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化疗作为一种全身系统性的治疗是目前癌症治疗的主要方式。比如,针对参与蛋白质合成、折叠和维持细胞稳态的重要细胞器内质网使用化疗药物丰加霉素(Toy),可放大内质网应激状态进而杀伤肿瘤细胞。虽然这种直接杀伤细胞的治疗方式缓解了肿瘤的发展,但也会对正常组织造成不同程度的损伤,使肿瘤细胞产生免疫逃逸,形成免疫抑制肿瘤微环境(TME),导致疗效减弱和肿瘤复发与转移。免疫抑制TME特征是低水平的浸润细胞毒性T细胞、高水平的免疫抑制细胞(如调节性T细胞和肿瘤相关巨噬细胞(TAMs))和丰富细胞外基质等。因此,在化疗同时多管齐下地调控免疫抑制性肿瘤微环境将有效增强化疗疗效和激活长效的抗肿瘤复发和转移能力。其关键技术是构建一个纳米载此网站体平台负载化疗药物和TME调控治疗剂,并将其高效递送和富集于肿瘤部位。研究显示,金纳米颗粒(Au NPs)不仅可用于CT成像,还可促M2型TAMs向抗肿瘤的M1型转型;通过PD-L1抗体介导的免疫检查点阻断可以有效激活T细胞的活性;超声靶向微泡破坏技术(UTMD)则可通过空化效应瞬时突破肿瘤组织的致密基质,促进纳米材料在肿瘤部位有效富集。此外,纳米凝胶(NGs)因集合了凝胶和高分子基体材料独特的物化性质,作为双载体而受到广泛关注。例如,聚酰胺-胺(PAMAM)树状大分子因其表面Domestic biogas technology带有大量的氨基基团易于修饰,内部空腔可以包裹各种治疗制剂,是一种构建NGs的理想材料。同时合适的交联剂则可以赋予NGs TME(GSH、ROS、p H等)智能响应释放药物特性。基于以上研究背景,本论文利用第三代PAMAM树状大分子(G3.NH_2)构建氧化还原响应MK-2206小鼠型NGs并原位负载Au NPs和化疗药物Toy,随后联用UTMD和PD-L1抗体用于小鼠胰腺癌(Pan02)模型的UTMD增强的CT成像介导的化学免疫治疗。我们以G3.NH_2为NGs基体材料,通过酰基化反应将巯基化试剂(NHS-PEG-SAT)修饰在其表面,随后通过反相微乳液法自交联生成含二硫键的氧化还原响应性G3 NGs,并以此为纳米反应器,原位固定Au NPs,并物理包裹Toy,生成Au/Toy@G3 NGs。结果显示,其平均大小为193 nm、形态均一、具有良好稳定性、GSH响应性药物释放能力、CT成像能力和生物相容性以及较长的半衰期。体外实验结果证明,Au/Toy@G3 NGs能够有效抑制肿瘤细胞的增殖,借助UTMD技术可进一步抑制Pan02细胞的生长;有效阻断IRE1α-XBP1信号通路,增强内质网应激状态;产生有效的免疫原性死亡;同时Au@G3 NGs和Au/Toy@G3 NGs均可促进巨噬细胞的转型。体内实验结果表明,Au/Toy@G3 NGs在UTMD技术和Anti-PD-L1的联合作用下能通过增强的化学免疫治疗获得了高效的抗肿瘤免疫应答,有效抑制肿瘤生长。综上所述,构建的响应型Au/Toy@G3 NGs在UTMD增强的组织穿透力和CT成像引导下,通过靶向肿瘤细胞和免疫细胞的化学/免疫联合治疗策略,实现了肿瘤高效治疗,为开发肿瘤新型高效治疗纳米药物提供新思路。

目的:根据国际癌症研究机构(IARC)最新统计报道,胃癌仍是世界五大癌症之一,对人类的健康构成了极大的威胁。目前有关于转化生长因子β(TGF-β)通路的机制研究中,大量的研究结果表明TGF-β通路在多种恶性肿瘤中起着关键作用。但是,关于TGF-β通路在胃癌中的预后和肿瘤微环境特征方面的潜在作用仍需进一步研究。因此我们利用肿瘤基因组图谱公共数据库(TCGA)中胃癌患者基因数据,构建一个基于转化生长因子β通路相关基因的胃癌风险评分预测模型,并以此模型对胃癌的肿瘤微环境进行相关分析。方法:首先,从肿瘤基因组图谱公共数据库(TCGA)中下载胃癌及癌旁正常组织的基因表达数据以及临床数据,同时从多个数据库中和相关文献中总结了目前已被研究发现的TGF-β通路相关基因。利用R语言软件进行对癌组织和癌旁正常组织之间的差异表达基因(DEGs)的筛选提取,然后将DEGs与TGF-β通路相关基因合并,获取差异表达的TGF-β通路相关基因,随后利用基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)在线平台分析差异表达的TGF-β通路相关基因与GC预后的相关性。再采用单因素和多因数COX回归分析筛选所得到的与预后显著相关基因,基于所获得预后显著相关基因进行风险评分预测模型的构建,随后通过所构建模型计算风险系数,并将中位数作为截点值,将胃癌样本分为低危险和高危险两组,然后通过进行Kaplan-Meier(K-M)生存分析,比较高低风险组的整体生存率(overall survival,OS)。再通过卡方检验验证预后指数与临床预后的相关性,单因素COX回归分析和多因素COX回归分析相关临床指标,进行验证该风险评分预测模型对胃癌患者是否可作为独立预后因素,评估风险评分预测模型有效性。然后,我们基于此模型所区分出的高低风险组,分析高低风险组之间差异表达基因在肿瘤微环境的作用以及功能富集的结果,进行ESTIMATE评分、免疫细胞浸润等相关功能分析。结果:1.通过TCGA数据库下载GC基因表达数据,经过筛选获得46个差异表达的TGF-β通路相关基因,通过GEPIA在线分析平台验证发现,共有17个基因与GC患者的预后相关,通过单因素、多因素COX分析,发现17个基因中只有COL1A2、GDF7、INHBB、SERPINE1显著相关(p<0.05)。2.基于COL1A2、GDF7、INHBB、SERPINE1建立了风险评分预测模型,预后指数(PI)公式为:预后指数(PI,Prognosis index)=(0.415×COL1A2的表达量)+(0cancer cell biology.432×GDF7的表达量)+(0.422×INHBB的表达量)+(0.628×SERPINE1的表达量)。计算出预后指数PI中位值后,共有159名患者纳入高危险组,158名患者纳入低风险组。K-M分析结果表明,高危组患者的预后较差。卡方检验结果表明,预后指数PI与GC患者生存状态、T分期有统计学差异(p<0.05),单因素COX回归分析显示:年龄,临床分期,预后指数、T分期、N分期、M分期均与OS相关。多因素COX回归结果显示:年龄、预后指数、M分期均是GC患者预后的独立影响因素。3.通过对高低风险组的差异表达基因进行免疫细胞浸润分析,结果表明高风险组患者的树突状细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞细胞浸润程度比较低风险组更高。进行ESTIMselleck激酶抑制剂ATE评分分析,结果示高风险组的基质细胞浸润丰度明显高于低风险组。4.通过检索文献及胃癌治疗相关指南,筛选胃癌治S63845使用方法疗常见的化疗药物,进行化疗药物敏感性分析,结果示低风险组比高风险组药物敏感性更高。结论:我们通过公共数据库TCGA中胃癌基因表达数据构建了一个基于COL1A2、GDF7、INHBB、SERPINE1这四个TGF-β通路相关基因风险评分预测模型,该模型可作为评价GC患者预后的独立影响因素。此外,还进行了免疫细胞浸润分析。发现高风险组比低风险组基质细胞浸润丰度更高。以及化疗药物敏感性分析,低风险组比高风险组对于化疗药物敏感性更高,为以后胃癌患者制订个体化方案、针对性治疗提供了一定的方向。

热射病分为劳力型和经典型，主要表现为有明确的高温高热环境暴露史或高温环境中的活动史，核心温度超过40℃，伴有中枢神经系统改变(包括意识改变、癫痫、精神症状等)和多器官损伤，包括呼吸衰竭、肝肾功能受损、横纹肌溶解、凝血障碍、腹胀腹泻等。其病理学可表现为器官内皮细胞损伤、炎症反应、广泛的血栓形成和出血倾向等。主要治疗措施为降温治疗，合并其他器官损伤时应及时早期行器官支持或替代治疗，包括输血改善凝血功能，血液净化治疗等，缺血缺氧性脑病可联合高压氧治疗，改善患者预后。本文报道一例消防员在森林救火过程中突发意识障碍、高热，至当地医院行头颅计算机断层扫描（CT）检查可见脑沟脑回显示不清，提示严重的脑水肿，最后诊Enzymatic biosensor断为热射病的病例。转入柳州市工人医院后，病情继续恶化，出现多器官功能衰竭表现。通过早期降温、镇静抗癫痫、气管插管呼吸机辅助呼吸、抗感染、液体复苏、输注新鲜冰冻血浆及血小板改善凝血功能、免疫调节治疗、肾脏替代治疗Gefitinib抑制剂、及时人工肝治疗等一系列措施后，成功阻止ABT-199化学结构了病情的进一步发展，逆转了脑水肿。康复阶段辅助以高压氧治疗，患者出院时恢复良好，未遗留明显神经系统后遗症。其预后情况明显优于入院时的预估。

目的：分析3.0T MR弥散加权成像（DWI）参数联合在鉴别前列腺癌及Gleason分级中的应用价值。方法：纳入2020年1月—2022年12月萍乡市人民医院收治的90例前列腺疾病患者进行回顾性分析，其中42例前列腺癌患者纳入癌症组，48例良性前列腺增生患者纳入增生组，所有患者均实施磁共振成像（MRI）检查。评估癌症组患者Gleason分级，并根据Gleason分级将其分为高分化组、中低分化组。比较癌症组与增生组DWI参数[信号强度（SI）、表观弥散系数（ADC）、指数表观弥散系数（eADC）]，以受试者操作特征（ROC）曲线评估DWI参数联合诊断前列腺癌的价值；比较高分化组与中低分化组患者的DWI参数（SI、ADC、eADC），以ROC曲线评估DWI参数联合诊断高分化前列腺癌的价值。结果：癌症组患者SI、eADC均显著高于增生组，ADC显著低于增生组（P<0.05）;ROC曲线中，SI、ADC、eADC联合诊断前列腺癌的曲线下面积（AUCFulvestrant）为0.852，敏感度为78.57%，特异度为79MLN4924抑制剂.17%。高分化组SI、eADC均显著低于中低分化组，ADC高于中低分化组（P>0.05）;ROC曲线中，SI、ADC、eADC联合诊断高分化前列腺癌的AUC为0.970，敏感度为94.74%，特异度为91.30%。结论：DWI参数联合诊断前列腺癌具有较高价值，可作为临床诊断前列腺癌和判断其分化evidence informed practice程度的依据。

目的：探讨阿司匹林联合肝素钙在四肢骨折患者围术期的应用及对下肢深静脉血栓的预防价值。方法：将2000例四肢骨折患者随机分为两组。对照组于围术期应用低分子肝素钙治疗，观察组采用阿司匹林联合低分子肝素钙治疗。比较两组围术期指标；比较两组治疗前后血小板、血红蛋白与D-Ferrostatin-1作用二聚体水平；比较两组随访1个月内DVT发生情况。结果：观察组术中出血量与术后引流量与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。治疗后，观察组血小板、血红蛋白与D-二聚体水平均低于对照组(P<0.05)。治疗后14d,观察组DVT发生率为1.30%,低于对照组的7.90%;治疗后1个月，观察组DVT发生率为2.10%,低于对照组的12.40%(P<0.05)。结论：阿司匹endodontic infections林联合肝素钙在四肢骨折患者围术期的应用效果较好3-MA体内实验剂量，可通过改善患者血小板、血红蛋白与D-二聚体水平，进而避免下肢深静脉血栓形成。

目的：探讨归芍运汤对肝郁脾虚型乳腺增生大鼠的性激素水平及血管生成因子的影响。方法：选取12周龄SPF级SD大鼠60只，随机分为归芍运脾颗粒低、中、高倍组、空白组、模型组、他莫昔芬组，除空白组不予干预外，其余各组均采用饥饱失常法+夹尾刺激法+苯甲酸雌二醇+黄体酮等综合方法慢性刺激30天，构建肝郁脾虚型乳腺增生模型，确认造模成功后，归芍运脾汤低、中、高剂量组分别给予相应剂量归芍运脾汤灌胃selleck，空白组和模型组予蒸馏水灌胃，阳性对照组予他莫昔芬灌胃，干预30天后观察大鼠一般状况及行为改变，观察大鼠旷场实验阳性反应，并用ELISA法检测各组大鼠血清中雌二醇（E2）、磷（P）、催乳素（PRL）、血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的含量。结果：与空白组比较，模型组大鼠暴躁易GDC-0068细胞培养激惹，扎堆蜷卧，旷场实验阳性（大鼠运动总路程、直立次数、穿越中央场次数均减少），乳头直径、高度增加（P<0.05）,E2、PRL升高（P<0.05）,P下降（P<0.05）；与模型组相比，各给药组大鼠一般生活状态及旷场实验反应改善，乳头直径、高度下降（P<0.05）,E2、PRL下降（P<0.05）,P增加（P<0.05），血清中b FGF、VEGF水平降低（P<0.Immuno-chromatographic test05）。结论：归芍运脾汤能够有效改善肝郁脾虚型乳腺增生大鼠一般生存状况，其具体机制可能与归芍运脾汤调节激素内分泌及血管生成因子有关。

冠状病毒(Coronavirus)是一类具有囊膜、基因组为线性单股正链的RNA病毒,在自然界中广泛存在,也是已知RNA病毒中基因组最大的病毒。冠状病毒分为α、β、γ及δ四类,严重急性呼吸道冠状病毒2型(SARS-Co V-2)属于β型冠状病毒。SARSCo V-2有很强的传染性和致病性,同时SARS-Co V-2具备很强的变异能力,在大流行的三年时间内变异产生了包括Alpha,Beta,Gamma,Delta,Omicron等变异株。冠状病毒的病毒粒子外包裹着脂双层膜,膜表面有包括刺突蛋白(S)在内的多种糖蛋白。S蛋白介导病毒侵入靶细胞,其中S1亚基负责识别和结合宿主细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)受体,S2亚基负责病毒与宿主细胞的膜融合。S1亚基中通过受体结合域(RBD)与ACE2结合后,S2亚基的融合肽(FP)插入细胞膜,HR2与HR1结合形成六聚体的结构,拉动HR1 N端的细胞膜和HR2 C端的病毒膜接触并发生融合。与S1亚基相比,不同冠状病毒的S2亚基具有更高的保守性,对于S2亚基的研究可以为冠状病毒预防、诊断和治疗提供新的思路。而高纯度和高活性的S2亚基的获取,对研究S2亚基的结构与功能、筛选靶向SSCH727965化学结构2亚基的单克隆抗体、设计以S2亚基为靶点的表位疫苗,具有重要的意义。本研究利用杆状病毒表达系统,对不同来源的冠状病毒S2亚基进行了表达、分泌及纯化研究,主要内容及结果如下:(1)选取了8种与SARS-Co V-2相关的冠状病毒(Ra TG13、WIV1、GX-P5L、GD18、Civet SZ3、Civet 007、SARS-Co V、SARS-Co V-2),对其S蛋白基因进行了生物信息学预测分析,确定了S2亚基的主要抗原区。将这些S2亚基的基因编码序列克隆到带有不同信号肽序列和检测纯化标签的表达载体上。(2)利用带有GP64sp与His Tag的pQB3载体对对其中4种冠状病毒S2蛋白进行表达和分泌检测,发现4种S2蛋白都有较好的表达分泌效果。与Sf9细胞相比,High Five细胞的分泌效果更好。利用Ni-Agarose Resin纯化系统对带有His Tag的S2蛋白进行纯化,发现蛋白的挂柱率很低。(3)利用带有Fib Hsp、m Fc Tag的p Tri Ex载体对上述4种冠状病毒S2蛋白进行表达,S2蛋白的表达量有所提高,但WIV1毒株的S2-Fc融合蛋白无分泌。利用Protein A Agarose纯化系统对S2-Fc融合蛋白进行纯化,在纯化的蛋白中出现了蛋白断裂的现象,推测这种断裂可能与细胞Nirogacestat的培养条件及洗脱液p H值过低都有关。(4)在pQB4载体的基础上插入Strep Tag构建了pQB4-SH重组载体。利用该载体表达8种冠状病毒S2蛋白,S2蛋白获得了良好的表达及分泌。利用Strep-Tactin XT4Flow纯化系统对带有Strep Tag的S2蛋白进行纯化,纯化效率显著提高。(5)在蝙蝠源的冠状病毒WIV1毒株的S2蛋白研究中,获得了第297位Arg突变为Gln、410位Val突变为Ile的突变体。蛋白表达结果发现,两个氨基酸突变并不影响其蛋白的表达量。但在蛋白的纯化方面,与野生型相比,突变型的蛋白纯化效率有明显提高。结构预测分析表明,突变导致蛋白N端尾部的Strep Tag暴露在蛋白的折叠区外,可以与纯化柱更好地结合。(6)BCA蛋白定量结果显示,Ra TG13毒株与WIV1毒株S2蛋白的纯蛋白产量最高,接近4mg/L;Civet 007毒株S2蛋白的纯蛋白产量最低,但也超过了2mg/L。(7)利用临床获得的人血清样品进行抗原活性检测。结果显示,接种SARS-Co V-2疫苗加强针前和接种加强针后的血清,多数可以与本研究获得的8种冠状病毒S2抗原产生阳性结果,且与接种加强针后的血清反应更强。该结果表明,本论文获得的冠状病毒S2亚biologic drugs基具有良好的抗原活性,而且8种S2蛋白具有一些共同的抗原表位,与SARS-Co V-2的抗血清具有交叉反应性。综上所述,本论文成功构建了可大量表达、分泌并纯化多种冠状病毒S2亚基的表达纯化体系。该表达体系的建立可以为后续冠状病毒S2蛋白的结构与功能研究、靶向S2亚基的单克隆抗体筛选、以S2亚基为靶点的表位疫苗设计等研究奠定基础。

目的 探讨重症监护室(ICU)中伴凝血功能障碍的老年脓毒性休克患者新鲜冰冻血浆治疗内皮多糖包被(GCX)的保护因素。方法 回顾性纳入ICU收治的200例伴有凝血功能障碍的老年脓毒性休克患者，分为内皮GCX保护组(n=100)和无内皮GCX保护组(n=100)。经单因素和LogistIACS-10759试剂ic多因素回归分析ICU伴凝血功能障碍的老年脓毒性休克患者新鲜冰冻血浆治疗GCX的保护因素。结果 内皮GCX保护组血乳酸(Lac)、多配体蛋白聚糖(Syndecan)-1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、细胞间黏附分子(ICAM)-1、硫酸乙酰肝素水平均显著低于无内皮GCX保护组，差异有统计学意义(P<0.05),Logistic多因素回归分析显示，Lac、Syndecan-1、MMP-2、ICAM-1、硫酸乙酰肝素水平均是ICU伴凝血功能障碍的老年脓毒性休克患者新鲜冰冻血浆Immuno-related genes治疗GCX的保护因素(P<0.05)。结论 ICU伴凝血功能障碍的老年脓毒性休克患者新鲜冰冻血浆治疗GCX的保护selleckchem MLN8237因素多种多样，包括Lac、Syndecan-1、MMP-2、ICAM-1、硫酸乙酰肝素水平，临床上应重视新鲜冰冻血浆治疗GCX的保护因素，以帮助患者达到更好的疗效。

目的 探讨小檗碱对MG63骨肉瘤细胞铁死亡的影响及机制。方法 以不加药的细胞为对照，用不同浓度（2.5、5.0、10.0μmol/L）小檗碱作用于细胞24 h，检测细胞存活率、铁死亡相关指标[细胞核增殖相关抗原Ki-67(Ki67)、线粒体超微结构、Fe2+、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）]变化、信号转导及转录活化因子3(STAT3)与DNA结合活性以及磷酸化STAT3(pSTAT3)、肿瘤蛋白53(p53)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白表达水平。为观察p53在小檗碱诱导细胞铁死亡中的作用，转染p53 siRNA，将细胞分为对照组、p53 siRNA组、小檗碱组和p53 siRNA+小檗碱组，以10.0μmol/L小檗碱作用24 h后，检测细胞内p53和SLC7A11蛋白表达水平、线粒体膜电位、GSH水平以及MDA含量。为探究STAT3在小檗碱调控p53/SLC7A11信号通路中的作用，转染STAT3过表达质粒，将细胞分为对照组、小檗碱组、STAT3组和STAT3+小檗碱组，以10.0μmol/L小檗碱作用24h后，检测细胞内p-STAT3、STAT3、p53和SLC7A11蛋白表达水平。结果 与对照细胞比较，2.5、5.0、10.0μmol/L小檗碱均能降低细胞存活率和细胞内Ki67蛋白表达，引起线粒体形态改变，升高细胞内Fe2+、ROS和MDA水平以及p53蛋白表达水平，降低GSH水平、STAT3与DNA的结合活性以及p-STAT3和SLC7A11蛋白表达水平，差异均有统计学NSC 127716意义（P<0.05或P<0.01）。与小檗碱组比较，p53 siRNA+小檗碱组细胞内p53蛋白表达水平和MDA水平降低，SLC7A11蛋白表达水平、线粒体膜电位以及GSH水平升高，Liraglutide说明书差异均有统计学意义（P<0.01）。与小檗碱组比较，STAT3+小檗碱组细Laboratory Automation Software胞内p-STAT3、STAT3、SLC7A11蛋白表达水平升高，p53蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 小檗碱可通过STAT3/p53/SLC7A11信号通路诱导MG63细胞铁死亡。

目的 探讨PEAR1、GSTP1基因型与脑梗死预后的相关性，为脑梗死个体化精准治疗及二级预防提供理论参考.方法 选取首发症状型脑梗死患者，入院后遵循抑制血小板聚集、营养神经、改善循环及对症治疗原则，患者24 h内口服阿司匹林100 mg, 1次/d,并长期维持治疗.收集患者的一般资料、既往史、血小板相关指标、PEAR1及GSTP1基因型、相关待测量表评selleck产品分及脑梗死复发周期，出院随访13个月.根据脑梗死复发及复发周期进行分组，比较PEAR1、GSTP1基因多态性及其他临床资料与脑梗死预后是否具有关联.结果 入组患者PEAR1基因突变型(AA+AG)占60.1%,未突变型(GG)占39.9%;GSTP1基因突变型(AG+GG)占31.8%,未突变型(AA)占68.2%.对比分析两组患者冠心病病史、出院时NIHSS评分、血小板计数及GSTP1基因型与脑梗死复发有关联.多因素Logistic回归分析显示冠心病病史、出院时低NIHSS评分、低血小板计数及GSTP1基因突变型Triterpenoids biosynthesis(AG+GG)为脑梗死复发的独立危险RSL3试剂因素(P<0.05).结论 首发症状型脑梗死患者年龄越大、出院时低NIHSS评分、低血小板计数或GSTP1为基因突变型(AG+GG)脑梗死预后较差.