地高辛是一种从毛地黄中提取到的强心苷类药物,因其治疗窗口较窄,时常发生地高辛中毒、死亡的相关案事件。目前,在法庭科学领域关于地高辛中毒检验的研究大都是针对地高辛原体,鲜有同时针对地高辛及其代谢物的报道。因此,建立生物样品中地高辛及其代谢物的检测方法,研究地高辛及其代谢物的毒物代谢动力学对相关中毒案件检验和死伤原因认定具有重要意义。本文立足公安实际需要,建立了血液、尿液和肝脏中地高辛及其代谢物地高辛双洋地黄毒糖苷、地高辛单洋地黄毒糖苷和二氢地高辛的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检验方法,并采用该方法研究了比格犬体内的地高辛毒物代谢动力学规律。主要研究内容和结果如下:1.概述了地高辛的药理和毒理作用机制,吸收及代谢过程,对国内外地高辛及其代谢物的前处理方法和检测方法进行了综述。2.建立了地高辛及其代谢物的UPLC-MS/MS检测方法。采用ACQUITY UPLC~?BEH C_(18)(2.1×100 mm,1.7μm)柱,流动相A:0.01%甲酸-水(含2 mmol/L甲酸铵),B:乙腈,进行梯度洗脱,在电喷雾电离(ESI,正离子模式)下,采用多反应监测模式对目标物进行检测。地高辛及其代谢物在0.2～100 ng/m L的浓度范围内线性关系良好(R~2>0.9940),检出限(LOD)为0.1 ng/m L,定量限(LOQ)为0.2 ng/m L,日内精密度RSD小于7.65%,日间精密度RSD小于9.21%。3.通过考察和优化前处理方法,建立了血液、尿液和肝脏中地高辛及其代谢物的UPLC-MS/MS分析方法。采用固相支撑液液萃取(SLE)法,地高辛及其代谢物的回收率60.5～92.5%,基质效应80.7～113.6%,日内和日间精密度RSD分别在1.5～10.2%和2.1～12.1%的范围内。血液和尿液中地高辛及其代谢物的检出限0.1～0.2 CCRG 81045分子量ng/m L,定量限0.2～0.5 ng/m L,肝脏中地高辛及其代谢物的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.5 ng/g。建立的方法能够满足检验需要。4.研究了不同剂量的地高辛在比格犬体内的毒物代谢动力学。地高辛及二氢地高辛在血液中的药SCH772984研究购买物代谢动力学均符合一级吸收二室开放模型。尿液中地高辛/二氢地高辛的浓度比随摄入时间呈指数规律变化,在低、中剂量下比格犬尿液地高辛及二氢地高辛的平均浓度-时间曲线拟合良好,利用所得方程反推比格犬的给药时间,大部分误差在±immune phenotype15%之内。同时研究了地高辛及二氢地高辛在中毒比格犬体内分布规律。研究表明,地高辛含量分布依次为肾>心≈肝>肌肉>肺>脾>脑;二氢地高辛含量分布依次为肾>心≈肌肉>肝,脾和肺中未检出。本研究成果可为地高辛中毒和死亡案件的检验鉴定和调查提供参考。