达下调实验,空载质粒作对照组。4、探究MYEOV生物学功能:上调或下调MYEOV的表达,进行细胞增殖、迁移和侵袭等细胞生物学功能研究。5、探究MYEOV的作用机制:Western blot方法检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达水平。Western blot检测MYEOV在上皮间充质转化中的作用;Western blot方法检测了TGFβ/Smad信号通路中的p-Smad2/3和TGFβ-1的表达水平。6、探究MYEOV与ARHGAP1的作用机制:查阅相关RNAseq及数据库分析MYEOV与ARHGAP1的相关性,免疫共沉淀检测两者相关性。7、应用Western blot方法检测ARHGAP1在胰腺癌细胞中的表达。8、设计ARHGAP1小干扰RNA,分别转染至胰腺癌细胞株中,进行ARHGAP表达下调实验,转染NControl-si RNA设为无意义序列对照组。9、探究ARHGAP1生物学功能:下调ARHGAP1的表达,进行细胞增殖、迁移和侵袭等功能研究。10、探究ARHGAP1的作用机制:Western blot方法检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达水平。Western blot检测ARHGAP1在上皮-间充质转化(EMT)中的作用。结果:1、通过UCSC Xena数据库分析了MYEOV的表达,结果显示在胰腺癌样本中MYEOV表达量明显增高;通过ICGC数据库Kaplan-Meier分析发现MYEOV表达越高,胰腺癌患者中位生存时间越短。2、在Pa Tu8988,SW1990,BXPC3,Mia Pa Ca-2和PANC1这5种细胞株中,MYEOV在Pa Tu8988细胞中表达较高,在Mia Pa Ca-2细胞中表达最低。因此,在胰腺癌细胞Pa Tu898敲低MYEOV、在Mia Pa Ca-2细胞中研究过表达MYEOV对胰腺癌的影响。3、敲低MYEOV后细胞功能实验显示可以抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。过表达MYEOV后功能实验则表现出了相反的趋势。4、Western blot结果显示敲低MYEOV后基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达水平显著降低。Weselleck MDV3100stern blot结果显示敲低MYEOV后上皮标志物E-cadherin的蛋白表达水平上调,而间充质标志物N-cadherin、Vimentin的蛋白表达下调。相反,过表达MYEOV后则表现出相反的趋势。5、Western blot结果显示敲低MYEOV后p-Smad2/3和TGFβ-1的表达水平显著下调,而过表达MYEOV后p-Smad2/3和TGFβ-1的表达水平显著上调。6、相关文献报道及数据库分析表明MYEOV与ARHGAP1的表达具有相关,免疫共沉淀结果显示MYEOV能与ARHGAP1相互作用,且MYEOV影响ARHGAP1蛋白水平的Tofacitinib表达。7、在Pa Tu8988,SW1990,BPrimary biological aerosol particlesXPC3,Mia Pa Ca-2和PANC1?1这5种胰腺癌细胞株中ARHGAP1在SW1990、BXPC3细胞中表达相对较高。因此,在胰腺癌SW1990、BXPC3中敲低ARHGAP1对胰腺癌的影响的影响。8、敲低ARHGAP1后细胞功能实验显示可以抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。9、Western blot结果显示敲低ARHGAP1后基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达水平显著降低,Western blot结果显示敲低ARHGAP1后上皮标志物E-cadherin的蛋白表达水平增高,而间充质标志物N-cadherin、Vimentin的蛋白表达表现出了下调的趋势。结论:综上,MYEOV在胰腺癌组织以及细胞中表达上调,且表达水平与患者的预后生存状况相关。MYEOV促进胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并且MYEOV可能通过了影响TGFβ/Smad信号通路激活胰腺癌细胞上皮间充质转化(EMT)。MYEOV与ARHGAP1的表达在胰腺癌中具有相关,且在胰腺癌细胞中MYEOV可影响ARHGAP1蛋白表达水平。ARHGAP1在胰腺癌组织中表达上调。ARHGAP1促进胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,这些实验结果提示,MYEOV可能与ARHGAP1相互作用影响胰腺癌的发生发展,并可能为胰腺癌的潜在生物标志物和胰腺癌治疗的新靶点。图[15]表[30]参[47]

目的 研究黄芪甲苷通过调控沉默信息调节因子2同源蛋白1(Sirt1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)信号通路发挥对阿霉素肾病的保护作用。方法 60只6周的雄性SD大鼠中取8只作正常对照组，其余大鼠尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型，采用随机数字法将筛选出的40只模型大鼠分为模型组、西药组、黄芪甲苷低、中、高剂量组selleck合成，各8只。西药组以每日0.9 mg/kg标准洛丁新混悬液灌胃，黄芪甲苷低、中、高剂量组每日分别以20、40、80 mg/kg剂量进行灌胃，每日1次，持续6周；正常组、模型组给予等容积的0.9%氯化钠溶液。干预后采用生化法检测各组24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酐、尿素氮水平，酶联免疫吸附法检测肾组织白细胞介素1β(IL-1β)含量；采用苏木精-伊红染色法观察大鼠肾脏病理形态。蛋白印迹法检测肾组织中Sirt1、PGC-1α蛋白表达。结果 相对于正常组，模型组24 h尿蛋白、肾组织IL-1β水平显著上升，差异均有统计意义(P<0.05);相对于模型组，西药组与黄芪甲苷高剂量组24 h尿蛋白显著下降，黄芪甲苷高剂量组IL-1β水平明显降低，差异均有统计意义(P<0.05);相对于西药组，黄芪甲苷低、中剂量组24 h尿蛋白、IL-1β上升，差异均有统计意义(P<0.05);相对于低剂量组，黄芪甲苷高剂量组24 h尿蛋白、IL-1β显著下降，差异均有统计意义(P<0.05)。相对于正常组，模型组白蛋白水平下降，ALT、肌酐、尿素氮水平上升，差异均有统计意义(P<0.05);与模型组比较，西药组与黄芪甲苷中、高剂量组白蛋白、ALT水平有所改善，且肌酐、尿素氮水平下降，差异均有统计意义(P<0.05)。西药组与黄芪甲苷高剂量组的各指标相当，优于黄芪甲苷低、中剂量组，差异均有统计意义(P<0.05)。正常组肾小球结构正常，无病理变化；模型组肾脏系膜有增生，系膜基质增多，肾小管上GMO biosafety皮有肿胀，可见大量炎症细胞浸润；西药组与黄芪甲苷中、高剂量组肾小球系膜细胞增生有不同程度减轻，肾小管上皮细胞水肿得到改善，炎症细胞浸润缓解，效果优于黄芪甲苷低剂量组。与正常组比较Lorlatinib生产商，模型组Sirt1、PGC-1α蛋白表达升高，差异均有统计意义(P<0.05);与模型组比较，西药组Sirt1、PGC-1α蛋白抑制表达，差异均有统计意义(P<0.05);黄芪甲苷高剂量组Sirt1、PGC-1α蛋白表达高于低、中剂量组，差异均有统计意义(P<0.05)。结论 黄芪甲苷能改善阿霉素诱导的大鼠肾损伤，通过上调肾组织Sirt1、PGC-1α蛋白表达以抑制炎症反应，改善肾功能而延缓病情发展，其中80 mg/kg剂量的效果更佳。

目的多壁碳纳米管(MWCNT)是一种广泛应用于各个领域的纳米材料。研究发现MWCNT具有明显的呼吸毒性,然而其毒性作用机制还有待进一步深入研究。本研究通过MWCNT染毒肺上皮selleck细胞(BEAS-2B),阐明自噬在MWCNT诱导BEAS-2B细胞铁死亡中的作用,并进一步揭示PGC-1α/TFAM通路介导的线粒体生物合成在自噬BEAS-2B细胞铁死亡中的作用。方法本研究采用不同浓度(0μg/cm2、5μg/cm2、10μg/cm2、20μg/enzyme-linked immunosorbent assaycm2)的MWCNT的暴露BEAS-2B细胞。CCK-8检测活性;采用Westernblot对自噬相关蛋白LC3,P62,线粒体生物合成相关蛋白AMPK,TFAM,PGC-1,铁死亡相关蛋白GPX4、XCT;MDA、GSH、SOD、ATP的试剂盒检测MWCN染毒细胞内含量变化,反应铁死亡的水平;二氢乙锭(DHE)荧光探针检测BEAS-2B细胞ROS;JC-1探针对细胞的MMP进行检测。采用慢病毒载体ATG5和自噬激动剂RAPA转染BEAS-2B细胞探究自噬在MWCNT所致BEAS-2B细胞铁死亡中的作用;siRNA和慢病毒载体转染BEAS-2B细胞调控PGC-1的表达,探究PGC-1α/TFAM通路自噬在MWCNT所致BEAS-2B细胞铁死亡中的保护作用;结果 (1) MWCNT诱导BEAS-2B细胞发生铁死亡并导致线粒体功能损伤CCK8实验发现BEAS-2B细胞活性染毒时间和染毒浓度依赖的降低(P<0.05或P<0.01),并在24和10μg/cm2浓度组时细胞的生存率约为50%;MWCNT暴露导致细胞内的SOD、GSH消耗和MDA、ROS的增多;MWCNT组中AMPK,TFAM,PGC-1,GPX4,XCT蛋白表达水平降低明显。(2)自噬诱导BEAS-2B细胞发生铁死亡并严重影响线粒体功能慢病毒载体转染BEAS-2B细胞72 h下调ATG5的表达后,有效的抑制了细胞的死亡,AMPK,TFAM,PGC-1,GPX4,XCT蛋白表达水平明显升高,自噬激动剂RAPA干预细胞后,与MWCNT组相比,AMPK,TFAM,PGC-1,GPX4,XCT蛋白表达水平明显降低。(3)线粒体生物合成调控MWCNT所致BEAS-2B细胞发生铁死亡siRNA转染BEAS-2B细胞下调PGC-1的表达后,细胞内的SOD、GSH消耗和MDA、ROS的增多;严重影响了线粒体功能并促进细胞发生铁死亡。siRNA转染组中,AMPK,TFAM,PGC-1,GPS63845浓度X4,XCT蛋白表达水平降低明显。慢病毒载体转染BEAS-2B细胞上调PGC-1的表达后,与MWCNT组相比,细胞内的SOD、GSH得以恢复,同时降低了MDA、ROS在细胞体内的堆积,进而恢复线粒体功能。慢病毒载体转染组中,与MWCNT组相比,AMPK,TFAM,PGC-1,GPX4,XCT蛋白表达水平明显升高。结论自噬通过PGC-1依赖的线粒体生物合成调控MWCNT所致BEAS-2B细胞发生铁死亡进而导致肺损伤。

目的:研究党参低聚糖对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃此网站黏膜损伤的改善作用及机制。方法:分析党参低聚糖对缺氧条件下胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(AGS)增殖活性，及对凋亡相关蛋白(BAX、BCL-2、Caspase-3)和磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/缺氧诱导因子1α信号通路(PI3K/AKT/HIF-1α)的影响。70只大鼠随机分为正常对照组、正常动物给予党参低聚糖0.6 g/kg组、模型对照组、维酶素0.27 g/kg组、党参低聚糖0.15、0.6 g/kg组。采用灌胃N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)和40%乙醇获悉更多并结合饥饱饮食的方法构建PLGC模型。分析党参低聚糖对PLGC大鼠胃组织病理变化、血清生化指标、凋亡相关蛋白(BAX、BCL-2、Caspase-3)和PI3K/AKT/HIF-1α通路的影响。同时通过LC/MS/MS代谢组学技术研究影响党参低聚糖改善PLGC的潜在生物标志物和代谢通路。结果:细胞实验显示，与空白对照组比较，缺氧对照组GES-1细胞的相对存活率显著降低(P<0.01),BCL-2/BAX比值、PI3K及p-AKT蛋白表达显著下调，Caspase-3和HIF-1α蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);AGS细胞的相对存活率显著增加(P<0.01),BCL-2/BAX比值、PI3K、p-AKT及HIF-1α蛋白表达均显著上调，Caspase-3蛋白表达显著下调(P<0.01);与缺氧对照组比较，党参低聚糖1、1.25 mg/mL组在48 h时使GES-1细胞的相对存活率显著增加(P<0.01),BCL-2/BAX比值、PI3K及p-AKT蛋白表达均显著上调，Caspase-3和HIF-1α蛋白表达明显下调(P<0.05);使AGS细胞的相对存活率显著降低(P<0.01),BCL-2/BAX比值、PI3K、p-AKT及HIF-1α蛋白表达均明显下调，Caspase-3蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。动物实验显示，与正常对照组比较，模型对照组大鼠胃黏膜发生萎缩，肠上皮化生和不典型增生，血清胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅠ/PGⅡ)比值和胃泌素-17(G-17)含量显著降低(P<0.01),白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量显著增加(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著降低而MDA含量显著增加(P<0.01)CSF AD biomarkers,胃黏膜BCL-2/BAX的比值、PI3K、p-AKT及HIF-1α蛋白表达显著上调，Caspase-3蛋白表达显著下调(P<0.01),血清甘油磷酸胆碱、2-酮戊二酸、乳酸、富马酸及牛磺鹅去氧胆酸水平明显增加，组氨酸、甜菜碱、瓜氨酸、精氨酸、脯氨酸、泛酸、牛磺胆酸、柠檬酸及1-棕榈酰甘油磷酸胆碱水平明显降低(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较，党参低聚糖0.15、0.6 g/kg组大鼠胃黏膜萎缩，肠上皮化生和不典型增生程度明显减轻，党参低聚糖0.6 g/kg组大鼠血清PGⅠ/PGⅡ比值和G-17含量明显增加(P<0.05),IL-1β、IL-6及TNF-α含量显著降低(P<0.01),SOD和GSH-Px活力显著增加而MDA含量明显降低(P<0.05),胃黏膜BCL-2/BAX比值、PI3K、p-AKT及HIF-1α蛋白表达显著下调，Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01),血清14种代谢物水平明显回调(P<0.05或P<0.01),主要涉及三羧酸循环、精氨酸和脯氨酸代谢、甘油磷脂代谢、糖酵解及牛磺酸和亚牛磺酸代谢。结论:党参低聚糖可改善正常胃粘膜细胞缺氧损伤和抑制胃癌细胞增殖，并通过抑制炎症、抗氧化、促进凋亡以及调节机体代谢紊乱改善PLGC大鼠胃黏膜损伤，其作用机制与抑制PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的过度激活有关。