Achr receptor

芋螺毒素(Conotoxins,CTXs)是芋螺分泌的混合型多肽毒素,作用于多种离子通道或神经递质受体,引起麻木、抽搐、呕吐、呼吸衰竭等中毒症状。CTXs种类繁多,其中α-芋螺毒素MI(CTX-MI)和α-芋螺毒素GI(CTX-GI)等剧毒成分对人类有致命威胁;部分CTXs因其特异的识别作用,可作为探针用于神经生物学研究;此外,以ω-CTXs为代表的CTXs具有镇痛、神经保护、运动调节等药物活性,被誉为“海洋药物宝库”。但是,已鉴定的CTXs仅占预估总量的1%左右,作用机制和药理活性鲜有报道,定量检测仅依赖质谱技术,最重要的是缺少剧毒种类的靶向解毒药剂,这严重威胁了水下作业人员的生命健康,且阻碍CTXs相关研究及应用的推进。上述科学问题难以攻破的重要原因之一是缺乏针对CTXs的特异性分子识别元件。抗体虽然是最常用、最有效的识别元件,但CTXs属于半抗原,无法直接通过免疫动物获得单克隆抗体,且重组抗体的亲和性难以保证,因此需要筛选新型元件用于CTXs的识别、富集和活性阻滞。核酸适配体对多类靶标尤其是小分子化合物表现出特异的高亲和力,在分子痕检、疾病诊断、药物开发等领域得到广泛应用。因此,适配体有望作为特异性分子识别元件,推进CTXs相关研究的发展。本文以毒性最强、分布最广的CTX-MI和CTX-GI为例,使用磁珠法(MB-SELEX)获得特异性适配体MBMI-01和MBGI-02;又创建了二氧化锰法(MnO_2-SELEX)用于广谱适配体的筛选,并获得具有双靶标亲和性的适配体Mn-13。随后基于Mfol此网站d预测的二级结构模型对适配体进行初步截短;又通过改进的自发结合的分子动力学模拟获得适配体与靶标的三维互作模型,实现作用位点的从头确定和进一步优化,显著提升了适配体的亲和力和特异性。最后基于优化后适配体开发了生物传感器,初步应用于水样和血样中CTX-MI和CTX-GI的快速定量。具体结果如下:1.适配体的筛选采用MB-SELEX和MnO_2-SELEX。MB-SELEX用于特异性适配体的筛选,分别以CTX-MI和CTX-GI为靶标进行两次独立筛选。高通量测序结果显示,经过12轮正向筛选和6轮反向筛选,文库的序列多样性显著降低,高亲和力序列显示出富集优势。另外,本文验证了MnO_2纳米片作为ss DNA固定材料的可行性,基于文库固定原理设计了MnO_2-SELEX法,并以混合毒素为靶标经10轮筛选获得双靶标亲和适配体。根据序列富集程度和吉布斯自由能筛选优势适配体,利用生物膜干涉(Biolayer interferometry,BLI)法初步确定其亲和力和特异性,最终获得CTX-MI特异性适配体MBMI-01(K_D=850 n M)、CTX-GI特异性适配体MBGI-02(K_D=610 n M)和广谱适配体Mn-13(与CTX-MI和CTX-GI结合的K_D值分别为530和740 n M)。2.经post-SELEX过程进一步提升适配体的亲和特性。首先去除适配体两端的固定区域,新序列MBMI-01R、MBGI-02R和Mn-13R的亲和力未见显著变化。随后基于Mfold预测的二级结构模型,将MBGI-02R截短为25 nt的茎环结构,新适配体MBGI-01Rb的亲和力由610 n M提升至39 n M。然而,MBMI-01R和Mn-13R可形成G-四联体,Mfold输出的单平面二级结构模型与实际的双平面结构存在较大偏差,不能作为序列优化的结构依据。三维互作模型可以直观展现适配体与靶标结合的真实构象,但对于作用区域未知的Digital mediaG-四联体型适配体,现有的算法无法将其作为柔性链进行逐个核苷酸与靶标的互作模拟。因此以MBMI-01R为例,调用半经验公式进行算法优化,获得MBMI-01R与CTX-MI的三维互作模型,并确定其互作核心为11个核苷酸残基构成的口袋结构,可通过氢键网络特异地将CTX-MI分子固定在其中。随后基于此模型进行截短和突变优化,增加互作位点、减少空间位阻并简化G-四联体骨架,最终获得35 nt的新序列MBMI-01R_6,使其对CTX-MI的亲和力由850 n M提升至60.5 n M。3.分别将MBMI-01R_6和MBGI-02Rb与BLI检测技术联用,制得适配体生物传感器。经鉴定所得传感器可保存一个月并重复使用至少10获悉更多次。其中CTX-MI适配体传感器的线性检测范围是1-50μM,LOD和LOQ分别是77.5和258.2 n M;CTX-GI适配体传感器的线性检测范围是2.5-70μM,LOD和LOQ分别是128.8和429.2 n M。随后对加标的海水、自来水和血液样品进行检测,回收率稳定在92.22-109.35%,变异系数均小于7.5%,证明所得适配体传感器可用于实际样本中CTX-MI和CTX-GI的定量检测。与现有的检测方法相比,所得适配体传感器不需要复杂的样品提纯处理、可在10 min内完成样本检测、所用耗材均可重复利用,更适用于就地检测、批量筛查和快速诊断,有望用于相关地区CTXs毒性的预警和中毒的及时确诊。综上所述,本文经过适配体的筛选、表征和优化,获得CTX-MI和CTX-GI的特异性高亲和适配体,并将其初步应用于实际样品中靶标的快速定量,有望突破现有质谱手段的局限,用于现场检测和快速诊断。除此之外,所使用的适配体筛选、表征、优化及应用的程序性流程,同样适用于其他CTXs核酸适配体的获得和应用性探究。

目的 观察可调脉宽1 064 nm Nd:YAG激光联合泡沫硬化剂治疗鼻部毛细血管扩张型玫瑰痤疮的疗效。方法 从购买PD-0332991门诊患者中选择符合纳入标准的38例出现治疗抵抗的鼻部血管扩张型玫瑰痤疮患者，采Tofacitinib核磁用先激光局部点照射封闭血管，后低温泡沫硬化剂联合注射的方法，观察疗效、不良反应。结果 injury biomarkers通过治疗，38例患者中治愈15例（39.5%），显效12例（31.6%），有效8例（21.1%），无效3例（7.9%），总体有效率为92.1%。38例患者未见严重不良反应，仅3例患者出现轻微反应或不适。患者治疗满意度：非常满意19例（50%），满意9例（23.7%），一般6例（15.8%），不满意4例（10.5%），总体满意率为73.7%。结论 先运用可调脉宽1 064 nm Nd:YAG激光局部点照射封闭血管，后采取低温泡沫硬化剂治疗鼻部毛细血管扩张型玫瑰痤疮，取得了良好的效果，恢复快且无明显副作用。作为硬化治疗的改良方法值得临床医生尝试。

目的:探讨反刍思维和述情障碍是否在青少年抑Antiviral bioassay郁症患者儿童期创伤经历与非自杀性自伤行为之间起中介作用。方法:采用自编一般人口学量表、儿童期创伤量表(CTQ-SF)、非自杀性自伤问卷(NSSI)、反刍思维量表(RRS)、多伦多述情障碍问卷(TAS-20),对103例青少年抑郁症患者进行调查，分析儿童期创伤经历、反刍思维、述情障碍、非自杀性自伤行为之间的关系；以及反刍思维、述情障碍在儿童期创伤经历与非自杀性自伤行为之间是否起中介作用和链式中介作用。结果:(1)儿童期创伤、反刍思维、述情障碍、非自杀性自伤行为之间均两两显著Blebbistatin NMR相关(r=0.53、0.56、0.51、0.66、0.63、0.56,P均<0.01);(2)反刍思维、述情障碍分别在儿童期创伤与BAY 73-4506 MW非自杀性自伤行为之间起中介作用(P均<0.01);(3)反刍思维和述情障碍在儿童期创伤与非自杀性自伤行为之间起链式中介作用(P<0.01)。结论:儿童期创伤较严重的青少年抑郁症患者会通过高反刍思维加重述情障碍，进而非自杀性自伤行为增多。

目的 横断面调查连续性肾脏替代治疗(continuMSC necrobiologyous renal replacement therapy,CRRT)后非隧道式导管封管前冲洗液使用现状，为导selleckchem Ipatasertib管功能维护与护理提供参考。方法 采用问卷星对广东省78家医院进行调查，了解CRRT后非隧道式导管封管前冲洗液使用类型、剂量和使用注射器类型等。结果共收集问卷91份，有效问卷78份(排除来自同一医院的问卷13份)，有效率85.7%。参与调查的CRRT护士的平均年龄为(33.78±5.97)岁，其中男性占19.2%，主管护师及以上职称占56.4%。生理盐水是CRRT后冲管的常见药物(97.5%),2家医院使用灭菌注射用水为冲管液。不同医院生理盐水冲管液剂量：5 ml[12(14.5%)]、10 ml[47(56.6%)]、15 ml[5(6.0%)]和20 ml[19(22.9%)]；冲管使用的注射器容量类型有5Lorlatinib分子量 ml[1(1.2%)]、10 ml[29(35.4%)]、20 ml[45(54.9%)]和30 ml[7(8.5%)]。结论 生理盐水是CRRT后非隧道式导管封管前冲洗液的主要类型，生理盐水冲洗剂量与使用注射器类型有多种形式。

活性氧(ROS)在调节生命体的各种生理功能中起着重要的作用。在正常的机体内ROS的过量产生导致氧化应激,而氧化应激与许多疾病如神经退行性疾病有关。因此对细胞中活性氧水平的探测以及稳态调控,对于疾病的进程意义重大。本论文构建了手性Se@CeO_2纳米功能探针和负载手性Cu_xOS纳米颗粒的glandular microbiome金属有机框架(Fe-MOF),通过手性超粒子类酶活性以及手性复合材料肿瘤微环境中的可控降解,有效清除了细胞内多余的活性氧和诱导肿瘤细胞死亡。首先,以手性半胱氨酸为配体,通过一步法合成了尺度为500 nm的Se纳米粒子(NPs),150 nm的CeO_2NPs,并将Se NPs和CeO_2NPs复合,获得尺寸150 nm、250 nm和450 nm的手性超粒子。采用圆二色光谱表征Se@CeO_2超粒子的光学活性,各向异性因子值高达0.018。制备的手性纳米功能探针表现出过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,手性功能纳米探针(10μg/m L)的GPx、CAT和POD的V_m(最大反应速度)为0.99 m M/min,1.54 m M/min和3.86×10~(-7)M/s是等量Se NPs和CeO_2NPs混合物的10倍、7倍和5.6倍。手性纳米功能探针通过模拟四种酶活并催化抗ROS级联反应可以有效清除胞内活性氧。将Se@CeO_2经脑部注射注入模型小鼠脑部,14天后,帕金森样疾病模型小鼠的运动功能障碍得到有效改善,小鼠脑中α-突触核蛋白(α-syn)的含量2周内减少70.7%。其次,采用水相氧化还原的方法,以手性青霉胺为配体,制备了尺度为5 nm的手性Cu_xOS NPs。采用水热法,制备了尺度为140 nm的Fe-MOF。然后采用MOF封装预合成纳米颗粒方法,将Cu_xOS与Fe-MOF复合,制备了尺度为150Compound 3临床试验 nm的手性Cu_xOS@Fe-MOF纳米颗粒,其圆二色响应在404 nm、488 nm和5selleck激酶抑制剂60 nm处。高浓度谷胱甘肽和低p H均作为刺激因素诱导纳米颗粒的降解,从而介导铜离子和铁离子释放到肿瘤细胞当中。利用该手性纳米颗粒在肿瘤中的可控降解,诱导肿瘤细胞铜死亡和铁死亡,实现了肿瘤的高效治疗。14天内肿瘤清除率高达80%。由上,制备了两种手性纳米功能探针,实现了对帕金森病与肿瘤的有效诊疗,有望为临床诊疗分析提供帮助。

活性氧(ROS)在调节生命体的各种生理功能中起着重要的作用。在正常的机体内ROS的过量产生导致氧化应激,而氧化应激与许多疾病如神经退行性疾病有关。因此对细胞中活性氧水平的探测以及稳态调控,对于疾病的进程意义重大。本论文构建了手性Se@CeO_2纳米功能探针和负载手性Cu_xOS纳米颗粒的glandular microbiome金属有机框架(Fe-MOF),通过手性超粒子类酶活性以及手性复合材料肿瘤微环境中的可控降解,有效清除了细胞内多余的活性氧和诱导肿瘤细胞死亡。首先,以手性半胱氨酸为配体,通过一步法合成了尺度为500 nm的Se纳米粒子(NPs),150 nm的CeO_2NPs,并将Se NPs和CeO_2NPs复合,获得尺寸150 nm、250 nm和450 nm的手性超粒子。采用圆二色光谱表征Se@CeO_2超粒子的光学活性,各向异性因子值高达0.018。制备的手性纳米功能探针表现出过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,手性功能纳米探针(10μg/m L)的GPx、CAT和POD的V_m(最大反应速度)为0.99 m M/min,1.54 m M/min和3.86×10~(-7)M/s是等量Se NPs和CeO_2NPs混合物的10倍、7倍和5.6倍。手性纳米功能探针通过模拟四种酶活并催化抗ROS级联反应可以有效清除胞内活性氧。将Se@CeO_2经脑部注射注入模型小鼠脑部,14天后,帕金森样疾病模型小鼠的运动功能障碍得到有效改善,小鼠脑中α-突触核蛋白(α-syn)的含量2周内减少70.7%。其次,采用水相氧化还原的方法,以手性青霉胺为配体,制备了尺度为5 nm的手性Cu_xOS NPs。采用水热法,制备了尺度为140 nm的Fe-MOF。然后采用MOF封装预合成纳米颗粒方法,将Cu_xOS与Fe-MOF复合,制备了尺度为150Compound 3临床试验 nm的手性Cu_xOS@Fe-MOF纳米颗粒,其圆二色响应在404 nm、488 nm和5selleck激酶抑制剂60 nm处。高浓度谷胱甘肽和低p H均作为刺激因素诱导纳米颗粒的降解,从而介导铜离子和铁离子释放到肿瘤细胞当中。利用该手性纳米颗粒在肿瘤中的可控降解,诱导肿瘤细胞铜死亡和铁死亡,实现了肿瘤的高效治疗。14天内肿瘤清除率高达80%。由上,制备了两种手性纳米功能探针,实现了对帕金森病与肿瘤的有效诊疗,有望为临床诊疗分析提供帮助。

栽培大豆是在自然环境和栽培条件下经人工定向选择从野生大豆中分离出来的,在演化过程中,大豆种子活力及种子萌发的生理特性发生变化,野生大豆由于丰富的遗传背景在大豆育种中具有重要的利用价值。本研究以3种类型大豆种子(野生、半野生和栽培)为试验材料,对种子活力及萌发过程生理指标进行比较研究,分析不同进化类型大豆selleck化学品种种子萌发的变化规律及差异,以期为大豆品种选育提供参考依据。试验结果如下:1.不同进化类型中,栽培型大豆百粒重最高,野生大豆最确认细节低。随着萌发时间的延长,发芽指数和活力指数都为栽培型大豆最高,说明萌发过程中,栽培型种子发芽能力优于野生、半野生;栽培型去子叶干重值最高;野生型大豆下胚轴比半野生、栽培长,能更有利于大豆子叶萌发出土。2.在大豆种子吸水和萌发期间,对相关生理指标进行比较,在萌发阶段,可溶性糖含量呈现下降的趋势,表明在萌发阶段,可溶性糖的消耗较多。子叶中可溶性蛋白含量栽培型大于半野生型,野生型最低,说明栽培大豆种子萌发过程中可溶性蛋白能够很好的为其提供能量和代谢中间产物。子叶中全氮含量表现下降趋势,萌发第7 d全氮含量最低,游离氨基酸含量呈现先上升后下降的趋势,第3 d氨基酸含量最高。在不同进化类型中全氮、游离氨基酸含量栽培大豆最高,其次半野生,野生最低。3.随着大豆种子萌发,子叶中硝态氮含量呈下降趋势,硝态氮含量在不同进化类型中差异不大;铵态氮含量呈先下降后上升趋势,第5 d铵态氮含量最低,铵态氮含量为栽培>半野生>野生。4.随着种子萌发,绝对电导率、丙二醛(MDA)含量提高,野生>半野生>栽培。表明随着萌发时间的延长大豆子叶逐渐衰老。野生、半野生和栽培大豆子叶的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性随着萌发的进程呈升高趋势。大豆子叶超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性均为栽培>半野生>野生。5.大豆种子萌发时期子叶中氮代谢关键酶:谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)、谷氨酸脱氢酶(GDH)活性表现为下降趋势,第1 d活性最高;硝酸还原酶(NR)活性表现为先升高后下降趋势,第5 d活性最高;子叶中谷氨酰immediate memory胺合成酶、谷氨酸合成酶、谷氨酸脱氢酶、硝酸还原酶活性栽培大豆最高,其次是半野生大豆,野生大豆最低。大豆演化过程中栽培大豆子叶氮代谢酶活性水平较高。

[目的]探讨在校大学生抑郁人群肠道菌群的多样性特点。[方法]发放调查问卷并收集抑郁人群和健康对照粪便样本，以提取的肠道菌群DNA为模板扩增16S rRNA片段，运用Illumina HiSwww.selleck.cn/products/E7080eq平台建立文库并进行高通量测序，信息学手段分析菌群的多样性和丰度差异。[结果]Alpha多样性分析的Chao1(P=0.0AZD9291临床试验099)和Ace指数(P=0.0011)指数均显示抑郁症患者物种丰度随着抑郁程度加重有降低后升高的趋势，且轻度和中度抑郁相比有极显著性差异；物种组成分析抑郁人群和健康对照在门属水平上有显著差异，其中放线菌门(AC:P=0.0042;BC:P=0.031)、纤维杆菌属(AC:P=0.0000017;BC:P=0.000024)、双歧杆菌属(AC:P=0.0035;BC:P=0.0056)、肠杆菌属(AC:P=0.011;BC:P=0.0006)、乳酸菌属(AC:P=0.00072;BC:P=0.0048)与抑郁程度负相关；组间样品LEfSe分析，巨球型菌属、疣微菌门、阿克曼氏菌属等8种菌可能是抑郁症的疾病标志菌。[结论]样本分析显示，轻中度患者菌群丰度有显著性差异，一些潜在有益细菌属如双Fluorescent bioassay歧杆菌属、魏斯氏菌属、乳酸菌属等丰度与抑郁程度成反比。

[目的]观察N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对实验性矽肺纤维化进程中肺Bioreactor simulation泡Ⅱ型上皮细胞衰老相关信号的作用及其机制。[方法]采用动式染尘构建实验性矽肺大鼠模型,实验分selleck激酶抑制剂组为对照组、染尘组和Ac-SDKP后处理组。体外培养MLE-12细胞,实验分组为对照组、SiO_2诱导组、Ac-SDKP组和SiO_2+Ac-SDKP组。天狼星红染色观察肺组织胶原沉积,免疫荧光染色检测p21的定位;免疫印迹法检测I型胶原蛋白(ColI)、p-毛细血管扩张性共济失调突变激酶(ATM)、p-毛细血管扩张性共济失调(ATR)、p-p53、p21、p16的表达。[结果]与对照组相比较,染尘组大鼠肺组织形成典型的矽结节伴胶原沉积,免疫荧光染色结果显示p21蛋白主要定位于肺泡II型上皮细胞,免疫印迹结果显示肺组织内Col I、p-ATM、p-ATR、p-p53、p21、p16蛋白表达水平上调;与染尘组相比较,Ac-SDKP后处理组大鼠肺内矽结节数量和面积显著减少,肺组织内ColI、p-ATM、pATR、p-p53、p21、p16蛋白表达水平下调(P<0.05)。与对照selleck Imidazole ketone erastin组相比较,SiO_2诱导组的MLE-12细胞Col I、p-ATM、p-ATR、p-p53、p21、p16蛋白表达水平上调;与Si O2诱导组相比较,SiO_2+Ac-SDKP组Col I、p-ATM、p-ATR、p-p53、p21、p16蛋白表达水平下调(P<0.05)。[结论]Ac-SDKP能够通过抑制肺泡II型上皮细胞衰老信号的活化从而调节胶原沉积。

海洋梭子蟹(Portunus trituberculatus)主要依靠滋味与风味物质定向诱捕，常用诱捕饵料为秋刀鱼和鲐鱼切块后的鱼体。草鱼是我国最常见的淡水鱼之一，常用于小型的螃蟹捕捞。分析3种天然饵料鱼的不同部位即头、内脏、红肉、白肉和中段的滋味物质，结果表明：草鱼各部位1 g鱼体中水溶蛋白medical cyber physical systems平均质量为33.95 mg、各部位100 g鱼体中可溶性糖平均质量为0.62 g,高于鲐鱼和秋刀鱼；秋刀LEE011分子量鱼白肉中的肌苷酸含量最高，各部位1 g鱼体中肌苷酸质量为1.29 mg;鲐鱼和秋刀鱼各部BIBW2992半抑制浓度位100 g鱼体中腺苷酸平均质量分别为0.056,0.054 mg,牛磺酸平均质量分别为0.92,1.58 g,甜菜碱平均质量分别为2.33,2.40 g,均高于草鱼。鲐鱼、秋刀鱼和草鱼各部位100 g鱼体中游离氨基酸平均质量分别为682.03,822.63,431.88 mg,其中鲐鱼和秋刀鱼组氨酸的平均质量最高，分别为227.98,262.51 mg,高于草鱼的47 mg。研究成果以期为新型蟹用饵料的开发与利用提供参考依据。