Achr receptor

化橘红因具有止咳化痰等功效而备受消费者推崇。化州柚(Citrus grandis‘Tomentosa’)是道地药材化橘红的基原植物。由于栽培技术滞后,导致产量低,是制约化橘红产业高质selleck产品量发展的重要因素。研究操作简便、高效安全的化州柚保果技术,是解决产业问题的重要措施。本研究针对化州柚产业低的问题,筛选优化化州柚保花保果外源植物生长调节物质及其施用方法,系统评价化州柚保果处理后的安全性,以及对果实品质的影响,并联合转录组学分析,初步探究植物生长调节物质诱导化州柚果实功能成分变化的分子机制,主要研究结果如下:1.在化州柚谢花约75%时进行第一次保果处理,15 d后进行第二次保果处理,各处理均能提高化州柚的坐果率。对比分析不同浓度的油菜素甾醇(BR)、赤霉素(GA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)保花保果效果:其中以10 mg/L 2,4-D保果效果最好,坐果率达到14.28%,是对照的5.19倍;20 mg/L GA处理后坐果率为7.27%,0.05 mg/L BR坐果率12.05%,均显著高CCRG 81045体内实验剂量于对照。2.采用LC-MS/MS检测10 mg/L2,4-D保果处理后的残留情况,至果实采收期,果实上未检出含有2,4-D成分,表明10 mg/L2,4-D保果处理不影响果品安全性。3.采用2,4-D保果处理后,对化州柚果实主要功能成分含量产生一定影响。至果实正Brazillian biodiversity常收获期,化州柚果实中柚皮苷含量显著上升13.62%,野漆树苷含量显著下降54.76%,佛手苷内酯含量显著下降了44.07%,异欧前胡素含量显著下降18.09%;总挥发性成分上升15.42%,D-柠檬烯、β-月桂烯、γ-萜品烯等几个挥发性成分分别显著上升78.13%,48.46%,45.54%,产品整体符合《中国药典》规定的柚皮苷含量不少于3.5%要求。4.联合转录组学分析,表明2,4-D保果处理改变了柚皮苷合成通路上关键酶基因Cg PAL、Cg4CL、Cg7Glc T、Cg12Rha T表达,这可能是导致相关功能成分变化的原因,还后续需要进一步验证。

倒立摆稳摆控制原理应用的实际工程需求牵引，使倒立摆成为检验各类控制算法的理想替代实验研究平台。本文将倒立摆摆杆的姿态稳定控制和抑噪抗扰作为研究内容，以理论分析、编程实现、仿真实验和实物实验验证作为研究手段，聚焦控制器设计的优化，先引入模糊控制对PID参数调节进行优化，改固定参数调节为在线参数调节，旨在提高系统鲁棒性与Dorsomorphin临床试验抑扰性；再运用遗传算法的量化因子和比例因子完成调节参数的在线寻优，通过设计适应度函数和选择算子，经过选择、交叉、变异不断演化迭代，最终获取最佳适应度个体、找到最优解，通过仿真验证遗传模糊PID算法突出的抑噪抗扰优势；最后基于该控制策略下购买NSC 125973进行倒立摆实物实验，验证其指令Infectious causes of cancer跟踪有效性结论。论文研究表明，遗传模糊PID算法具有良好的指令跟踪和抑噪抗扰性能，具有一定的工程应用价值。

目的:探讨贝伐珠单抗GW-572016研究购买联合mFOLFOX或FOLFIRI方案作为一线治疗，进展后相互转换为二线治疗在转移性结直肠癌治疗中的真实疗效对比。方法:选取我院于2017年01月至2021年06月收治的101例晚期结直肠癌患者，采取贝伐珠单抗联合mFOLFOX或FOLFIRI方案作为一线治疗，进展后相互转换为二线治疗，观察临床疗效及不良反应情况。结果:贝伐珠单抗先联合mFOLFOX后FOLFIRI组(以下称先mFOLFOX组/pre mFOLFOX)的一线ORR(objective response rate)为44.2%,DCR(disease control rate)为86.5%;二线ORR为24%,DCR为60%。贝伐更多珠单抗先联合FOLFIRI后mFOLFOX组(以下称先FOLFIRI组/pre FOLFIRI)的一线ORR为42.9%,DCR为81.6%;二线ORR为29.2%,DCR为62.5%。两组间的一/二线ORR及DCR差异均未达统计学意义。Kaplan-Meier分析显示先mFOLFOX6组与先FOLFIRI组的中位PFS(progression-free survival)-1(一线PFS)、中位PFS-2(二线PFS)及OS均Sediment microbiome未达统计学差异(P>0.05)。COX多因素分析结果显示两组在肿瘤原发部位(左、右半结肠)、BRAF基因状态的OS差异有统计学意义(P=0.017;P=0.021)。两组中血液学、非血液学和贝伐珠单抗相关不良事件的发生率分别为29%,24%和11%。两组中不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P=0.53)。结论:贝伐珠单抗联合化疗治疗晚期转移性结直肠癌，一线为联合mFOLFOX或FOLFIRI,进展后相互转化为二线，患者临床获益均明显，二组无显著差异，且不良反应可控，并且BRAF基因野生型、左半结肠癌的患者OS更长，获益更明显。

本试验旨在探究幼猫饲粮中添加复合免疫增强成分对幼猫生长指标、血常规指标和免疫功能的影响。选取2PLX5622临床试验4只4-6月龄的英短蓝猫幼猫，随机分为3组：对照组（饲喂基础饲粮）、低浓度组（饲喂基础饲粮+0.30%黄芪+0.10%牛初乳粉+0.025%壳寡糖+0.025%β-葡聚糖）和高浓度组（饲喂基础饲粮+0.60%黄芪+0.20%牛初乳粉+0.05In Vivo Testing Services%壳寡糖+0.05%β-葡聚糖）复合免疫增强成分。每组8个重复，每个重复1只猫。预饲期为7d，正试期为14d。结果表明：与对照组相比，（1）饲粮中添加复合免疫增强selleck合成成分对幼猫的采食量、粪便评分和试验后体重均无显著差异（P>0.05）;(2)复合免疫增强成分对幼猫的血常规各指标均无显著影响（P>0.05），证明能保持机体健康；（3）与试验前相比，试验后高浓度组复合免疫增强成分可显著提高幼猫血清的Ig M水平（P<0.05），而对Ig A和Ig G水平无显著影响（P>0.05）。综上所述，饲粮中添加高浓度的复合免疫增强成分能够帮助幼猫增强机体免疫力，呵护健康成长。

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤,对女性健康构成极大威胁。现代医学已经发展出多种有效的治疗手段,如手术、放疗、化疗以及生物治疗等。阿霉素(Adriamycin,简称为ADR,又被称作多柔比星Doxorubicin,简写为Dox)是乳腺癌治疗中常用的化疗药物之一,但耐药性的出现显著限制了其临床应用。因此,深入了解乳腺癌的耐药机制,寻找新的治疗靶点,提高乳腺癌的治疗效果具有重要的临床价值。本研究采用药理工具药和基因干预技术,以耐阿霉素的MCF-7/ADR细胞为模型,系统地研究了FABP5在乳腺癌对阿霉素耐药中的作用及机制,为改善乳腺癌的治疗提供新的治疗靶点和策略。第一部分MCF-7/ADR细胞耐药属性鉴定目的:收集MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞,观察两种细胞的差异,并对MCF-7/ADR细胞的耐药属性进行鉴定。方法:1.细胞耐药属性鉴定:采用光学及电子显微镜观察MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞(简称ADR细胞)的形态,分别用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK8)检测Dox对两种细胞的抑制率,结果用半抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值来表示,采用计算法求出MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药指数。运用Western Blot(WB)技术检测两种细胞耐药相关蛋白、多药耐药相关蛋白(Multi-drug resistant associate protein,MRP1)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-GP)的表达水平,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内药物的积累量。2.ADR细胞和MCF-7细胞的糖脂水平差异:运用透射电子显微镜观NSC125066供应商察细胞的超细微结构,分别采用糖原周期性酸-希夫(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)染色法和油红O染色法观察两种细胞的糖原含量及脂滴情况。结果:1.ADR细胞确为耐药细胞:MCF-7和ADR细胞存在形态差异。MCF-7细胞呈椭圆形,形状均匀;ADR细胞呈多边形,大小不一。Dox对MCF-7细胞及ADR细胞作用的IC_(50)分别是4.5μM和213.2μM,ADR细胞的耐药指数为47.4。WB结果显示,相较于MCF-7细胞,ADR细胞MRP1和P-GP呈高水平表达(P<0.05)。同时显微镜观察到,给予相同剂量5μM的Dox 24 h,相较于MCF-7细胞,ADR细胞内药物积累较少(P<0.05)。2.ADR细胞和MCF-7细胞的糖脂水平差异:透射电子显微镜观察发现,MCF-7细胞存在大量糖原,ADR细胞内含量甚微。PAS法染色进一步证实MCF-7细胞存在大量糖原,而油红O染色法发现ADR细胞内存在大量脂滴。小结:1.ADR细胞确实是MCF-7细胞的耐阿霉素细胞株。2.MCF-7细胞和ADR细胞存在糖脂差异。第二部分ADR细胞的耐药机制初步分析目的:比较MCF-7及ADR细胞FABP5、钙/钙调蛋白依赖激酶II(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase typeⅡ,Ca MKII)、活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)和细胞内钙离子浓度的差异,为其机制分析打下基础。方法:1.MCF-7细胞和ADR细胞FABP家族的表达差异:运用q RT-PCR技术和生物信息学技术,分析MCF-7细胞和ADR细胞FABPs和Ca MKIIs的表达,筛选出表达差异大的目标m RNA分子进行WB实验。通过免疫组化技术检测耐药乳腺癌患者和敏感乳腺癌患者的组织中FABP5和p-Ca MKII的表达情况。2.MCF-7细胞和ADR细胞脂质过氧化的差异:运用流式细胞术检测给予铁抑素-1(Ferrostatin-1,Fer-1)前后细胞内ROS水平、细胞内钙离子浓度、线粒体膜电位及脂质过氧化水平的变化情况。WB实验检测细胞间的谷胱甘肽过氧化酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)的蛋白表达情况。3.细胞内钙浓度对ADR细胞存活力的影响:运用CCK-8技术,检测BAPTA-AM和Dox联合应用对ADR细胞的存活率,并和给药前相比较。结果:1.q RT-PCR和基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库的结果显示,与MCF-7细胞相比,ADR细胞的FABP5和Ca MKII高表达,且均具有显著性差异(P<0.05)。WB实验进一步证实FABP5和Ca MKII在ADR细胞中高表达(P<0.05)。临床乳腺癌患者的组织样本免疫组化结果显示,和敏感患者相比,耐药患者FABP5和p-Ca MKII的表达显著增加。2.流式细胞术的结果显示,与MCF-7细胞相比,ADR细胞ROS及细胞内钙离子浓度较高(P<0.05)。JC-1染色结果显示,两种细胞的红色荧光没有显著性差异,ADR细胞绿色荧光弱于MCF-7细胞,即ADR细胞的线粒体膜电位高于MCF-7细胞。WB实验结果显示,与MCF-7细胞相比,ADR细胞内的GPX4表达较少(P<0.05)。给予Fer-1后,ADR细胞的ROS含量、线粒体膜电位及细胞膜脂质过氧化均没有显著性差异,即铁死亡不影响ADR细胞的线粒体膜电位,且与ADR细胞的耐药无关。3.CCK-8结果显示,相较于单独给予Dox,BAPTA-AM和Dox联合应用后,ADR细胞的存活率降低,ADR细胞对阿霉素的耐药性降低(P<0.05)。小结:ADR细胞内的FABP5、Ca MKII、ROS和细胞内钙离子浓度均高于MCF-7细胞,提示其可能与耐药性存在联系。第三部分FABP5调节ADR细胞耐阿霉素的作用机制目的:采用si RNA技术敲低ADR细胞的FABP5表达,探讨其与阿霉素耐药性的关系和其可能的作medical philosophy用机制。方法:1.FABP5低表达后细胞的改变:采用si RNA技术敲低ADR细胞的FABP5表达,通过q RT-PCR和WB技术验证si FBAP5的敲低效果,运用CCK-8技术检测ADR细胞的IC_(50)值,采用克隆形成实验观察细胞增殖和耐药情况,采用流式细胞术检测细胞内钙离子浓度和ROS的变化,通过WB技术检测PPARγ、p-Ca MKII、LC3Ⅱ/Ⅰ和P62等蛋白的变化。采用同样的方法,观察SBFI-26Compound C分子量(FABP5的抑制剂)对ADR细胞的影响。2.Dox与不同蛋白的结合力分析:运用分子对接技术,对P-GP和FABP5和Dox的结合力进行分析。结果:1.q RT-PCR和WB结果显示,与si NC相比,siFABP5确实降低了FABP5的表达。FABP5被抑制后,ADR细胞的药物敏感性急剧上升,IC_(50)值从304.5μM下降到187.3μM。菌落形成实验显示,与单独使用Dox相比,抑制FABP5表达和Dox组,ADR细胞的集落形成能力大幅降低。另外,siFABP5后,细胞中钙的积累明显减少。与si NC组相比,siFABP5会使PPARγ、p-Ca MKII的表达急剧下降,用SBFI-26也观察到类似的结果。与si NC相比,siFABP5减少了LC3II/Ⅰ,但P62没有差异。与单独使用Dox相比,SBFI-26和Dox的联合应用增加了LC3II/Ⅰ和P62。另外,流式结果发现,与对照组相比,siFABP5并没有减少ROS的水平,但是,SBFI-26组却有不同的结果。2.分子对接结果显示,Dox与FABP5(对接分数从-6.00到-8.78千卡/摩尔)的结合能量大于与P-GP(对接分数从-1.47到-3.01千卡/摩尔)。小结:1.siFABP5可以降低ADR细胞对Dox的耐药性,这一作用可能和其减少PPARγ、p-Ca MKII的表达,减少自噬有关。2.FABP5和Dox的结合力比P-GP的结合力更强。结论:FABP5可以调节ADR细胞对Dox的耐药性,这一作用可能和其减少PPARγ和p-Ca MKII的表达、减少自噬及细胞内钙蓄积有关。该研究结果为临床乳腺癌的预防和治疗策略提供了新的治疗靶点。

目的 探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与血小板/淋巴细胞比值(PLR)在自身免疫性脑炎(AE)患者中的临床意义。方法 选取扬州大学附属苏北人民医院2015年1月至2021年10月收治的AE患者SGLT抑制剂53例作为病例组，另选取来该院体检的健康者60例作为对照组。比较病例组和对照组的一般临床资料及2组受试者外周血细胞计数、NLR、PLR,分析NLR、PLR在AE患者中的意义。根据改良Rankin评分量表(mRS),分析NLR与病例组患者预后mRS评分有无相关性。结果 病例组NLR、中性粒Eastern Mediterranean细胞、白细胞计数高于对照组，而淋巴细胞、血小板水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05),而病例组和对照组的PLR比较，差异无统计学意义(P>0.05)。预后良好组(mRS≤1分，n=26)与预后不良组(mRS≥2分，n=8)的NLR比较，差异无统计学意义(P>0.05),病例组的NLR与预后mRS评分无相关性(相PD-0332991 NMR关系数=-0.067,P=0.708)。结论 NLR与AE密切相关，对AE有一定的诊断意义。

旨在探究山西老陈醋通过JAK2/STAT3通路减轻高脂饮食诱导大鼠肝损伤的作用机制。使用高脂乳剂灌胃大鼠5周，构建高脂血症模型；同时低、中、高剂量（按体质量计1.35、2.7、5.4 g/kg）山西老陈醋灌胃大鼠10周。血清学检测血清中总Laduviglusib溶解度胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GRx）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALTmedia literacy intervention）、碱性磷酸酶（ALK-P）水平；HE染色检测肝脏病理学变化；q-PCR和WB检测肝脏中JAK2、STAT3m RNA和蛋白水平表达；免疫组化技术定位分析。结果显示，不同剂量山西老陈醋均能够极显著降低脂质含量和肝损伤程度，提高抗氧化酶活性，极显著抑制JAK2、STAT3m RNA和蛋白含量（P<0.01）；其中高剂量组TC、TG降低20.50%、48.65%，高、中剂量组对AST(32.79%、29.07%)、ALT(21.65%、20.67%)、ALK-P(19.42%、19.71%)效JQ1小鼠果最好；与低剂量组相比，高中剂量组JAK2(57.07%、34.02%)、STAT3(55.19%、41.45%)m RNA和JAK2(27.89%、24.09%)、STAT3(33.06%、26.64%)蛋白含量（极）显著降低（P<0.05,P<0.01）。综上，山西老陈醋减轻高脂饮食诱导大鼠的肝损伤的作用，可能是通过抑制JAK2/STAT3通路的活化来实现。

目的 探讨电压依赖性阴离子选择性通道蛋白1(VDAC1)参与屋尘螨（HDM）诱导的哮喘气道炎症的作用及调控气道上皮细胞铁死亡的机制。方法 人气道上皮细胞（HBE）体外培养，由HDM诱导HBE细胞进行体外实验，浓度梯度刺激24 h，分为正常对照组；200 U刺激组；400U刺激组；800U刺激组。随后使用VDAC1抑制剂VBIT-4干预，分为HBE正常对照组、VBIT-4组（10μmol/L,24 h）、HDM(800 U/mL,24 h)组、HDM(800 U/mL,24 h)+VBIT-4(10μmol/L,24 h)组，测定VDAC1以及铁死亡标志物蛋白的表达水平。使用BALB/c小鼠给予HDM构建哮喘小鼠模型，分为正常对照组、VBIT-4滴鼻组、HDM滴鼻组、HDM+VBIT-4滴鼻组，测定气Immune dysfunction道炎症水平与铁死亡蛋白的表达水平。结果 Ceralasertib通过使用HDM诱导的HBE细胞后，MtROS生成增多，线粒体膜电位下降，免疫印迹试验结果显示VDAC1(P=0.005)表达上调，铁死亡标记物标志物GPX4(P=0.015)表达水平显著降低，FTH1(P=0.030)水平则出现上调；而使用VBIT-4会显著抑制因HDM诱导的FTH1(P=0.037)的表达，并且恢复了GPX4(P=0.029)表达；在HDM诱导的哮喘小鼠模型中，H&E染色和肺泡灌洗细胞计数显示，相较于HDM组，HDM+VBIT-4组的气道炎症细胞浸润减少，炎症细selleckchem Staurosporine胞数量显著减少（P=0.0002）；瑞氏-姬萨姆染色也表明VBIT-4减少了肺泡灌洗液中嗜酸粒细胞的数量（P=0.001）免疫组织化学染色显示气道上皮细胞GPX4表达在VBIT-4干预下上调。结论 VDAC1参与HDM诱导的支气管哮喘的慢性气道炎症，可能通过引起铁死亡实现的。

为揭示喷硒对燕麦硒积累的影响，并评价筛选喷硒后燕麦产量和品质综合性状优良燕麦品种，以24份燕麦品种为材料，设置3个喷施浓度（亚硒酸钠用量为0、80、160g/hm~2），抽穗期进行叶面喷硒。结果表明，燕麦成熟期叶片硒含量随喷硒浓度提高增幅最大，其次为籽粒。喷硒降低24份燕麦籽粒硒含量变异水平。喷硒下，籽粒硒含量差异最大，根硒含量差异最小。叶面喷施80g/hm~2的亚硒酸钠时，籽粒硒含量最高的品种可达0.30mg/kg；喷寻找更多施160gLiraglutide试剂/hm~2亚硒酸钠时，24份燕麦品种籽粒硒含量均超多数文献提到的食物或可食材料硒限量标准（0.300mg/kg）。喷硒也会影响籽粒蛋白质、脂肪和β-葡聚糖含量的变异程度。在叶面喷施80g/hm~2亚硒酸钠时，燕麦产量与未喷硒均无显著差异；燕麦籽粒硒含量与脂肪、β-葡聚糖含量存在显著正相关，相关系数分别为0.63和0.42;GYT双标图基于产量，兼顾硒、蛋白质、脂肪和β-葡聚糖含量，24份燕麦品种综合值排名前5位的依次为品燕1Surgical lung biopsy号、Banner、OA1576-4、白燕10号和品燕2号。

大环内酯类抗生素是一类广谱抗生素,作为有效的蛋白质合成抑制剂在传染性疾病、呼吸道疾病、消化道疾病等治疗中具有显著的治疗应用。PikC是人类发现的第一个天然酮内酯苦霉素的生物合成途径中的唯一一个P450酶,通过酶工程和底物工程已经极大地扩展了 PikC的底物宽泛性和产物多样性,但据我们所知,迄今为止没有任何PikC突变体能够直接氧化YC-17和narbomycin的前体化合物10-deoxymethonolide和narbonolide。为了实现对这两种没有任何锚定基团的大环内酯骨架的氧化修饰并拓展获得结构多样性大环内酯类化合物的方法,我们进行了如下实验:1.非天然底物活性酶PikCH238pAcF的构建与活性分析首先,我们通过结合PikC已有的晶体结构信息以及非天然底物分子的结构特征,利用基于非天然氨基酸的遗MLN4924作用传密码子扩展技术对PikC进行了半理性改造。结果显示作为唯一一个同时对两种非天然底物均具有催化活性的突变体(PikCH238pAcF)分别对10-deoxymethonolide和narbonolide具有17.9%和24.7%的底物转化率。另外,与野生型相比该突变体对天然底物YC-17和narbomycin的底物转化率分别提高了 0.9和0.7倍,并且还改变了对YC-17羟基化反应的区域选择性。更重要的是,由于引入H238pAcF突变所展现的非天然活性无法在同一位点被任何蛋白质源性氨基酸所再现。这种突变体不仅实现了对没有任何锚定基团的大环内酯骨架的氧化修饰,也是对结构更加苛刻的底物中惰性C-H键激活的一次挑战。2.PikCH238pAcF的晶体学和机理分析为了深入理解突变体的非天然活性和区域选择性等催化特性的结构基础,我们分别对PikCH238pAcF的多种晶体结构和分子对接实验结果进行了分析。分析结果表明,由于pAcF的引入,PikC通过pAcF介导的氢键和保守的疏水相互作用来稳定底物的催化构象。另外,由于pAcF的引入打破了 YC-17的两个羟化位点与活性中心距离的平衡,从而改变了对YC-17催化的区域选择性。3.专一性苷元羟化酶的工程化改造在PikC多种晶体结构以及前期单点突变结果的指导下,我们通过对PikC进行多位点组合突变获得了对1 0-deoxymethynolide和narbonolide的专一性羟化酶PikCH238pAcF/E85Q/E94Q。另外,在此过程中我们意外获得了对10-deoxymethynolide和narbonolide羟基化活性分别提升了 0.4和0.5倍的突变体 PikCH238pAcF/E85Q。4.非天然大环内酯类化合物的人工酶级联反应的建立通过对P450酶促反应条件进行优化,突变体PikCH238pAcF/E85Q对两种非天然底物的底物转化率分别提升到75.%(10-deoxymethynolide)和78.0%(narbonolide)。另外,将突变体与UDP依赖的糖基转移酶BSGT-1相结合,在体外建立了非天然大环内酯类化合物人工酶级联反应,并通过级联反应获得了天然途径无法获得的糖基化产物。非天然大环内酯类化合物人工酶级联反应的建立为丰富大环内酯类化合物的结构多样性和筛选具有潜在治疗活性的抗生素提供了更多的选择。综上所述,本研究对一种微生物天然产物生物合成P450酶进行了非天然氨基酸介导的半理性突变。基于PikC的多种结构信息和两种非天然底物的结构特征,我们通过构建一种非天然氨基酸介导的底物结合策略,实现了对没有任何锚定基团的大环内酯骨架的氧化催化。另外,通过利用这种非天然底物活性酶(PikCH238pAcFTrichostatin A化学结构)在体外构建非天然大环内酯类化合物人工酶级联反应获得了一系列天然途径无法获得的大环内酯类化合物,并逆转了苦霉素生物合成途径中糖基化-氧化的顺序。基于非天然Isotope biosignature氨基酸定点突变的P450酶工程策略以及从酶-底物复合物的详细结构分析中获得的机制性认识可以应用于未来更多的糖基化-氧化偶联系统的构建。此外,还可以通过外源饲喂或原位生物合成非天然氨基酸在体内实现此类生物合成途径的改造。在结构多样的非天然氨基酸的帮助下,预期可对更多的酶反应或级联反应进行功能拓展,以设计和生产更多的天然产物衍生物用于新药研发。