Achr receptor

黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivaleno,DON)和赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)在饲料及原料中混合污染严重,对动物和人类健康产生严重的危害。霉菌毒素通过诱导细胞氧化应激导致细胞线粒体损伤,进而产生免疫毒性。绿原酸已被证Chemical and biological properties明具有抗霉菌生长、增强机体抗氧化和免疫等功能。但是目前关于绿原酸对霉菌毒素诱导的线粒体动力学失衡和RLR损伤的研究还未见报道。本研究首先从绿原酸、异绿原酸A、新绿原酸中筛选出拮抗联合霉菌毒素效果最好的药物,然后探究该药物对联合霉菌毒素诱导的猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAM)线粒体动力学和RLR通路破坏的保护作用。为临床生产中联合霉菌毒素污染的防控以及绿原酸的应用提供理论依据。具体试验内容如下:试验一:绿原酸、异绿原酸A、新绿原酸对AFB1、DON、OTA联合暴露药物和浓度筛选本研究首先筛选拮抗联合霉菌毒素效果最好的绿原酸同分异构体。采用CCK-8法检测三种绿原酸同分异构体(2、4、8、16、32、64、128μg/m L)对PAM细胞的细胞毒性的影响。结果表明128μg/m L的三种绿原酸同分异构体明显表现出细胞毒性,浓度在64μg/m L时PAM细胞活力保持在85%以上。然后分别选取低、中、高(16μg/m L、32μg/m L、64μg/m L)的三种绿原酸同分异构体与AFB1、DON、OTA(0.94μg/m L、0.185μg/m L、1.255μg/m L)联合霉菌毒素共同处理细胞24 h,检测PAM细胞活力。结果发现与单独添加联合霉菌毒素组相比,添加64μg/m L的三种绿原酸同分异构体后PAM细胞活力最大,说明64μg/m L的三种绿原酸具有最佳的抗联合霉菌毒素效果。然后使用64μg/m L的三种绿原酸同分异构体与联合霉菌毒素共同处理PAM细胞24 h,检测细胞ROS水平和GPX4的含量,结果发现64μg/m L异绿原酸A较其他两种绿原酸极显著降低联合霉菌毒素诱导ROS水平,升高GPX4表达量(P<0.05)。所以后续试验选用64μg/m L的异绿原酸A。试验二:异绿原酸A对联合霉菌毒素致PAM细胞线粒体动力学失衡的影响试验设置对照组(C组)、联合霉菌毒素组(M组)、异绿原酸A组(ICCA组)、异绿原酸A与联合霉菌毒素共同处理组(ICCA+M组)。(1)通过流式细胞术检测PAM细胞的线粒体ROS水平。结果发现,PAM细胞经www.selleck.cn/products/cx-5461联合霉菌毒素处理24 h后,相较于C组线粒体ROS的水平显著升高(P<0.05)。与M相比,同时添加霉菌毒素和异绿原酸A组的线粒体ROS水平显著降低约40%(P<0.05)。综上,异绿原酸A能够有效缓解由联合霉菌毒素诱导线粒体ROS升高。(2)通过q PCR和WB检测线粒体动力学相关蛋白Drp1、Opa1、Fis1、Mfn1以及Mfn2的m RNA和蛋白表达情况。结果表明,与C组相比PAM细胞经联合霉菌毒素处理24 h后,细胞内线粒体融合蛋白Opa1、Mfn1和Mfn2的m RNA和蛋白表达量均降低(P<0.05或0.01);线粒体分裂蛋白Drp1和Fis1的m RNA表达量升高(P<0.05或0.01)。ICCA+M组相较于M组PAM细胞融合蛋白的m RNA水平均升高(P<0.05或0.01);分裂蛋白的m RNA和蛋白表达情况极显著降低(P<0.01)。表明异绿原酸A能够有效改善由联合霉菌毒素诱导的线粒体动力学失衡。试验三:异绿原酸A致联合霉菌毒素对PAM细胞RLR通路的影响试验设分组同试验二。(1)将64μg/m L的异绿原酸A与联合霉菌毒素(0.94μg/m L AFB1、0.185μg/m L DON、1.255μg/m L OTA)共同处理PAM细胞24 h后,检测RIG-I、MAVS、IRF3、NF-κB的基因和蛋白表达情况。结果表明,联合霉菌毒素感染能够使PAM细胞RIG-I、MAVS、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著升高(P<0.05或0.01),使IRF3的m RNA和蛋白表selleck Telaglenastat达极显著降低(P<0.01)。经异绿原酸A处理后,细胞中RIG-I、MAVS、NF-κB的基因和蛋白表达显著降低(P<0.05或0.01),IRF3的基因和蛋白表达有所恢复(P<0.01)。(2)然后我们利用q PCR法和ELISA对细胞内的RLR通路下游的细胞因子进行检测。结果发现,联合霉菌毒素感染后细胞内IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α的m RNA和蛋白表达升高(P<0.05或0.01),IFN-α蛋白水平极显著降低(P<0.01)。与M组相比,ICCA+M组显著降低了细胞内促炎细胞因子的m RNA和蛋白表达水平,升高了IFN-α的m RNA和蛋白表达量。表明异绿原酸A能够改善由联合霉菌毒素诱导的炎症反应以及调节机体免疫功能。结论:(1)64μg/m L的绿原酸、异绿原酸A、新绿原酸均能够拮抗联合霉菌毒素诱导的细胞毒性、ROS升高以及GPX4表达降低,后续试验选取64μg/m L的异绿原酸A进行。(2)霉菌毒素联合暴露能导致PAM细胞线粒体ROS水平升高,使线粒体动力学失衡。64μg/m L的异绿原酸A能够改善联合霉菌毒素诱导的线粒体损伤,减少线粒体ROS释放,平衡线粒体分裂融合蛋白的表达。(3)异绿原酸A能够有效改善由联合霉菌毒素诱导的RLR通路激活,降低RIG-I、MAVS、IRF3、NF-κB以及下游细胞因子的表达,升高IRF3及IFN-α的表达。表明异绿原酸A能够抑制霉菌毒素诱导的炎症反应,提高机体免疫功能。综上异绿原酸A有望用于临床上霉菌毒素的防控。

目的 调查抑郁障碍住院患者的治疗情况，探究首发与复发抑郁药物治疗情况有何不同。方法 通过京津冀精神卫生数据平台对2018年1月至2019年12月在河北省精神卫生中心住院治疗的抑郁障碍患者治疗相关数据进行回顾性分析，描述首发与复发抑郁患者一般资料情况，治疗情况及相关药物使用情况。结果 1492例患者中，首发抑郁与复发抑郁在伴有躯体疾病、住院天数、抗精神病药、抗焦虑药、抗抑郁药数量方面比较，差异有统计学意义(P<0.05)。两组在抗抑郁药联合抗焦虑睡眠药比较差异有统计学意义(P<0.05);联合抗精神病药比较差异均有统计学意义(P<0.01);2种抗抑郁药基础上再使用抗精神病药比较差异均有统计学意义(P<0.01);而在联合使用心selleck HPLC境稳定剂方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。在抗抑郁药分类使用上，首发抑Surgical Wound Infection郁选用SSRIs类药明显高于复发抑郁；复发抑郁在使用SNRIs类、NASCanagliflozin NMRSA类上要高于首发抑郁。结论 复发抑郁与首发抑郁相比，复发抑郁伴躯体疾病的比率更高，住院天数更长；在抗抑郁治疗方面复发抑郁联合使用抗焦虑失眠药、抗精神病药更突出，联合用药几率更高。临床医生需关注复发抑郁在治疗中联合用药躯体健康、药物不良反应发生的风险，增加非药物治疗、全病程药物监测及用药指导。

多囊卵巢综合征(PCOS)是女性一种常见Medical Robotics的异质性、复杂性和多基因性疾病，其临床特征为高雄激素血症、胰岛素抵抗、肥胖和稀发/无排卵等。PCOS病因及发病机制尚未阐明，主要涉及遗传、环境、精神及心理因素等。目前，越来越多的研究表明，遗传因素在PCOS发生发展中占据重要作用。单核苷酸多态性(SNP)是由单个碱基的转换、颠PR-171体内实验剂量换、插入或缺失引起的单个核苷酸变异形成的脱氧核糖核酸序列多态性。因此，研究PCOS的易感性基因对未来阐明该病的病因和发病机制具有重要意义。本文综述近年来基因多态性与PCOS发生发展关系的最新研究成果，主要从雄激素的生物合成、结合和转化，胰岛素抵抗，脂代谢和炎症等相关易感基因位点上的SNPGalunisertib说明书,如rs743572、rs35785886、rs2414096、rs2059807、rs9939609、rs361525、rs2275913等进行论述，以期为PCOS的病因、病理机制研究及精准防治提供新思路。

豆科模式植物百脉根能和丛枝菌根真菌及根瘤菌形成共生。在低磷条件下,丛枝菌根真菌在植物根皮层细胞形成丛枝结构来与植物进行营养交换。丛枝菌为植物提供磷等营养元素,作为回报丛枝菌能够获得植物光合作用固定的碳。另一方面,百脉根能与根瘤菌共生,形成根瘤这一特殊器官,根瘤中含有大量的类菌体,类菌体内的固氮酶能够将空气中的氮气转变成植物可利用的氨,植物同样能为根瘤菌提供碳源。因此,研究豆科植物与丛枝菌、根瘤菌共生关系的建立和维持,对于增加作物产量,降低化肥施用具有重要意义。在菌根共生中,丛枝结构的动态发育过程受到宿主植物细胞的严格调控。菌根诱导表达几十种激酶(AM-induced kinases,AMKs),但目前这些激酶的功能未知。菌根共生必需基因KIN3编码SPARK类型的类受体激酶,本研究解析KIN3的互作蛋白胞质类受体激酶AMK8及其同源蛋白AMK24在菌根共生中调控丛枝发育的功能。通过分析AMK8和AMK24的菌根共生表型、表达模式及验证蛋白互作,获得的主要研究结果如下:(1)菌根共生表型分析:利用LORE1a转座子插入单突变体amk8-1、amk8-2、amk24-1、amk24-2以及双突变体kin3-1/amk8-3,分析其菌根共生表型。amk8和amk24单突变体相较野生型Gifu B-129丛枝菌定植率显著降低,表明AMK8和AMK24为菌根共生所必需。与野生型相比,kin3-1/amk8-3的菌根定植率和共生基因表达都显著降低,与亲本单突变体kin3-1菌根共生表型一致,表明KIN3与AMK8可能在同一条通路上调控菌根共生,KIN3相较AMK8可能具有遗传上位效应。在单突变体kMLN4924说明书in3-1中分别过表达AMK8或AMK24,其菌根定植率和共生相关基因表达与单突变体kin3-1一致,表明过表达AMK8或AMK24不能恢复单更多突变体kin3-1的菌根共生表型。(2)表达模式分析:通过构建AMK8或AMK24启动子驱动GUS报告基因,瞬时转化百脉根,在转基因根中观察到AMK8或AMK24在tibio-talar offset含丛枝的细胞和不同发育阶段的根瘤中均有表达。通过在烟草中过表达,观察到AMK8和AMK24定位在细胞膜上。通过分析AMK24在菌根中的亚细胞定位,观察到AMK24-YFP定位在围丛枝膜上。(3)验证KIN3与AMK8、AMK24互作:酵母双杂实验和双分子荧光互补实验显示KIN3与AMK8、AMK24间存在蛋白互作。同时,AMK8和AMK24能形成异源二聚体。综上所述,百脉根胞质类受体激酶AMK8和AMK24为菌根共生所必需,可能与KIN3在同一条通路上通过形成受体复合物,将胞外信号传递到胞内,调控丛枝发育。

目的：探讨血清血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)和Kruppel样因子4(Kruppel-like factor behavioral immune system4,KLF-4)水平与冠状动脉斑块易损性的关系。方法：选取2020年9月至2022年12月，在我院进行冠状动脉造影术及光学相干断层成像检查并符合筛选条件的冠心病患者119例，根据影像学结果将患者分为易损斑块组60例和稳定斑块组59例。收集患者临床资料，采用酶联免疫吸附法检测血清HO-1和KLF-4水平变化并进行分析。结果：两组患者年龄、吸烟史比例、糖尿病史、LDL-C及FBG比较，差异有统计学意义（P <点击此处0.05）。易损斑块组患者血清HO-1水平和KLF-4水平显著高于稳定斑块组（P <0.05）。Pearson相关性分析结果显示HO-1、KLF-4水平与巨噬细胞浸润、脂质核心角度及纤维帽厚薄程度均密切相关（P <0.05）。经多因素Logistic回归分析，年龄、LDL-C、血清HO-1和KLF-4水平升高是影响冠状动脉易损斑块发生的危险因素（P <0.05）。ROC曲线分析显示，血清HO-1、KLF-4水平预测冠状动脉易损斑块的曲线下面积（AUC）分别为0.848(0.717～0.978)、0.763(0.601～0.924)。结论：血清HO-1SAG和KLF-4水平与冠状动脉易损斑块密切相关，对冠心病患者存在冠状动脉易损斑块具有一定的预测价值。

目的 探究枸橼酸坦度螺酮联合草酸艾司西酞普兰治疗抑郁症伴焦虑的疗效观察。方法 选取某院2021年2月～点击此处2023年1月纳入的78例抑郁症伴焦虑患者，按照随机数字法分为对照组（n=39）和观察组（n=39），其中对照组采用米氮平治疗Real-Time PCR Thermal Cyclers，观察组采用枸橼酸坦度螺酮联合草酸艾司西酞普兰治疗。评估两组患者的临床疗效、抑郁症状评分、焦虑症状评分、睡眠质量及生活质量。结果 观察组的总有效率及简易生活质量评价量表（SF-36）中各个项目评分均高于对照组（P <0.05）；两组患者治疗前、治疗后4周、治疗后8周抑郁症状评分、焦虑症状评分、睡眠状态评分均呈下降趋势，观察组治疗后4周和治疗后8周的抑郁症状评分、焦虑症状评分、睡眠状态评分均明显低于对照组（P <0.05）。结论 抑郁症伴焦虑患者采用枸橼酸坦度螺酮联合草酸艾司西酞普兰治疗效果显著，可有效改善患者的抑郁症状、睡眠状态及焦虑症状，提升Ferrostatin-1患者的生活质量。

背景:长期生活在平原地区的人在上升到海拔2500米以上的环境后,随着海拔高度增加,氧气分压随之降低,机体因不能适应低氧环境而产生高原肺水肿、高原脑水肿等一系列急性高原病。高原习服是指人在进入高原后,机体各种组织器官会发生一系列的适应性变化,以降低低氧环境对机体器官带来的危害。有效提高机体高原习服能力,对预防和治疗急性高原病具有重要意义。近年来,许多研究表明,氧化应激和炎症作用被认为是导致高原肺、脑水肿的两个主要途径。通过适应性运动的方式可以提高机体的抗氧化能力,进而促进高原习服。NMN具有抗氧化、减少氧化应激、改善疲劳状态、提高机体骨骼肌的氧利用能力等作用,在提升高原习服能力方面受到广泛关注。目的:本实验通过6周的运动干预、NMN干预、运动联合NMN干预,探讨有氧运动、NMN干预或两者联合干预对急进高原状态大鼠肺水肿和脑水肿的预防作用。方法:将50只雄性6周龄SD大鼠随机分为5组:空白对照组、低氧对照组、低氧运动组、低氧NMN组、低氧运动+NMN组。空白对照组大鼠在常压环境下饲养6周。低氧对照组大鼠在常压环境下饲养6周后进行连续48h的低氧暴露。低氧运动组大鼠连续6周进行跑台运动干预后进行连续48h的低氧暴露。低氧NMN组大鼠连续6周进行NMN营养干预后进行连续48h的低氧暴露。低氧运动+NMN组连续6周既跑台运动又NMN营养干预后进行连续48h的低氧暴露。低氧处理结束后,麻醉处死各组大鼠,即刻取出各组大鼠的肺、脑组织。采用HE染色法制备肺、脑组织病理切片,干湿比重法检测肺、脑组织含水量,TBA法测定MDA水平、WST-1法测定SOD水平、钼酸铵法测定CAT水平,Elisa方法检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平。数据以“平均值±标准差”表示,采用双因素方差分析以及独立样本T检验进行数据分析,以P<0.05表示具有统计学显著性差异,P<0.01表示具有极显著性差异。Peri-prosthetic infection结果:1.运动和NMN对大鼠肺、脑部干湿比的影响与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺、脑部干湿比显著升高(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动、补充NMN,运动联合补充NMN均能起到降低肺、脑部干湿比的作用(PElexacaftor<0.05、P<0.01)。运动联合NMN的干预方法对降低大鼠肺、脑组织干湿比的效果更优。2.运动和NMN对大鼠肺、脑部形态学变化的影响肺部组织HE观察发现,空白对照组肺组织结构正常,肺泡壁结构完整且壁薄,无明显病理改变。与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺泡毛细血管扩张充血,肺泡壁增厚。与低氧对照组相比,低氧运动组、低氧NMN组、低氧运动+NMN组可观察到肺组织水肿程度减轻,毛细血管充血减轻,肺泡壁变薄。脑部组织HE观察发现,空白对照selleckchem MLN8237组脑组织结构正常,脑组织细胞排列整齐,无明显病理改变。与空白对照组相比,低氧对照组大鼠脑组织细胞界限混乱,排列稀疏。与低氧对照组相比,低氧运动组、低氧NMN组、低氧运动+NMN组脑组织细胞界限较为清晰,排列较为整齐。3.运动和NMN对大鼠肺、脑部氧化应激指标的影响与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺、脑组织MDA水平显著升高(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动、补充NMN、运动联合补充NMN可以显著降低大鼠肺、脑组织中MDA水平(P<0.05、P<0.01)。运动联合补充NMN组的MDA水平显著低于单一运动组和单一NMN组(P<0.05)。与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺、脑组织SOD水平显著降低(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动、补充NMN、运动联合补充NMN大鼠肺、脑组织中SOD活性显著升高(P<0.05、P<0.01)。运动联合补充NMN组的SOD活性显著高于单一运动组和单一NMN组(P<0.05)。与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺、脑组织CAT活性显著降低(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动、补充NMN、运动联合补充NMN大鼠肺、脑组织中CAT活性显著升高(P<0.05、P<0.01)。运动联合补充NMN大鼠肺、脑组织中的CAT活性显著高于单一运动组和单一NMN组(P<0.05)。4.运动和NMN对大鼠肺、脑部炎性指标的影响与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺、脑组织IL-1β的水平显著升高(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动组、运动联合补充NMN组大鼠肺、脑组织IL-1β水平显著降低(P<0.05、P<0.01)。运动联合补充NMN对于降低大鼠肺、脑组织IL-1β水平的效果好于单一运动干预(P<0.05)。与空白对照组相比,低氧对照组大鼠肺、脑组织IL-6水平显著升高(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动组、运动联合补充NMN组大鼠肺、脑组织IL-6水平显著降低(P<0.05、P<0.01)。运动联合NMN对于降低大鼠肺、脑组织IL-6的效果好于单一运动干预(P<0.05)。与空白对照组相比,低氧对照组肺、脑组织TNF-α水平显著升高(P<0.001)。与低氧对照组相比,运动组、运动联合补充NMN组大鼠肺、脑组织TNF-α水平显著降低(P<0.05、P<0.01)。运动联合NMN对于降低大鼠肺、脑组织TNF-α的效果优于单一运动干预(P<0.05)。结论:(1)高原低氧条件可以增加大鼠肺、脑组织干湿比,诱发肺、脑组织发生高原肺、脑水肿的病理改变。提示,成功建立大鼠低氧损伤模型。(2)研究表明,六周运动、补充NMN、运动联合补充NMN具有改善大鼠肺、脑水肿的作用,进而提升促高原习服的能力。且运动联合补充NMN优于单一运动及单一补充NMN。(3)运动、补充NMN、运动联合补充NMN提升大鼠促高原习服能力的机制可能是通过抑制低氧诱发的氧化应激和炎症反应等实现。

目的 探讨双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为递送载体对阿霉素(doxorubicin, DOX)血-脑脊液屏障(blood brain barrier, BBB)渗透率的影响selleck HPLC，为脑部药物递送提供新的策略。方法 利用前期构建的双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为载体包载DOX(DOX@RVGPR9-SSL)。培养脑毛细血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells, BMVEC),在体外构建BBB模型，通过4h渗漏实验、跨膜电阻值(transmembrane resistance value, TEER)测量、扫描透射电镜(scanning transmissiopolymorphism geneticn electron microscope, SEM)观察细胞间的紧密连接等，鉴定体外BBB模型构建是否成功。在BBB模Compound C型构建成功后，利用荧光共振能量转移(fluorescence a resonance energy transfer, FRET),通过激光共聚焦显微镜，考察RVGPR9-SSL体跨越BBB后的完整性。通过对比分析脂质体给药前后，BBB的形态以及TEER值，考察RVGPR9-SSL跨越BBB后对BBB完整性的影响。通过荧光分光光度计，考察DOX@RVGPR9-SSL的BBB渗透率。结果 RVGPR9-SSL的包封率为97.25%。构建的BBB模型的TEER值均>200Ω·cm~2,并通过SEM观察到BMVEC细胞排列紧密，存在着明显的紧密连接，说明体外BBB模型成功建立，可用于考察BBB渗透率。DOX@RVGPR9-SSL4h累积BBB渗透率>10%,显著高于游离DOX的4h累积BBB渗透率。给药后BBB与DOX@RVGPR9-SSL均能保持较好的完整性。结论 RVGPR9-SSL可以显著提高所包载的DOX的BBB渗透率，并且具有较好的安全性，是非常有前景的脑部药物递送载体。

东北红豆杉是珍贵的濒危药用植物,具有丰富的内生真菌资源。随着致病菌的不断增多,开发新的微生物源的农药已经势在必行。并且随着研究不断的深入,发现植物内生真菌可以抑制病原菌和降低植物病害的严重程度。因此本研究第一篇以东北红豆杉根部为材料,以从根部分离出的真菌为研究对象,采用拮抗活性实验筛选出根部抗菌菌株;并且对根部抗菌菌株分泌的抗真菌代谢产物进行提取、纯化和鉴定,并对抗菌代谢产物作用机理进行研究。其主要研究内容和结论如下:1、以东北红豆杉根部为样本,经过消毒后在PDA培养基上进行分离纯化,共分离出409株根部真菌。通过形态学观察和分子鉴定确定菌株种属,主要为:拟盾壳霉属(Paraconiothyrium sp.)、曲霉属(Aspergillus sp.)、链格孢属(Alternaria sp.)、镰孢属(Fusarium sp.)、肉座菌属(Hypocrea sp.)、微壳色单隔孢属(Microdiplodia sp.)、拟茎点霉属(Phomopsis sp.)、土赤壳属(Ilyonectria sp.)、篮状菌属(Talaromyces sp.)和间座壳属(Diaporthe sp)。并发现土赤壳属、拟盾壳霉属和曲霉属是东北红豆杉根部真菌的优势种群。2、对分离获得的根部真菌进行拮抗活性检测,发现有3株真菌具有明显拮抗活性,其中根部菌株R3拮抗活性最强。并且对抗菌菌株的抗真菌的活性成分进行提取纯化和核磁鉴定,确定抗菌菌株的抗真菌活性成分为环匹阿尼酸(cyclopyazonic acid,CPA)。以CPA含量和生物量为指标,对抗病菌株菌株的培养条件进行单因素优化,最佳培养基含有马铃薯粉、3%的乳糖和1%的硫酸铵;最佳培养条件为:培养时间6 d,培养温度28℃,p H 6.0。同时,我们也对抗病菌株的培养条件进行响应面优化,最佳培养条件为培养时间6 d,培养温度28℃,p H 6.4。3、对活性成分的抑菌机理进行了研究,发现CPA具有抑制病原菌作用,对葡萄球菌、灰葡萄球菌、尖孢镰刀菌、交流镰刀菌和立枯丝核菌的抑制率均在50%以上,立枯丝核菌的抑菌效果最好。并且通过显微观察,发现CPA抑制立枯丝核菌菌丝生长并影响其分生孢子的产生。我们也测定电解率和丙二醛含量,发现CPA具有较强的抗真菌活性,增加立枯丝核菌菌丝体电解质泄漏和提高立枯丝核菌细胞膜的脂质过氧化。因此,CPA不仅抑制病原菌菌丝生长和分生孢子的产生,而且也通过破坏病原菌的细胞膜来共同抑制病原菌的生长。本研究第一篇对东北红豆杉根部真菌进行分离、纯化和拮抗活性筛选,获得优良根部抗病真菌可为进一步开发利用根部抗病真菌奠定基础,并对根部抗病真菌的抗菌活性成分进行提取、纯化和鉴定,同时研究了抑菌活性成分的作用机理,为后续微生物E-616452体内实验剂量源农药的开发奠定了理论基础。同时,发现东北红豆杉生长缓慢且紫杉醇含量极低,不能满足庞大的医疗市场。随着研究的深入,发现有些真菌能促进和改善植物的生长发育,并能够促进植物中某些代谢产物的积累。本研究第二篇以东北红豆杉根际土壤分离获得的真菌为研究对象,采用选择性培养基筛选根际促生真菌;并且将根际促生真菌应用在东北红豆杉幼苗上,测定了东北红豆杉生长指标;并系统研究对生理指标(抗氧化酶活性)和紫杉烷类代谢产物(紫杉醇、巴卡亭III、三尖杉宁碱、10-去乙酰基紫杉醇)含量影响,以及通过转录组测序来探究其对紫杉醇的生物合成途径影响。其主要研究内容和结论如下:4、以东北红豆杉根际土壤为样本,采用稀释涂布平板法在PDA培养基上进行分离纯化,共分离出649株根际土壤真菌。通过形态学观察和分子鉴定确定菌株种属,主要为:肉座菌属(Hypocrea sp.),土赤壳属(Ilyonectria sp.),曲霉属(Aspergillus sp.),镰孢属(Fusarium sp.),链格孢属(Alternaria sp.),拟茎点霉属(Phomopsis sp.),共头霉属(Syncephalastrum sp.),毛霉属(Actinomucor sp.),丛赤壳属(Nectria sp.),篮状菌属(Talaromyces sp.),间座壳属(Diaporthe sp.),刺盘孢属(Colletotrichum sp.),拟鬼伞属(Coprinopsis sp.)。并发现肉座菌属、曲霉属、拟茎点霉属和共头霉属是东北红豆杉根际土壤真菌的优势种群。5、对分离获得的根际土壤真菌进行体外促生筛选,发现有10株根际土壤真菌具有固氮潜力;有8株根际土壤真菌具有溶磷潜力;有6株根际土壤真菌可以分泌吲哚-3-乙酸;有12株根际土壤真菌分泌蛋白酶。研究发现有6株根际土壤真菌同时具有多种体外促生活性,其中根际土壤真菌GS16分泌吲哚-3-乙酸能力最强,同时具有固氮和溶磷的潜力。以三年生的东北红豆杉幼苗为实验材料,对根际土壤促生真菌进行体内促生活性的研究。研究发现,1×10~5cfu/m L GS16处理的东北红豆杉幼苗比对照组在株高和根长都有显著提高。与对照相比,1×10~5cfu/m L GS16处理的东北红豆杉幼苗侧根数量显著增加。这些结果都说明根际土壤真菌GS16促进幼苗的生长发育。因此,根际土壤真菌GS16不仅具有体外促生活性,同时具有体内促生活性。6、为探究根际土壤促生真菌处理对东北红豆杉生理层面的影响,因而对其处理东北红豆杉幼苗中抗氧化酶(包括POD、SOD和CAT)活性进行检测。研究发现,1×10~5cfu/m L GS16和吲哚-3-乙酸(IAA)处理的东北红豆杉幼苗中抗氧化酶活性随着处理时间增加呈现先上升后下降的趋势;并且1×10~5cfu/m L GS16处理抗氧化酶活性不仅高于其它GS16菌悬液处理抗氧化酶活性,也几乎都高于IAA处理抗氧化酶活性。同时,研究结果表明在1×10~5cfu/m L GS16处理东北红豆杉中抗氧化酶活性最高值主要集中出现在35 d。总体上,根际土壤促生真菌增加东北红豆杉幼苗中抗氧化酶的活性,为东北红豆杉的资源的高效利用提供重要指导意义。7、为探究根际土壤促生真菌对东北红豆杉中目标活性成分积累量的影响,因而对其处理东北红豆杉幼苗中紫杉烷成分含量进行检测。研究发现,1×10~5cfu/m L GS16和IAA处理的biogenic amine东北红豆杉幼苗中紫杉烷类成分积累量呈现先增加后降低趋势;并且1×10~5cfu/m L GS16处理紫杉烷类成分积累量不仅高于其IAA处理紫杉烷类成分积累量,也高于其它GS16菌悬液处理紫杉烷类成分积累量。同时,研究发现在1×10~5cfu/m L GS16处理东北红豆杉中紫杉烷类成分积累量最高值主要集中在35 d时。8、为探究根际土壤促生真菌促进东北红豆杉中紫杉烷类积累对紫杉醇生物合成途径基因的影响,因而进行转录组测序。通过差异基因表达分析,发现1×10~5cfu/m L GS16和IAA处理东北红豆杉中大部分注释差异表达基因分布在代谢过程和细胞过程。同时,研究结果表明IAA处理东北红豆杉差异表达基因GO分类富集途径与1×10~5cfu/m L GS16处理东北红豆杉差异表达基因途径GO分类富集途径很相似,分析主要原因根际土壤促生真菌GS16能够自身分泌IAA与外源施加IAA很可能通过相似途径来调控东北红豆杉中次生代谢产物的积累。通过对根际土壤促生真菌处理的东北红豆杉的紫杉醇的合成途径的分析,研究发现合成途径中有多个关键酶基因显著变化。其中包括参与将紫杉醇的前体化合物3′-N-debenzoyl-2′-deoxytaxol转化为3′-N-benzoyl-2′-deoxytaxol的关键步骤3′-N-去苯甲酰基-2′-去氧紫杉醇N-苯甲酰转移酶显著上调,以及催化紫杉醇前体化合物10-脱乙酰基-10-羟基巴卡桑二烯酮(10-DAB III)转化为紫杉醇的前体化合物7-乙酰氧基-10-羟基巴卡桑二烯酮(10-DAB IIABT-263临床试验)的细胞色素P450酶CYP720B23显著上调和参与紫杉醇合成途径中主要参与关键中间体的转化与合成的细胞色素P450酶CYP750C28显著上调。本研究第二篇对东北红豆杉根际土壤真菌进行分离、纯化和促生活性筛选,获得优良根际土壤促生真菌可为进一步开发利用根际土壤促生真菌奠定基础,并对根际土壤促生真菌进行体内促生实验,同时研究其对东北红豆杉的目标代谢产物含量、生理指标、次生代谢通路的关键基因/酶的影响,为后续东北红豆杉的定向增量培育、紫杉醇的生物合成途径及代谢调控机制的解析和东北红豆杉资源的高效利用提供重要数据参考和理论依据。

目的 分析抑郁症使用甘麦大枣汤联合艾司西酞普兰治疗的效果。方法 选取本Vorinostat采购院于2022年4月～2023年2月收治的86例被确诊为抑郁症的患者作为研究对象，根据随机数字表法分为两组，每组43例患者，对照组采用艾司西酞普兰治疗，观察组在对照组的基础上加以甘麦大枣汤。比较两组患者的临床效果、治疗前后患者心理状态、神经递质水平、睡眠质量、认知功能、日常生活能力、自主神经功能。正态计量资料采用t检验，计数资料采用x~2检验。结果 治疗后组间相比，观察组总有效率95.35%，显著高于对照组的79.07%，且观察组汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分显Medial proximal tibial angle著低于对照组（P<0.05）。观察组多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺均显著高于对照组（P<0.05）。观察组认知功能、日常生活能力评分显著均高于对照组，睡眠质量低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组皮肤交感反应（SWnt-C59使用方法SR）起始波潜伏期较对照组显著更短，波幅较对照组显著更大（P<0.05）。结论 患有抑郁症的患者使用甘麦大枣汤、艾司西酞普兰联合治疗后，临床效果提高，能有效改善患者的心理状态和临床生理指标，改善其睡眠质量、认知功能以及日常生活能力。