Achr receptor

<正>患者男，46岁。无明显诱因颈部疼痛伴左上肢麻木乏力1月余，后四肢均出现麻木乏力，遂入我院。患者入院前于当地医院行颈椎MRI检查，发现C4椎体及附件、C3-5硬脊膜、右颈部肌肉异常强化，考虑转移性病变。体格检查发现，患者右颈部肿大淋巴结，大小约2.0cm×1.5cm，质硬，无明显压痛；四肢肌力减低，左上肢约0级，右上肢约3级，双下肢约4级，四肢感觉存在。颈椎MRI平扫+增强显示：C4椎体及附件骨质破坏（图1,2);C2-6水平椎管内、外（沿神经袖向nerve biopsy两侧椎管外）及右侧椎旁软组织内占位（图3,4），呈等T_1等T_2信号，边界不清，局部肌间隙消失，脊髓受压，增强后明显强化（图5）。后行病灶切除术，术中见灰白色肿瘤组织突入C2-3左侧椎间隙，局部侵入骨质，血运中等，呈片状、肉芽状沿硬膜外间隙生长，伸入双侧椎板外下方及脊髓腹侧。组织病理HE染色（×100）见嗜酸细胞、组织细胞、NSC 119875体外中性粒细胞和小淋巴细胞，并见散在大细胞（图6）。免疫组化：CD1α（+）、S100（+）、CD68（+）、CD30 (+),CK、CD3、CD20、PAX5、CD21、ALK、CD15、EMA均为阴性，Ki67约40%阳性，原位杂Compound C细胞培养交EBER阴性。最终病理诊断为朗格汉斯细胞组织细胞增生症。

【目的】探明miR-7与CTSK基因相互作用关系及其对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响，为贵州黑山羊优良品种保藏、选育与开发利用提供依据。【方法】采用在线数据库筛选miR-7与CTSK基因3＇UTR的结合靶点，通过将CTSK基因3＇UTR插入双荧光素酶报告系统中进Immunodeficiency B cell development行互作位点检测；采用CCK-8和划痕试验检测miR-7是否靶向调控CTSK基因影响贵州黑山羊卵巢颗粒细胞的增殖和迁移；过表达miR-7后采用RT-qPCR检测NSC 125973分子式其对促增殖蛋白PCNA、抗凋亡蛋白BCL2和促凋亡相关蛋白BAX、caspase-3、caspase-9表达水平的影响。【结果】成功构建CTSK基因3＇-UTR 2个预测靶点的野生型和突变型双荧光素酶报告载体；双荧光素酶试验结果表明CTSK基因3＇UTR区的2个预测靶位点均受miR-7调控；CCK-8和细胞划痕结果表明：转染miR-7试验组的卵巢颗粒细胞增殖和迁移能力均显著高于对照(NC)组；RT-qPCR结果表明：上调miR-7能极显著上调PCNA和BCL2的表达，抑制BAX、caspase-3和caspase-9的表达。【结论】miR-7可以靶向结合CTSK的3＇UTR区2个靶位点并极显著抑制CTSK基因的表达；过表达miR-7可以显著促进贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖和迁移能力，并促进增殖标志基因、抗凋亡基因的表达和抑制促凋亡相关基因的表达。寻找更多研究结果可为进一步研究miR-7靶向调控CTSK表达影响贵州黑山羊繁殖性能的分子机制提供理论依据。

花粉管在雌蕊组织内的正常生长是保证被子植物有性繁殖成功的重要环节,是提高植物授粉和受精效率以及提高作物产量的基础。尽管花粉管的生长对授粉的完成很重要,但人们对花粉管在雌蕊组织中生长的调控机制仍知之甚少。在本研究中,我们通过细胞生物学、分子生物学及遗传学等方法研究了拟南芥(Arabidopsis thaliana)花粉及花粉管特异表达的SKU5-Similar(SKS)家族的SKS13基因参与调控花粉管在引导组织内生长的功能,主要结果如下:在拟南芥SKS家族的19个基因中,SKS13在花粉中的表达量最高且较为特异,其突变体的雌配子传递效率无明显异常,而雄配子体传递效率明显降低,表明了SKS13参与维持雄配Regorafenib配制子体的功能。分析发现,sks13突变体花粉的活力、外形及花粉的体外萌发率与野生型相比均没有明显差异,但是花粉管在体外生长初期的长度明显短于野生型,且花粉管在体外培养时更容易破裂。进一步研究发现sks13突变体的花粉管更容易破裂可能是由于其顶端细胞壁中的果胶积累变少,纤维素含量增多引起的。sks13突变体的花粉管在雌蕊组织中生长变慢,造成了其雄配子体传递GDC-0973生产商效率降低,角果变短,种子数目变少。预测SKS13蛋白的氨基端含有一个信号肽。为了研究SKS13的亚细胞定位,我们构建了两种亚细胞定位载体,即GFP序列分别融合在信号肽序列末端(GFP-SKS13)及SKS13羧基端(SKS13-GFP),分别转入sks13-1突变体中。结果显示sks13-1突变体中表达GFP-SKS13时SKS13定位于花粉管内部,而表达SKS13-GFP时则定位于花粉管的细胞质和顶端的细胞壁区域。但是只有转入SKS13-GFP时能恢复突变体的育性,因此,SKS13的正确定位为花粉管的细胞质和顶端的细胞壁。利用转录组学分析sks13突变体与野生型花粉在基因表达方面的差异,结果显示sks13突变体花粉中多个与JA的合成、代谢及信号转导相关的基因表达明显下调,且sks13-1突变体花粉中JA的含量降低。外源抑制剂处理会抑制野生型花粉管中JA的生物合成,使花粉管长度变短并影响果胶在花粉管壁的分布,这与sks13突变体的表型相似。表明SKS13促进JA的medical financial hardship合成,并且通过介导JA的生物合成调节花粉管细胞壁的成分。JINGUBANG(JGB)是一种含有WD-40结构域的蛋白。以前的研究表明JGB通过抑制JA的生物合成来抑制花粉萌发,并维持花粉管在引导组织中的生长。我们的研究发现jgb sks13双突变体花粉的体外萌发率、花粉管细胞壁中果胶与纤维素的分布与jgb突变体更为相近,表明JGB与SKS13分别调控花粉管中JA的水平,JGB抑制而SKS13促进JA的生物合成。在SKS家族中,SKS14在花粉中的表达水平仅次于SKS13,但sks14突变体的雌雄配子体传递效率均没有明显异常,花粉管在引导组织中的生长速度与野生型相比也无明显差异。而sks13 sks14双突变体在引导组织中的生长却明显慢于sks13突变体,这表明SKS13与SKS14调控花粉管在引导组织中的生长时存在功能冗余。以上结果共同表明,SKS13促进JA的生物合成,调节花粉管细胞壁的成分,参与授粉过程中花粉管在引导组织中的生长。

开花植物的有性生殖是亲代通过减数分裂产生雌配子体和雄配子体,二者相互结合形成受精卵,进而逐步发育成一个新个体的生殖方式。这些过程包括配子体的发育、花粉管伸长、双受精和胚胎发育等重要过程,每个环节都受到一系列基因的精准调控。花粉是雄性生殖细胞,花粉壁形成网状结构,是最复杂的植物细胞壁。细胞壁生物合成需要的物质和调控因子通过膜泡运输分泌到质膜和细胞壁。真核细胞的膜泡运输过程主要包括运输囊泡的出芽、定向移动、拴留、锚定和膜融合等步骤。膜泡运输过程依赖多种调控因子的协同作用来完成,如衣被蛋白(coat)、拴留蛋白(tether)、SM蛋白和SNARE(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factoselleckr attachment protein receptor)蛋白等,这些因子大多是高度保守的。其中,SNARE因子在运输囊泡的锚定和膜融合过程中发挥至关重要的作用。拟南芥cis-Golgi定位的Qa-SNARE是AtSYP3家族,包括AtSYP31和AtSYP32,可能调控内质网Pexidartinib使用方法向高尔基体的顺向运输。据报道,AtSYP31和AtSYP32共同调控雄配子发育且部分功能冗余。为了深入探讨AtSYP32在植物生殖发育过程中的功能,本研究以拟南芥atsyp32突变体、AtSYP32 RNAi、AtSYP31和AtSYP32共同RNPolymer-biopolymer interactionsAi(AtSYP31/32 RNAi)和AtSYP32过表达株系(AtSYP32 OE)为实验材料,利用发育生物学、分子生物学、细胞生物学和生物化学等手段,进行了深入研究。研究结果如下:1.AtSYP32缺失突变体纯合致死。atsyp32+/-突变体、AtSYP32 RNAi、AtSYP31/32 RNAi和AtSYP32 OE株系幼苗的根长、植物体的株高和育性等与野生型比较发生显著变化,而atsyp32-2互补株系的表型完全恢复,说明AtSYP32调节植物营养发育和生殖发育。2.atsyp32+/-突变体、AtSYP32 RNAi和AtSYP31/32RNAi株系的花粉活性降低。体外萌发实验显示,atsyp32+/-突变体部分花粉和花粉管发生爆裂;体内萌发实验显示,部分花粉粒在柱头不能发生水合作用,很多花粉管不能伸长,一些萌发的花粉管不能径直生长,导致很多胚珠无花粉管伸入实现双受精。扫描电镜观察发现部分花粉粒萎缩、花粉壁不完整。透射电镜观察发现,atsyp32+/-、AtSYP32 RNAi和AtSYP31/32 RNAi株系部分花粉粒不能形成完整的花粉壁,花粉内壁厚度变薄、外壁排列异常,而且花粉粒之间、花粉粒与残留的绒毡层之间有粘连。AtSYP31/32 RNAi株系的表型更严重。然而,atsyp31突变体植株和花粉粒没有出现上述表型。这些现象说明AtSYP32调控花粉壁结构完整性和花粉管伸长,而AtSYP31增强AtSYP32的功能。3.atsyp32+/-突变体、AtSYP32RNAi和AtSYP31/32 RNAi株系的部分花粉粒内部的细胞结构异常,内质网膨大、胞质中滞留大量不同类型的运输囊泡。这些现象暗示AtSYP32在小孢子发育过程中调控膜泡运输。而AtSYP31/32 RNAi株系表型更加严重,大量花粉粒内部无细胞结构,还有一部分出现质壁分离,这种现象说明AtSYP31增强AtSYP32对花粉发育的调控功能。4.通过化学染色和免疫荧光检测发现,atsyp32+/-突变体的花粉壁组分如胼胝质、花粉管细胞壁组分如果胶、半乳糖醛酸聚糖、去脂化半乳糖醛酸聚糖和木葡聚糖等的分布和含量发生显著变化。这些现象暗示AtSYP32调控这些物质的极性运输和分泌。5.调控花粉管细胞壁完整性的RALF4/19-LRX-AUN1和RALF4/19-ANX/BUPS-MARIS通路,以及细胞壁生物合成相关的膜泡运输途径中的重要基因的表达水平发生显著变化,暗示AtSYP32通过调控细胞壁生物合成物质和调控蛋白的分泌来调控花粉壁发育和花粉管细胞壁的完整性。6.酵母双杂交、荧光素酶互补实验和BiFC实验证明,AtSYP32与木葡聚糖合成酶XXT5互作,可能促进木葡聚糖在高尔基体的合成和分泌过程;与花粉管细胞壁内受体蛋白LRX11和信号肽RALF19相互作用,可能促进这些调控因子的分泌效率。同时,AtSYP32与调控雄配子发育的SNARE蛋白BET12和AtSEC22、调控绒毡层发育的COPII衣被蛋白SEC31B相互作用,协同调控内质网到高尔基体的顺行运输,从而调控花粉壁发育和花粉管细胞壁完整性。综上所述,AtSYP32通过调控膜泡运输来调节花粉壁发育和花粉管细胞壁完整性,在植物生殖发育过程中发挥至关重要的作用。

目的 探究谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、叉头框蛋白P2(FOXP2)在乳腺癌组织中的表达及其预后价值。方法 选取2018年3月至2020年6月期间秦皇岛市第一医院收治的108例乳腺癌患者作为研究对象，收集术中切除的乳腺癌组织及癌旁组织标本，同时收集整理其临床资料。采用免疫组织化学法检测GPX4、FOXP2蛋白表达；采用Kaplan-Meier法分析乳腺癌组织中GPX4、FOXP2表达与患者预后的关系；LogisICI 46474采购tic回归分析乳腺癌患者预后的影响因素。结果 与癌旁组织相比，乳腺癌组织中GPX4阳性表达率较高，FOXP2阳性表达率较低（P<0.05）。肿瘤直径≥3 cm、分化程度较低、TNM分期较晚、发生淋巴结转移的乳腺癌患者GPX4阳性表达、FOXP2阴性表达比例高于肿瘤直径<3 cm、分化程度较高、TNM分期较早、未发生淋巴结转移的患者（P<0.05）。乳腺癌组织GPX4阳性表达、FOXPAMG510供应商2阴性表达的乳腺癌患者2年生存率低于乳腺癌组织GPX4阴性表达、FOXP2阳性表达的患者（P<0.05）。Logreactor microbiotaistic分析结果显示TNM分期、分化程度以及乳腺癌组织中GPX4、FOXP2表达情况均是乳腺癌患者预后的影响因素（P<0.05）。结论 乳腺癌组织中GPX4呈高表达，FOXP2呈低表达，二者均是乳腺癌患者预后的影响因素。

目的 亚洲多发性骨髓瘤（MM）患者使用免疫调节药物致静脉血栓事件流行病学与欧美人群有着显著差异，是否需要及给予何种血栓预防方案仍存在争议。本研究旨在研究中国MM患者使用免疫调节药物致静脉血栓事件的发生率和危险因素，以期为临床制定血栓预防方案提供参考。方法 收集2017年1月至2019年2月在我院接受免疫调节药物（沙利度胺或来那度胺）治疗的多发性骨髓瘤患者的临床资料，包括基本人口学特征、基线实验室检查结果、合并用药和是否出现静脉血栓栓塞症（VTE）并进行统计分析，评估VTE事件发生率并探讨VTE事件相关危险因素。结果 185例MM患者被纳入研究，其中5例患者出现VTE事件（发生率2.70%），包括肺栓塞1例和下肢静脉血栓4例。经Logistic回归分析基本人口学特征、基线实验室检查结果、合并用药等多项指标，未发现免疫调节药物致静脉血栓selleckchem PD0325901事件的危险因素。通过肿瘤患者VTE风险评估模型对患者进行血栓风险分层，136例高风险状态患者根据指南推荐应予以低分子肝素或华法林抗凝，实际预防性应用低分子肝素及华法林的患者分别为5例及10例，单独使用阿司匹林预防血栓的患者高达159例。出现VTE事件的5例患者均为VTE高风险状态，其中1例未予任何Liraglutide细胞培养预防措施，其余4例皆使用阿司匹林单药预防，均未按指南推荐合理给予预防用药，提示MM患者普遍存在血栓预防措施不足。高风险状态患者按pathological biomarkers指南推荐预防用药的VTE发生率为0，仅予阿司匹林的发生率为3.4%，未予任何预防用药的发生率高达33.3%。结论 本研究验证了亚洲MM患者VTE事件的发生率显著低于欧美国家，但VTE事件为免疫调节药物最常见的不良反应之一，可影响患者预后，仍应给予血栓预防以足够的重视。有必要积累更多数据来建立中国MM患者VTE事件风险评估模型，为制定针对中国患者的VTE预防指南提供参考。

目的:采用网状meta分析评价不同手术方式对小体积前列腺增生术后尿流率的影响。方法:通过以下数据库检索小体积前列腺增生术后尿流率的随机对照研究和病例对照研究：Pubmed、Embase、Cochrane library、Web of science、中国知网、维普、万方、中国生物医学文献数据库等，检索时间为建库至2022年12月；由2名研究人员分别检索、筛选文献，单独评价纳入研究的文献质量并提取文献数据，符合纳入标准的文献通过R4.2Tofacitinib分子式.2统计软件进行网状meta分析。结果:共纳入19项研究，1 460例患者，涉及6种手术方式，包括经尿道前列腺电切术(transurethral resection of the prostate, TURP)、经尿道前列腺切开术(transurethral incision of the prostate, TUIP)、经尿道钬激光前列腺剜除术(holmium laser enucleation of the prostate, HoLEP)、经尿道钬激光前列腺切开术(holmium laser transurethral incision of the prostate, HoLIP)、经尿道前列腺电切术联合经尿道膀胱颈切开术(transurethral resection of the prostate combined with transurethral incision of tMolecular Biologyhe bladder neck, TURP+TUIBN)、经尿道铥激光汽化术联合经尿道膀胱颈切开术(thulium laser resection of the prostate combined with transurethral incision of the bladder neck, TmLRP+TUIBN)。网状meta分析结果显示：术后3个月最大尿流率(maximum flow rate, Q_(max))排序为：HoLEP>TmLRP+TUIBN>TURP+TUIBN>TURP>HoLIP>TUIP,术后6个月Q_(max)排序为：HoLEP>TURP+TUIBNLapatinib抑制剂>TmLRP+TUIBN>TURP>HoLIP>TUIP,膀胱颈预防性切开及前列腺剜除可以改善术后尿流率。结论:6种手术方式治疗小体积前列腺增生各有优势，HoLEP、TmLRP+TUIBN、TURP+TUIBN在改善术后尿流率方面优于TURP,可以作为小体积前列腺增生优先选择的手术方式。

目的 观察人工肝治疗肝衰竭患者时低分子肝素(LMWH)应用的抗凝效果及安全性。方法 选取2021年6月至2022年6月在解放军总医院第五医学中心行双重血浆分子吸附系统(DPMAS)联合血浆置换(PE)治疗的肝衰竭患者Cadmium phytoremediation81例。根据治疗过程中LMWH抗凝效果分为抗凝良好组、抗凝不足组及抗凝过量组，比较不同的LMWH剂量组抗凝效果良好的比例、以及三组患者的基线水平。结果 81例患者中，男性65例，平均年龄54.55岁，HBV感染41例，共进行DPMAS联合PE治疗161例次，均顺利完成。其中抗凝良好组131例次，抗凝不足组9例次，抗凝过量组21例次。三组患者的性别、年龄、治疗前TBil、Alb等差异均无统计学意义(P值分别为0.712、0.658、0.079和0.057)。当PTA>30%、PLT>40×10~9/L时，LMWH抗凝效果良好比例>83%;抗凝不足组患者HB和PLT水平显著高于抗凝良好组(均P<0.01);与抗凝良好组相比，抗凝过量组患者的PTA、HB明显降低，INR值升高(P<0.01、<0.01和0.027)。治疗结束24 h内，18例次患者出现中心静脉置管处渗血，3例次出现牙龈出血，均未发生消化道出血等其他严重并发症。结论 DPMAS+PE治疗时应依据治疗前PTLY2835219体内A和PRAD001配制LT水平，给予不同剂量LMWH,同时应考虑HB对抗凝效果影响。

目的:胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤。其恶性程度高,复发率高,生存期短。目Dinaciclib分子量前发病机制仍未完全阐明,治疗措施仍匮乏。miR-491-5p是GBM的调控因子,过表达可抑制胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞的增殖。铁死亡与神经元退化、抗病毒免疫反应和缺血-再灌注损伤等多种生理和病理过程有关,并参与了肿瘤的进展过程。本研究旨在明确miR-491-5p调控铁死亡影响GBM的功能和具体机制。方法:利用公开获得的铁死亡相关基因组图谱来LY2835219化学结构筛选GBM中上调的基因及其靶基因。采用Spearman相关系数分析肿瘤蛋白p53基因(TP53)与miR-491-5p之间的相关性。检测GBM中miR-491-5p和TP53的表达情况,测定TP53编码因子p53和p21的蛋白丰度。评估miR-491-5TBI biomarkerp和TP53对GBM的增殖、迁移和侵袭的影响。使用铁死亡诱导剂(Erastin)干预GBM细胞和GBM皮下成瘤小鼠,评估GBM的肿瘤形成功能和铁死亡的变化。结果:功能研究中,我们发现TP53在GBM中显著升高,且与miR-491-5p呈负相关。miR-491-5p可促进GBM细胞的增殖、迁移和侵袭,并干扰p53/p21通路。TP53逆转了miR-491-5p的促GBM肿瘤形成作用。机制研究中,我们发现GBM细胞和体内GBM肿瘤组织中出明显的ROS和铁积累。Erastin可促进TP53的表达,抑制TP53可逆转Erastin诱导的生理表型。此外,miR-491-5p还能降低受损线粒体数量,降低ROS、总Fe和Fe~(2+)含量。TP53破坏了miR-491-5p抑制铁死亡的功能。结论:miR-491-5p在GBM中具有功能多样性,miR-491-5p通过靶向抑制TP53,阻断p53/p21通路降低GBM对铁死亡的敏感性。

【目的】水稻穗顶端退化严重影响产量，鉴定与克隆水稻穗顶端退化相关基因，可以丰富水稻穗发育调控的分子机理，为水稻高产分子设计育种提供理论基础和基因资源。【方法】从粳稻品种武运粳30号EMS突变体库筛选到一份稳定遗传的穗顶端退化突变体panicle apical abortion 21(paa21)。对退化一次枝梗比例、每穗退化粒数占比、每穗粒数、株高、穗长、单株产量等农艺性状进行统计。使用台盼蓝和伊文思蓝染色检测顶端小穗是否发生程序性细胞死亡。测定WT和paa21不同发育时期幼穗和不同穗部位的H_2O_2含量。paa21分别与籼稻II-32B、9311正反交进行遗传分析。利用paa21与籼稻II-32B杂交构建的F_2群体进行基因定位和克隆。使用SWISS-MODEL网站预测野生型和突变体蛋白的三维结构。利用RT-qPCR分析ROS响应标志基因、程序性细胞死亡相关基因、过氧化氢酶相关基因的表达量。【结果】paa21突变体发生严重的穗顶端退化，统计paa21所有一次枝梗退化情况，发现退化小穗主要位于顶端的一次枝梗上。与WT相比，paa21的株高、每hepatic cirrhosis穗粒数、穗长和单株产量均降低。通过观察不同发育时期的幼穗，发现在paa21突变体幼穗发育至12 cm时，可见穗顶端退化表型。台盼蓝和伊文思蓝染色结果表明突变体顶端小穗发生程序性细胞死亡。在退化的paa21顶端小穗中观察到更强烈的DAB染色；H_2O_2含量测定结果表明，与WT相比，paa21穗中积累更高水平的ROS。遗传分析表明paa21突变表型受一对隐性核基因控制Alisertib价格。图位克隆结果发现paa21中Os02g0673100第二外显子发生一个C到T的突变，导致丙氨酸突变为缬氨酸。该基因编码一个铝激活的苹果酸转运蛋白ALMT7。突变位点位于第4个跨膜螺旋上。SWISS-MODEL预测结果表明，该突变位点并未对突变体蛋白三维结构造成明显影响。RT-qPCR结果表明，在幼穗发育至10 cm时，paa21中ROS响应标志基因Os01g0826400、Os05g0474800和Os02g0181300，程序性细胞死亡相关基因VPE2和VPE3，过氧化氢酶编码基因CATA、Compound 3体内实验剂量CATB、CATC的表达量较WT大幅升高。此外，paa21 10 cm幼穗中过氧化氢酶（CAT）的活性较WT明显下降。【结论】paa21幼穗在发育后期顶端小穗中积累过量的ROS，产生程序性细胞死亡，最终导致顶端小穗发生退化。