目的：研究双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1, DCLK1)对胃癌干细胞生物学特性的作用，初步探讨其可能的作用机制。方法：无血清培养液悬浮培养胃癌干细胞，用DCLK1抑制剂DCLK1-IN-确认细节1靶向抑制胃癌干细胞中DCLK1活性。用Western blot法检测胃癌干细胞中DCLK1、干性相关蛋白（SOX2和OCT4）、细胞增殖相关蛋白（cyclin D1和c-MYC）、耐药相关蛋白（ABCG2和TOP2A）、上皮-间充质转化相关蛋白（E-cadherin、vimentin和Snail）和PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平。用CCK-8法测定DCLK1对胃癌干细胞活力及耐药的影响；用甲基纤维素成球法测定DCLK1对胃癌干细胞自我更新的影响。用细Medical care胞划痕实验和Transwell实验测定DCLK1对胃癌干细胞迁移和侵袭功能的影响。结果：胃癌干细胞中DCLK1及干性相关蛋白SOX2和OCT4表达明显高于亲本细胞（P<0.01）。DCLK1抑制组胃癌干细胞的增殖、耐药、迁移和侵袭能力明显低于Sphere细胞组（P<0.01）。DCLK1抑制组细胞增殖相关蛋白c-MYC和cyclin D1表达下调，耐药相关蛋白TOP2A和ABCselleck TezacaftorG2表达下调，上皮标志物E-cadherin表达上调，间充质标志物vimentin和Snail表达下调，PI3K/AKT/mTOR相关蛋白表达及其磷酸化水平降低（P<0.01）。结论：DCLK1在胃癌干细胞中高表达，它可能通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进胃癌干细胞增殖、耐药、侵袭和迁移。DCLK1可作为靶向胃癌干细胞的潜在靶点。