基于食品组学分析探究蛋黄粉加工过程中营养物质的变化规律

蛋黄中富含脂质和蛋白质。在热处理中,蛋黄蛋白质因受到高温而发生变性、降解或共价交联聚集,脂质在加热过程中易发生氧化,这些变化显著影响蛋黄的加工特性和营养特性。针对蛋黄中的蛋白质,重点关注其翻译后的糖基化修饰结构在热加工过程中的潜在交联聚集,结合蛋黄功能特性的变化,综合阐述热加工影响蛋黄特性的分子结构基础。针对蛋黄中的脂质,拟通过脂肪酸分析、脂质组定量对比分析等,综合梳理热加工对蛋黄脂质脂肪酸组成、脂质分子结构的影响。在此基础上,拟进一步以蛋黄中的代谢物组成为对象,从小分子代谢物分析等方面,探究其营养物质变化机理。以新鲜蛋黄(F-EY)为参照,对喷雾干燥蛋黄粉(SD-EY)的蛋白质糖基化修饰结构在热加工过程中的潜在交联聚集、蛋黄功能特性的变化和热加工影响蛋黄特性的分子结构机理进行了综合探究。分析表明,与F-EY相比,P-EY的特性变化不显著,而SD-EY的热凝胶硬度、持水性、乳化活性分别显著下降35.73±3.3%、1.86%、48.72%。SD-EY的表面疏水性显著下降、游离巯基含量和Zeta电位显著增强(p<0.05)。电泳结果显示SD-EY中的蛋白质发生了明显的交联。定量N-糖基化蛋白质组学分析表明,对比F-EY,SD-EY中有2个N-糖基化位点上调、21个N-糖基化位点下调。主要N-糖蛋白主要包括APOB(载脂蛋白B)、卵黄蛋白原、核黄素结合蛋白等,他们在高温下发生交联聚集,导致9个N-糖基化位点下调(p<0.05),影响了蛋黄体系的蛋白质和脂质的分布情况,从而导致蛋黄的加工特性发生变化。其中,APOB是喷雾干燥过程中蛋黄特性发生变化的潜在关键蛋selleckchem白。蛋黄富含脂质,在加工和储存过程中很容易发生改变。在本研究中,采用液相色谱-串联质谱策略,对喷雾干燥蛋黄粉(SEY)和加速贮藏后蛋黄(S-SEY)进行定量脂质组学分析。喷Nirogacestat浓度雾干燥处理会引起蛋黄中脂质氧化(特别是游离脂肪酸的氧化),磷脂的潜在水解和一些多不饱和脂肪酸(DHA,EPA、亚麻酸和花生四烯酸)的形式的改变。喷雾干燥过程引posttransplant infection起的脂质改变进一步加剧了加速储存过程。具体来说,在蛋黄粉加速氧化储存后,脂质氧化程度增强了,同时,一些特定的磷脂的丰度显著降低了,如:磷脂酸和磷脂酰乙醇胺,且形成甘油三酯的多不饱和脂肪酸的丰度增加了。这些研究结果为蛋黄在喷雾干燥和储存过程中性能变化的机制提供了新的见解,并为蛋黄粉在食品加工中的应用提供了有价值的参考数据。利用广靶代谢组学方法对冻干蛋黄粉(FEY)、喷雾干燥蛋黄粉(SEY)和贮藏后的喷雾干燥蛋黄粉(S-SEY)的代谢物进行分析,结果共鉴定到1032个代谢物。接下来,根据所鉴定出的代谢物建立OPLS-DA模型,以筛选出各组之间的差异代谢物。研究表明,主要变化的代谢物为氨基酸及其代谢物、脂类、酰基脂类和维生素。在贮藏中,代谢物进一步发生分解,有机酸及其衍生物含量增高。结果表明,强热处理加工会导致氨基酸类和甘油磷脂类丰度的增加和糖类丰度的减少,是在高温下的蛋白质变性、脂肪氧化和美拉德反应等共同作用下的结果。另外,蛋黄粉的加工中产生的有益氨基酸和维生素将提高蛋黄的营养价值,也有助于蛋黄粉的贮藏。本研究进一步说明,代谢组学可以探寻赋予食物独特的分子细节,识别食品中的生物活性成分,并更好地了解其潜在的有益或有害后果。课题预期探明了蛋黄主要营养物质蛋白质、脂质及代谢物在热加工后的差异变化,并明确其变化机理。研究结果将为理解蛋黄热加工机理、蛋黄保藏分子机理提供关键信息。

核磁共振波谱法同时定量测定保健品中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸及其前体化合物(英文)

目的 建立可同时测定保健品中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nCP-456773体外icotinamide adenine dinucleotide,NAD+)及其前体化合物含量的核磁共振波谱法。方法 采用核磁共振波谱技术,优化检测条件后,开发了标准曲线法和定量核磁共振法(quantitative nuclear magnetic resonance,qNMR)两种定量检测方法,用于测定保健品中两种形式的NAD及其4种前体化合物。结果 确定了各目标化合物的特征峰。对于标准曲线法,6种目标化合物的线性关系良好(r≥0.9999),除烟酰胺(nicotinamide,NAM)的定量限为0.5 mmol/L外,其他5种目标化合物的定量限均为0.2 mmol/L。考Prebiotic synthesis察了两种具有代表性的NAD+前体化合物的日间和日内重现性,烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)和NAM的日间重现性分别为0.21%和0.37%,日内重现性分别为1.03%和1.44%。用标准曲线法和qNMR两种方法分别对收集的10个NAD+补充剂保健品进行检测,误差合理(<5%)。结论 建立的核磁共振方法具有良好的可靠性和灵敏度,可selleck抑制剂用于保健品中NAD+及其前体化合物的生产控制和市场监管。

昆明杯冠藤与青羊参叶绿体基因组特征比较及系统发育分析

昆明杯冠藤和青羊参隶属于夹竹桃科鹅绒藤属,是重要的药用植物。本研究对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组进行测序、组装,并对两者叶绿体基因组的结构特征及其系统发育位置进行了分析。结果表明,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组均具有典型更多的四分体结构,注释到133个基因,两者总GC含量接近。密码子偏好性分析显示,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组中相对同义密码子使用度略有不同,但差异不大,且在密码子第3位有强烈的A或U偏好。在两methylomic biomarker者叶绿体基因组中分别检测到91个和103个简单重复序列,以A/T类型重复占比最大。核苷酸多态性分析显示,鹅绒藤属叶绿体基因组共有间区序列的核苷酸多态性值高于共有基因序列,基于共有间区序列的高变区设计了一对引物可对昆明杯冠藤和青羊参进行鉴别。系统发育分析表明,昆明杯冠藤和地梢瓜亲缘关系最近,青羊参、白首乌和隔山消在鹅绒藤属中形成稳定的单系分支,三者亲缘关系较近。对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组特征及其系统发育的比较分析将为两种植物的物种鉴定及鹅绒藤属植物的遗传多样性和系统进https://www.selleck.cn/products/chir-99021-ct99021-hcl.html化研究奠定理论基础。

半乳糖基AIE光敏剂的构建及其聚集细菌和光动力性能研究

细菌感染严重威胁人类生命健康,光动力治疗(Photodynamictherapy,PDT)作为一种非抗生素的治疗方式,具有时空选择性、不易引起细菌耐药性等优点,在治疗致病菌感染方面具有很大的潜力。光敏剂是光动力治疗的主要因素之一,但传统光敏剂在水溶液中容易发生聚集,降低单线态氧(1O2)产生性能。相比之下,近年来新兴的聚集诱导发光(Aggregation-inducedemission,AIE)分子作为光敏剂具有明显优势,其在生物水环境中聚集后不仅发出强烈荧光,同时其单线态氧产生性能也显著提高。但单线态氧普遍存在寿命短和作用距离短的问题,会降低其PDT杀伤效率。因此,本论文试图发展糖基AIE光敏剂聚集体,期望通过非共价相互作用来诱导细菌聚集,缩短光敏剂与细菌的作用距离,从而充分利用产生的1O2实现对细菌的高效光动力杀伤。主要内容包括以下三个部分:(1)设计合成了具有电子给受体(D-A)结构和含羧基基团的AIE分子CTRA,羧基的引入提供氢键位点用于与金黄色葡萄球菌结合,D-A结构用于产生1O2。同时,合成具有β-D-半乳糖基和十二烷基疏水链的半乳糖基两亲分子,命名DGal,与CTRA通过共组装的方式来构建半乳糖基AIE光敏剂聚集体。半乳糖基的引入增加聚集体表面的氢键位点,进一步增强CTRA/DGal聚集体与金黄色葡萄球菌间的氢键作用,提高其诱导细菌聚集的能力。在疏水作用下,CTRA与DGal共组装形成表面含半乳糖基的球形聚集体。通过简单改变CTRA和DGal的摩尔比可以调控其聚集体表面的糖基分布和聚集体内部CTRA分子排列,实现对聚集体诱导细菌聚集性能和1O2产生性能的调控,从而实现对金黄色葡萄球菌光动力杀伤效率的调控。实验结果表明,当CTRA/DGal摩尔比为1:0.8时,CTRA/DGal球形聚集体具有高效的PDT杀伤活性,在白光照射下(20mW/cm2,30min),能原位产生1O2破坏细菌膜的完整性,实现对金黄色葡萄球菌接近100%的杀伤效率。同时,所构建的CTRA/DGal球形聚集体作为光敏剂具有良好的生物相容性,对人正常细胞无明显的细胞毒性。(2)设计合成了具有D-A结构和半乳糖基的阳离子AIE分子,命名为TPyGal,其自组装形成表面带半乳糖基的球形聚集体,实现对铜绿假单胞菌的聚集和高效PDT杀伤。其D-A结构用于产生1O2,半乳糖基与铜绿假单胞菌表面LecA特异性结合,阳离子吡啶基与细菌负电表面通过静电作用结合。在多价半乳糖-LecA特异性作用和非特异静电作用的协同驱动下,TPyGal聚集体能有效诱导铜绿假单胞菌的聚集,形成大的细菌簇。PEG300说明书由于具有适当的亲疏水性,TPyGal诱导细菌聚集后能够插入细菌膜中,并且在光照下由于1O2的原位产生可以进一步促进TPyGal分子的插膜。因此,在白光照射下,TPyGal聚集体对铜绿假单胞菌具有高效的PDT杀伤效率。实验结果表明,在90 mW/cm2的光照强度下,光照1 min,TPyGal聚集体对铜绿假单胞菌的杀伤率达到50%;光照20min,杀伤效率接近100%。此外,由于兼具单线态氧、聚集细菌以及插膜性能,TPyGal聚集体在光照下能有效促进小鼠铜绿假单胞菌感染伤口的愈合,并且具有良好的生物相容性。(3)引入具有D-A结构的阳离子AIE分子TPyEt,用于与TPyGal共组装形成表面带有半乳糖基和阳离子基团的球形聚集体,进一步增强与细菌间的静电作用来提高其诱导铜绿假单胞菌聚集、插膜和1O2产生性能,从而提高其光动力杀伤效率。通过简单改变TPyGal和TPyEt摩尔比来调节聚集体表面的糖基分布、正电荷分布以及聚集体内部D-A结构的排列,实现了对聚集体聚集细菌、插膜以及1O2产生性能的调控,进一步实现了对铜绿假单胞菌光动力杀伤效率的调控。结果表明,在低光照强度(20 mW/cplant immunitym2,30min)下,TPyGal自身对铜绿假单胞菌的抗菌活性仅为32.6%,引入TPyEt后,在二者的最佳比例下(XTPyEt=0.67),所构建的TPyGal/TPyEt球形聚集体在低光照强度下对铜绿假单胞菌可以达到89%的杀伤效率。而且,所构建的TPyGal/TPyEt聚集体具有良好的生物相容selleck产品性,对人体正常细胞无明显细胞毒性。

住院精神分裂症患者精神病相关创伤后应激障碍现况及其影响因素分析

目的 了解住院精神分裂症患者精神病相关创伤后应激障碍(psychosis-related post-traumatic stress disorder, PR-PTSD)的发生情况及其影响因素。方法 采用方便抽样法选取2022年3月—7月成都市3所二级购买CP-456773及以上精神专科医院的住院精神分裂症患者进行问卷调查。问卷包括一般资料问卷、事件影响量表-修订版(Impact of Event Scale-revised, IES-R)、抑郁自评量表、简易应对方式问卷、简版无法忍受不确定性量表。各量表得分若不符合正态分布,采用中位数(下四分位数,上四分位数)表示。根据IES-R得分将纳入患者分为2组,≥33分为PR-PTSD组,<33分非PR-PTSD组。比较两组患者的一般情况Bafilomycin A1化学结构,分析PR-PTSD与抑郁、应对方式、无法忍受不确定性之间的相关性,并采用多因素二分类logistic回归分析影响住院精神分裂症患者PR-PTSD的因素。结果 共纳入患者388例。其中,非PR-PTSD组282例,PR-PTSD组106例。其中,患者IES-R得分为23.00(15.00,33.00)分,抑郁得分为45.00(38.00,53.00)分、消极应对得分为11.00(8.00,14.75)分、积极应对得分为20.00(16.00,25.00)分、无法忍受不确定性得分为28.00(22.25,33.00)分。患者IES-R与抑郁(r=0.370,P<0.001)、消极应对(r=0.396,P<0.001)、积极应对(r=0.111,P=0.029)、无法忍受不确定性(r=0.467,P<0.0Medical pluralism01)均呈正相关。回归分析结果显示,抑郁[比值比(odds ratio, OR)=1.073,95%置信区间(confidence interval, CI)(1.043,1.105),P<0.001]、消极应对[OR=1.121,95%CI(1.040,1.208),P=0.003]、无法忍受不确定性[OR=1.081,95%CI(1.045,1.118),P<0.001]是住院精神分裂症患者PR-PTSD的影响因素。结论 住院精神分裂症患者PRPTSD患病率较高,抑郁、消极应对、无法忍受不确定性是住院精神分裂症患者PR-PTSD的危险因素。

DNA基金属纳米团簇类过氧化物酶活性及生物学应用研究

DNA基金属纳米团簇具有多种类酶活性,在生物分析、细胞成像和癌症治疗等领域展示出颇具潜力的应用前景。本论文设计了七条不同序列的单链DNA,即三条含有不同碱基数目的富C序列(kit、c-myc、HTC)、一条富G序列(TBA)以及分别由三条富C序列与TBA序列组合的富CG序列(kit-TBA、c-myc-TBA、HTC-TBA),以此为模板分别合成了单金属纳米团簇(DNA-M NCs)、双金属纳米团簇(DNA-Fe/M NCs)以及三金属纳米团簇(DNA-Fe/Cu/Ag NCs),并利用TEM和XPS进行表征。主要研究了纳米团簇的类过氧化物酶活性及其影响因素,并对催化性能和催化机理进行了分析,实现了在生物体系中的应用。本文主要研究工作如下:(1)GDC-0068分子式DNA基金属纳米团簇类过氧化物酶活性的研究。以kit-TBA序列为模板,合成了一系列kit-TBA-M NCs,以H_2O_2和chronic infectionTMB为底物测试了这些纳米团簇的类过氧化物酶活性,发现kit-TBA-Fe NCs类酶活性最高,进一步探究了制备纳米团簇时DNA模板和金属离子的浓度对类酶活性的影响。又合成了kit-TBA-Fe/Ag NCs、kit-TBA-Fe/Cu NCs以及kit-TBA-Fe/Cu/Ag NCs,并对催化反应进行的温度和p H进行优化,发现反应体系的温度为25℃,p H=4.0时,催化活性最高。尽管这三种纳米团簇类酶活性与kit-TBA-Fe NCs相近,但kit-TBA-Fe/Ag NCs催化活性略高。利用TEM和XPS对kit-TBA-Fe/Ag NCs和kit-TBA-Fe/Cu/Ag NCs进行了结构表征,平均粒径约为1.8±0.3 nm和1.4±0.2 nm,纳米团簇中金属元素的主要存在形式为Fe(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)、Ag(0)、Cu(0)和Cu(Ⅰ)。(2)kit-TBA基金属纳米团簇类过氧化物酶活性的研究。四种纳米团簇具有良好的稳定性,放置360小时后,相对活性下降10%左右。适当增大纳米团簇的浓度可提高催化活性,但浓度过大反而使催化活性降低。稳态动力学实验表明,kit-TBA-Fe/Ag NCs类酶活性略高于其他团簇的原因在于对H_2O_2和TMB较低的米氏常数(K_m)值,即对两种底物具有较强的亲和力。以对苯二甲酸(TA)为荧光探针,证明了纳米团簇催化H_2O_2的过程中产生了羟基自由基(·OH),其中kit-TBA-Fe/Cu/Ag NCs的荧光强度最强,表明纳米团簇中多种金属元素的协同更能充分催化H_2O_2产生大量·OH。(3)kit-TBA基金属纳米团簇在生物体系中的应用。四种纳米团簇对细胞的生长都有抑制作用,其中kit-TBA-Fe/Cu/Ag NCs毒性最强,催化细胞内源性H_2O_2产生大量ROS,在荧光染料处理后可以看到明显的绿色荧光AZD6738采购;外源H_2O_2的加入诱导ROS的产生以及细胞形态的变化,使毒性增强。或因癌细胞与正常细胞中内源H_2O_2浓度的差异,kit-TBA-Fe/Cu/Ag NCs对两者生长的抑制作用不同,但都表现出时间和浓度依赖性。四种纳米团簇在缓冲体系中对GSH的检测具有良好的选择性和抗干扰能力,线性范围均为1.0-40μM,其中kit-TBA-Fe/Ag NCs对GSH的检出限最低,约为0.15μM。实现了在胎牛血清中对GSH的检测。

结核分枝杆菌PE26蛋白调节巨噬细胞免疫反应进而促进分枝杆菌胞内定殖

结核分枝杆菌(MTB) PE/PPE家族蛋白介导MTB与宿主间的相互作用,调节宿主炎症反应,有助于其的biometric identification存活和疾病发展。为研究PE/PPE家族中PE26蛋白的作用,本实验利用PCR扩增pe26基因片段,构建重组载体p AIN-PE26,转化耻垢分枝杆菌(Ms)构建重组菌p AIN-PE26/Ms,经western blot鉴定结果显示,p AIN-PE26/Ms正确表达重组PE26蛋白(rPE26)。利用差速离心分离p AIN-PE26/Ms亚细胞组分,经western blot鉴定结果显示,r PE26定位于p AIN-PE26/Ms细胞壁。通过p AIN-PE26/Ms的菌落形态观察和生长曲线测定,结果显示,p AIN-PE26/Ms菌体表面较p AIN/Ms对照组更粗糙,脊不规则且相对较高,褶皱不明显;p AIN-PE26/Ms生长速度较对照组极显著增加(P<0.001)。利用H37Ra感染巨噬细胞,通过q RT-PCR检测pe26转录水平,结果显示,H37Ra感染巨噬细胞后pe26转录水平极显著增加(P<0.001)。利用p AIN-PE26/Ms感染巨噬细胞,分别通过q RT-PCR、ELISA检测细胞因子转录和表达水平,采用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性试验、流式细胞术和胞内定殖的方法检测细胞毒性,结果显示,p AIN-PE26/Ms促进宿主细胞炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-12和TNF-α)的转录和表达(P<0.05);r PE26促进巨噬细胞死亡,且在感染48 h时促进细胞早期凋亡(P<0.selleck合成05);r PE26促进p A此网站IN-PE26/Ms在巨噬细胞内的定殖(P<0.01)。上述结果首次表明,定位于细胞壁的r PE26在感染巨噬细胞过程中促进p AIN-PE26/Ms的生长、炎性细胞因子的转录和表达、巨噬细胞凋亡和胞内定殖。本实验为解析PE26参与分枝杆菌的致病机制和MTB调节宿主免疫反应的机制提供一定参考依据。

核苷(酸)类似物对慢乙肝患者维生素D、β_2微球蛋白等指标的影响

目的:观察慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者服用核苷(酸)类似物(NAs)对血清维生素D(VitD3)水平、β_2微球蛋白(β_2-MGselleck NMR)等指标的影响。方法:以2020年10月至2021年9月于内蒙古医科大学附属医院和呼和浩特市第二医院就诊的90例初治汉族CHB患者为研究对象,依据不同抗病毒治疗方案分为3组,即富马酸丙酚替诺福韦(TAF)组、富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)组、恩替卡韦(ETV)组,每组各30例,另以同期于内蒙古医科大学附属医院体检中心体检的30例汉族健康人作为对照组。就对照组与CHB患者基线资料[血清VitD3、血钙、血磷、血肌酐(Scr)、血清β_2-MG、血清视黄醇结合蛋白(RBP)、血清胱抑素C(CysC)、估算肾小球滤过率(eGFR)]及CHB患者随访资料(血清VitD3、血钙、血磷、血Scr、血清β_2-MG、血清RBP、血清CysC、eGFR、HBV DNA)进行对比分析;观察:(1)CHB患者与健康人血清VitD3水平有无区别;(2)NAs治疗是否会影响CHB患者VitD3水平;(3)不同NAs治疗方案、不同随访时间节点下血钙、血磷、血清VitD3、血Scr、血清β_2-MG、血清RBP、血清CysC、eGFR及HBV DNA水平有无差异。结果:(1)相比于健康体检者,CHB患者VitD3水平显著降低(t=2.611,P=0.010)。(2)抗病毒治疗第24周时,TAF及TDF组CHB患者VitD3水平较基线显著升selleck产品高(P<0.05);第48周ETV组CHB患者VitD3水平较基线显著升高(P<0.05);但任意随访时间节点三组比较均无统计学差异(P>0.05)。随着CHB患者HBV DNA载量降低,VitD3水平呈逐渐升高的趋势,二者存在显著性负相关(P<0.05)。(3)治疗第72周时TDF组β_2-MG、CysC水平显著高于TAF组及ETV组(F=3.851,P=0.025;F=3.495,P=0.035)。(4)三组CHB患者任意随访时间节点血钙、血磷、血Scr、eGFR及RBP比较均无统计学差异(P>0.05)。(5)抗病毒治疗第12、24周TAF及TDF组较ETV组HBV DNA下降更为显著(F=9.539,P<0.001;F=5.241,P=0.007)。结论:(1)本地区健康体检者与CHB患者普遍存在VitD3不足,但CHB患者VitD3不足更为显著。(2)CHB患者HBV DNA与VitD3呈负相关;随着NAs治疗所致病毒载量降低,VitD3水平可部分恢复,必要时应及时补充VitD3。(3)TAF及TDF较ETV对CHB患者在短期内抗病毒效果更强。medical intensive care unit(4)CHB患者服用TDF存在一定程度的肾损伤,血清β_2-MG及CysC较血Scr及eGFR水平变化敏感,临床工作中可通过联合检测血清β_2-MG及CysC提高早期肾损伤的诊断阳性率。(5)针对CHB患者抗病毒治疗,TAF及ETV总体安全性优于TDF。(6)临床工作中针对长期服用NAs的CHB患者应关注其肾损伤和VitD3的补充。

地黄组培再生突变体耐受连作障碍的机制研究

地黄,玄参科地黄属多年生草本植物,是我国传统的大宗药材,最早出典于《神农本草经》被列为上品,其根部具有极高的药用价值。然而地黄栽培存在着严重的连作障碍问题,同一块土地种植一年后,需间隔8-10年才能在同一块土地上再次种植,并且连作地黄植株弱小,叶片稀少,根部膨大受到抑制,药用品质下降,经济价值降低,从而严重影响地黄的产业发展。因此探究地黄的连作障碍机制,解决地黄连作障碍问题对地黄产业可持续发展具有重要意义。植物组织培养经过脱分化,再分化的过程可以引发再生植株产生遗传和表观遗传变异。本论文基于组织培养诱变,通过连作胁迫筛选获得具有连作障碍抗性的地黄组织培养再生植株,进一步对突变株的抗氧化能力分析,结合转录组及糖代谢组分析,初步明确地黄连作障碍分子机制。本论文取得如下研究结果:1.以地黄成熟叶片为外植体进行愈伤组织诱导及分化,获得地黄组培再生苗;移栽再生苗至土壤中,对移栽后15天组培苗进行连作浸提液胁迫处理,每周1次,连续处理6次。至移栽后150天,对再生苗地上、地下部生物量测定,获得连作障碍抗性地黄植株。2.对筛选获得的连作抗性sociology medical及常规(敏感)型再生地黄进行无性繁殖,待地黄块根发芽15天后,使用相同方法进行连作胁迫处理。培养至150天后,选取具有稳定表型的连作抗性再生苗植株(RTGF-beta/Smad抑制剂CR)和常规连作敏感型再生苗植株(RCS)各3株,以及selleck NMR未处理对照组地黄再生苗(RW)3株。通过对RW、RCR和RCS的生物量检测证实,RCR具备显著的耐受连作胁迫的特性。连作胁迫导致地黄烂根现象与根部抗氧化损伤直接相关,本论文分别对RW、RCR和RCS进行ROS相关生理检测,进一步证明经过连作胁迫处理后,会导致地黄ROS水平升高,但RCR中ROS积累明显低于RCS中ROS水平,证实RCR抵抗连作胁迫与ROS水平降低紧密相关。3.为进一步探究地黄RCR产生连作障碍抗性的分子机制,本研究分别采集了RW、RCR、RCS生长至150天的块根进行RNA-seq测序分析,结果显示RCR-vs-RW,RCS-vs-RW,RCS-vs-RCR的差异基因数量分别为:2966、8604、9811。对以上差异基因进行GO富集分析和KEGG富集分析时发现,差异基因参与了植物-病原体相互作用、植物激素信号转导、鞘脂代谢、甘油脂代谢、谷胱甘肽代谢、糖酵解以及淀粉和蔗糖代谢等代谢途径的调控过程,其中糖类物质代谢相关途径呈现显著富集。4.为进一步明确RCR连作抗性是否与糖类物质代谢相关,本研究采集了连作处理后培养了150天的RW、RCR、RCS的块根进行糖类物质代谢组检测。实验结果显示,24种目标糖类中只有9种糖含量高于0.1mg/g,分别是1,5-酐-D-山梨糖醇(1-5-Anh),D-果糖(Fru),D-半乳糖(Gal),葡萄糖(Glu),肌醇(Inositol),棉子糖(Raffinose),D-核糖-5-磷酸钡盐(Ribose-5-pho-Ba),蔗糖(Suc),海藻糖(Tre)。其中,1,5-酐-D-山梨糖醇,D-果糖,D-核糖-5-磷酸钡盐3种糖含量在RW、RCR和RCS中没有明显变化;但与RW相比,在RCR和RCS中肌醇、棉子糖和蔗糖含量都出现轻微的上调;与RW相比,在RCR和RCS中D-半乳糖和海藻糖含量都出现轻微下调;值得注意的是,与RW相比,其中葡萄糖的含量,在RCR中出现明显下降,在RCS中没有明显变化,表明连作处理后连作抗性地黄葡萄糖含量降低与其抗性有关。5.为综合分析生理检测,转录组测序以及糖类代谢组检测结果,我们利用q RT-PCR对相关基因行了相对定量检测。结果证实,ROS清除相关的基因在RCR中上调表达,在RCS中下调表达,这与生理检测结果中RCR中ROS积累少于RCS的结果相一致;葡萄糖含量下降可能造成NADPH积累,RCR中NADPH合成相关基因表达显著上调证实了这一结果,同时,抗坏血酸-谷胱甘肽循环(ASA-GSH)相关基因表达上调及酶活性上调,进一步证实糖代谢改变引发的NADPH及抗坏血酸-谷胱甘肽循环相关酶的积累可能提升了RCR植株中ROS的清除能力,以此增强其连作障碍的耐受性。基于转录组分析及定量检测发现,RCR中脂类代谢趋向于二酰甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)减少,三酰甘油(TAG)积累的方向,同样利于ROS的代谢,有利于提高RCR对连作胁迫的抗性。综上所述,本论文通过对连作障碍抗性组培变异株分析,发现组织培养引发地黄RCR株系广泛的基因表达变化,其中以葡萄糖为核心的糖类物质代谢发生显著变化,糖代谢和抗坏血酸-谷胱甘肽循环的改变,促进了NADPH合成,进而增强抗坏血酸-谷胱甘肽循环以此来提升植株ROS的清除能力,降低ROS的积累。此外,以DAG、FFA减少,TAG积累为变异趋势的脂类物质改变对地黄抗连作障碍抗性提升也发挥调节作用。本研究的相关结果为地黄栽培方法的优化及地黄抗连作障碍优良种质资源的创制提供了新的理论依据。

基于CiteSpace知识图谱对薰衣草精油研究现状的可视化分析

该研究采用文献计量学方法,基于知识图谱分析薰衣草精油的研究现状和发展趋势,为后续研究提供依据和参考。运用CiteSpace 6.1. R3软件对中国知网(CNKI)与Web of Science(WOS)数据库自2000~20temporal artery biopsy22年收录的薰衣草精油相关中、英Torin 1抑制剂文文献,从发文量、作者、机构、国家/地区等方面进行可视化分析。最终共纳入中文文献204篇,英文文献1 851篇。结果显示,2016年开始英文发文量呈迅速上升趋势,发文量最多的国家为伊朗,中心性最大的为美国,新疆大学和阿扎德大学分别为中、英文发文量最多的机构。中文文献体现出以符继红、杨开伦和李光武等为核心的研究团队,英文文献体现出以Schlaefke Sandra、符继红和Mahmoud Soheil S等为核心的研究团队。关键词分析显示,研究方向集中于薰衣草精油的药理作用、芳香疗法、提取工艺、微囊制备等领域。目前,薰衣草精油相关的芳香疗法、嗅觉通路、镇静催眠、抗菌活性、抗真菌活性、抗氧化、降血压、抗焦虑、提取工艺、微囊开发等为研究热点。对薰衣草精油抗焦虑、抗抑郁、抗菌、抗氧化、降血压及增强认知等的作用靶点、信号通路及基因层面的深入研MC3纯度究,可能成为未来研究的热点趋势。