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目的 基于Toll样受体(TLR)4炎症信号通路探讨针灸对颈性眩晕Glycopeptide antibiotics大鼠中缝背核神经元细胞活性及血管活性物质的影响。方法 选取40只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常(N)组、模型(M)组、针灸(A)组、西比灵(W)组，每组10只，M、A、W组采用颈椎失稳法建立颈性眩晕模型，N组不建立该模型，建模成功后，对A组给与针灸治疗，对W组灌胃盐酸氟桂利嗪(西比灵)0.5 mg/kg, N、M组灌胃同体积生理盐水，记录各组一般情况，平衡木实验测定行为学，TUNEL法测定缝背核神经元细胞活性，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管活性物质，Western印迹检测TLR4蛋白表达。结果 N组皮毛光泽，活动自如，一般情况均正常，对外界刺激也反应灵敏，M组皮毛光泽可见降低，且活动明显受限，颈部活动受限最为明显，进食、进水量明显减少，对外界刺激反应可见明显降低，而与M组相比，A、WAZD1152-HQPA说明书组一般情况明显改善，饮食逐渐恢复正常，颈部活动也明显恢复；与N组相比，M组平衡木得分显著降低(P<0.05);与M组比较，A、W两组平衡木得分显著升高(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);与N组相比，M组中缝背核神经元细胞凋亡显著升高(P<0.05);与M组比较，A、W两组中缝背核神经元细胞凋亡显著降低(P<0.05);W组与A组相比无明selleck合成显差异(P>0.05);与N组相比，M组血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)水平显著降低，内皮素(ET)-1、血栓素(TXB)2、神经肽(NP)Y水平显著升高(P<0.05);与M组比较，S、W两组血浆中CGRP水平显著升高，ET-1、TXB2、NPY水平显著降低(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);与N组相比，M组脑组织中TLR4蛋白表达显著升高(P<0.05);与M组比较，A、W两组脑组织中TLR4蛋白表达显著降低(P<0.05);W组与A组相比无明显差异(P>0.05);T组与W组相比无明显差异(P>0.05);U组比T组明显降低(P<0.05)。结论 针灸可显著抑制颈性眩晕大鼠中缝背核神经元细胞活性并有效调控血管活性物质水平，其作用机制可能与抑制TLR4炎症信号通路有关。

目的 分析基于NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路探究头穴透刺对阿尔茨海默病大鼠的干预效果。方法 选取50只SPF级大鼠，10只大鼠作为空白组，剩余40只建立阿尔茨海默病模型，将30只建模成功大鼠随机分为模型组、药物对照组、实验组各10只。空白组、模型组大鼠给予生理盐水进行灌胃，药物对照组给予盐酸美金刚片灌胃治疗，实验组大鼠进行针刺，观察大鼠病理组织、逃避潜伏期时间、跨越平台次数、氧化应激状态、炎症因子水平、NF-κB、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达量、NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路相对表达量。结果 与空free open access medical education白组相比，模型组、药物对照组、实验组逃避潜伏期时间增加、KPT-330溶解度跨越平台次数减少，SOD、CAT、IL-10水平降低，MDA、IL-6、TNF-ɑ、NF-κB、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达量、NF-κB、NLRP3、Caspase-1相Taurine IC50对表达量升高(P<0.05);与模型组相比，药物对照组、实验组逃避潜伏期时间降低，跨越平台次数增加，SOD、CAT、IL-10升高，MDA、IL-6、TNF-ɑ、NF-κB、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达量、NF-κB、NLRP3、Caspase-1相对表达量降低(P<0.05);与药物对照组相比，实验组逃避潜伏期时间降低，跨越平台次数增加，SOD、CAT、IL-10升高，MDA、IL-6、TNF-ɑ、NF-κB、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达量、NF-κB、NLRP3、Caspase-1相对表达量降低(P<0.05)。结论 头穴透刺可改善阿尔茨海默病大鼠氧化应激状态，降低炎症因子表达，其作用机制可能与NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路有关。

目的 对浙江省金华市第二医院（以下简称“我院”）住院患者头孢菌素类药物医嘱中不合理用药情况进行调查及干预。方法 选取我院2020年1月至12月对内科病房住院患者开具的头孢菌素类药物医嘱共1 550份进行调查，按照相关标准对2020年1月至6月的750份医嘱进行评价，并在2020年7月至12月对800份医嘱进行干预，统计干预前后医嘱内相关指标、头孢菌素类药物用药情况，比较干预前后的不合理用药发生情况。结果 我院干预前后平均医嘱用药品种数、抗菌药物医嘱百分率、使用头孢菌素类比例、平均医嘱金额、头孢菌素类药物金额占比均处于稳定、正常的范围，使用头孢菌素类药物较多的有头孢哌酮钠舒巴坦general internal medicine钠（ABT-199试剂41.94%）、头孢他啶（22.58%）、头孢呋辛钠粉针（9.67%）、头孢呋辛酯片（9AM-2282核磁.67%）。干预后适应证不适宜、遴选药物不适宜、药物剂型或给药途径不适宜、联合用药不适宜发生率均低于干预前（P<0.05），不合理用药原因主要是医师药理知识匮乏、患者自身未遵医嘱用药等。结论 我院患者头孢菌素类药物医嘱基本符合标准，不合理用药情况较少，今后应继续加强对医嘱用药的监督，定期进行用药调查，监督合理用药，降低不合理用药发生率，为广大患者用药安全提供保障。

目的：评价经导管动脉栓塞治疗（TACE）联合微波消融（MWA）治疗肝内胆管癌的临床疗效。方法：回顾性分析2013年9月至2022年9月接受TACE联合MWA治疗的30例肝内胆管癌患者的临床资料，对其治疗效果进行分析。结果：联合治疗后疾病缓解率达63.3%，联合治疗后肿瘤标记物明显下降，治疗前、治疗后3个月CA199值分别为（151.8±72.9）U/mL、（87.5±61.5）U/mL，差异有PI3K/Akt/mTOR抑制剂统计学意义（P<0.05），治疗后8例患者CA199恢复至正常参考值，治疗前、治疗后3个月CEA值分别为（26.1±28.9）U/mL、（8.7±7.2点击此处）U/m L，差异有统计学意义（P<0.05），治疗后5例患者CEA恢复至正常参考值，治疗前、治疗后3个月肿瘤体积分别为（89.1±83.2）cm3、（50.4±40.5）cm3，差异有统计学意义（P<0.05），治疗中Infectious diarrhea并发症的发生率为6.67%。结论：TACE联合MWA是肝内胆管癌有效、安全、微创的治疗方法。

目的 探讨胃癌血清miR-375和硫酸软骨素酶1(CHSY1)表达水平与幽门螺杆菌（Hp）感染的相关性。方法 选取2018年6月至2021年6月我院收治的胃癌患者96例设为胃癌组，另选取同期在我院就诊的慢性浅表性胃炎患者68例设为对照组。采用13C呼气试验检测Hp感染情况，根据Hp的感染密度将患者分为Hp轻度组（25例）、HLXH254p中度组（30例）、Hp重度组（26例）。采用qPT-PCR测定血清中miR-375和CHSY1 mRNA表达水平。Spearman相关性分析血清中miR-375和CHSY1表达水平与胃癌患者Hp感染的相关性。结果Infant gut microbiota 与对照组相比，胃癌组Hp感染阳性率显著较高(P<0.05),Hp阴性及Hp阳性患者血清中miR-375表达水平均显著降低(P<0.05),CHSY1 mRNA表达水平均显著升高(P<0.05)。胃癌组及对照组Hp阳性患者血清中miR-375表达水平低于Hp阴性患者，CHSY1 mRNA表达水平高于Hp阴性患者(P<0.05)。随着Hp的感染程度增加，miR-375的表达水平呈降低趋势(P<0.05),CHSY1 mRNA的表达水平呈升高趋势(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示，血清中miR-375表达水平与胃癌患者Hp感染呈负相关（r=-0.648,P<0.001）,CHSY1 mRNA表达水平与胃癌患者Hp感染呈正相关（r=0.534,P<PF-02341066浓度0.001）。结论 胃癌患者血清中miR-375表达水平降低，CHSY1表达水平升高，且与Hp感染密切相关。

目的 探讨仙茅苔黑酚龙胆二糖苷（orcinol gentiobioside,OGB）对氧化应激诱导的破骨细胞（osteoclasts,OCs）的作用及机制。方法 可溶性核因子-κB受体活化因子配体（soluble receptor activator of nucleimmunogenicity Mitigationar factor-κB ligand,sRANKL）联合H2O2诱导RAW264.7细胞，建立氧化应激诱导的OCs模型；CCK-8法检测OCs活力；抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色测定OCs的数目；磷酸苯二钠法测定OCs的TRAP活性；免疫荧光法观察OCs的Factin环结构和形态，以及p65和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的核转位；ELISA法测定OCs相关的生化指标；Western blotting检测骨吸收关键蛋白及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和Nrf2通路相关蛋白的表达。结果 OGB显著抑制氧化应激诱导的OCs的形成和分化（P<0.01），并抑制TRAP活性、F-actin环的形成及其骨吸收作用（P<0.05、0.01），下调骨吸收关键蛋白c-Fos、组织蛋白酶K(caAZD1152-HQPA纯度thepsin K,CTSK)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)的表达（P<0.05、0.01），降低活性氧（reactive oxygen species,ROS）和还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)的活性（P<0.05、0.01），增加抗氧化酶血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（gamma-glutamyl cysteine synthetase,γ-GCS）的活性（P<0.05、0.01），增selleck产品强OCs中Nrf2的表达和核转位，抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的募集、核因子-κB抑制因子α(inhibitor of NF-κB-α,IκBα)的降解，并阻止p65的磷酸化和核转位（P<0.05）。结论 OGB能够通过调控NF-κB和Nrf2通路，抑制氧化应激诱导的OCs形成分化和骨吸收作用。

目的 探究丹皮酚调节丝裂原活化细胞外信号调节激酶（MEK）/细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）/信号转导与转录激活因子3（STAT3）信号通路对糖尿病心肌病大鼠心脏功能、氧化应激损伤和炎症的影响。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、丹皮酚组、丹皮酚+MEK/ERK激活剂（C16-PAF）组，除对照组外，其余各组建立糖尿病心肌病大鼠模型，给予相应药物干预6周。检测大鼠心功能指标[左室后壁厚度（LVPWT）、左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）、左室射血分数（LVEF）和左室短轴缩短率（LVFS）]；观察心肌组织形态并进行病理评分；检测心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）活性和丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平，以及MEK、磷酸化MEK（p-MEK）、ERK、磷酸化ERK（p-ERK）、STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组大鼠心肌组织病理损伤严重，LVPWT、LVEDD、LVESD、心肌组织病理评分、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1水平和p-MEK/EPZ-6438说明书MEK、p-ERK/ERK、p-STAT3/STAT3蛋白表达升高（P＜0.05），LVEF、LNSC 119875VFS、NO水平和SOD、NOS活性降低（P＜0.05）；与模型组比较，丹皮酚组大鼠心肌组织病理损伤减轻，LVPWT、LVEDD、LVESD、心肌组织病理评分、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1水平和p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、p-STAT3/STAT3蛋白表达降低（P＜0.05），LVEF、LVFS、NO水平和SOD、NOS活性升高（P＜0.05）；C16-PAF可减弱丹皮酚对糖尿病心肌病大鼠上述指标的改善效果（P＜0.05）。结论 丹皮酚可通过抑制MEK/ERK/STAT3信号通路实现immunoelectron microscopy对糖尿病心肌病大鼠心脏功能、氧化应激损伤和炎症的缓解。

目的:在本课题组前期研究中,通过对胆管癌(Cholangiocarcinoma,CCA)患者的组织样本进行14-3-3ζ和OPN的蛋白及基因表达分析,发现14-3-3ζ和OPN可能共同促进CCA的侵袭和转移。本研究在前期工作的基础上,构建了不同14-3-3ζ表达的人CCA细胞株体外上皮间质转化(Epithelial mesenchymal transition,EMT)模型,检测了14-3-3ζ+/-人 CCA 细胞 EMT前后 EMT 标志物(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin 和 Vimentin)的变化,不同14-3-3ζ表达对CCA细胞迁移和侵袭能力的影响以及经14-3-3ζ介导的CCA细胞EMT后骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)特异性糖谱变化,进一步研究经14-3-3ζ介导的人CCA细胞EMT与OPN糖基化水平改变的关系。随后筛选出糖基转移酶GalNAc-T3并检测其在CCA中的表达,并分析GalNAc-T3的表达与临床病理及预后的关系,为阐明CCA早期迁移侵袭的机制提供科学依据。方法:(1)培养人CCA细胞株(HuCCT1和TFK-1),构建14-3-3ζ-siRNA质粒,转染人CCA细胞株,构建稳定表达的14-3-3ζ+/-的CCA细胞株,利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和免疫印迹试验(Western-blot,WB)检测14-3-3 ζ 表达情况。(2)构建不同14-3-3ζ表达的人CCA细胞株体外EMT模型,相差显微镜观察细胞形态改变,qRT-PCR和WB检测14-3-3ζ+/-人CCA细胞EMT前后,EMT 标志物(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin 和 Vimentin)变化。(3)Transwell侵袭实验和划痕实验检测不同14-3-3ζ表达的CCA细胞迁移和侵袭能Invasive bacterial infection力的差异。(4)提取总蛋白,经免疫沉淀技术纯化OPN,免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,CO-IP)检测 14-3-3ζ和 OPN 之间存在的关系,qRT-PCR和WB检测人CCA细胞EMT模型中14-3-3ζ和OPN的表达。(5)采用凝集素芯片技术,检测经14-3-3ζ介导的CCA细胞EMT转化后OPN特异性糖谱。(6)通过凝集素印迹和细胞凝集素组织化学方法验证凝集素芯片检测结果可靠性。(7)采用免疫组selleck HPLC织化学(Immunohistochemistry,IHC)、qRT-PCR 和 WB,检测CCA及其癌旁组织标本中糖基转移酶GalNAc-T3在基因和蛋白水平上的表达情况。(8)通过分析病人临床病理及预后资料,进一步研究GalNAc-T3与CCA临床病理类型及患者预后之间的关系。结果:(1)qRT-PCR和WB检测质粒转染人CCA细胞(TFK-1和HuCCT1)后14-3-3ζ的表达,发现CCA细胞中14-3-3ζ表达受到显著抑制。(2)相差显微镜观察14-3-3 ζ+/-人CCA细胞EMT体外模型细胞形态,发现细胞由柱状上皮细胞转化为纤维状间质细胞。抑制14-3-3 ζ的表达,CCA细胞EMT转化能力受到抑制。(3)14-3-3ζ+/-人CCA细胞EMT后,qRT-PCR和WB检测EMT标志物(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin和Vimentin),发现抑制 14-3-3ζ表达后,EMT标志物受到抑制。(4)Transwell侵袭实验和划痕实验检测14-3-3ζ+/-人CCA细胞EMT转化后CCA细胞迁徙移动能力改变,结果显示,抑制14-3-3ζ的表达,CCA细胞迁徙移动能力受到抑制。(5)CO-IP检测14-3-3ζ和OPN之间存在的关系,结果提示二者之间存在相互结合关系。(6)qRT-PCR和WB检测人CCA细胞EMT模型中14-3-3ζ和OPN的表达。结果表明,在EMT模型中,14-3-3ζ和OPN均高表达,协同促进EMT转化。(7)凝集素芯片检测CCA细胞经EMT转化后的OPN糖谱,发现OPN对凝集素LBA、Jacalin、Lotus、PHA-P、ACG和GAL1的亲和作用减弱,而对SNA-I、GAL1-S、BC2L-A、GAL2、PALa、Con A和PPL的亲和作用增强。OPN 糖谱中 GalNAc(α1,3)Galβ、Galβ3GalNAc、αFuc、GlcNAcβ4Manα3、α2,3 Sialic Acid 和 branched LacNAc 结构减少,而GalNANAα(2,6)Gal、branched LacNAc、High-mannose、GalNAcα1-3Gal、αMan和α/βGalNAc结构增多,提示CCA细胞EMT诱导OPN糖基化水平改变。(8)通过凝集素印迹方法验证凝集素芯片结果。结果显示,LBA凝集素结合的糖链结构在高表达14-3-3ζ的CCA细胞EAZD6738试剂MT转化后表达减少,凝集素印迹结果与芯片结果一致,证明芯片结果可靠。(9)通过荧光细胞凝集素免疫组织化学方法验证生物素标记的凝集素LBA的芯片结果。同样的凝集素LBA与高表达14-3-3ζ的CCA细胞EMT转化后细胞膜糖蛋白结合的荧光信号强度减弱,结果进一步验证了芯片结果可靠。(10)通过IHC、qRT-PCR和WB检测CCA病理组织及癌旁病理组织标本中糖基转移酶GalNAc-T3在基因和蛋白水平中的表达情况,发现GalNAc-T3在CCA中呈低表达。(11)通过分析病人临床病理及预后资料,发现GalNAc-T3在CCA病理组织中低表达,在癌旁组织标本中高表达,在Ⅰ-Ⅱ期CCA中低表达,在Ⅲ-Ⅳ期中低表达。在高分化癌中低表达,在中-低分化癌中低表达。GalNAc-T3高表达组CCA病人总体生存时间显著优于低表达组病人。结论:(1)成功构建14-3-3ζ+/-人CCA细胞EMT体外模型,发现在人CCA细胞EMT体外模型中,14-3-3ζ和OPN均高表达,协同促进EMT转化。(2)14-3-3ζ可通过介导CCA细胞EMT诱导OPN糖基化水平改变。该改变主要表现为特异性糖链GalNAcα(1,3)[αFuc(1,2)]Gal的表达减少,其催化的特异性糖基转移酶为GalNAc-T。(3)糖基转移酶GalNAc-T3在CCA的发生发展环节中发挥了重要作用,对于探寻CCA的早期诊断标志物及靶向治疗具有重要意义。(4)14-3-3 ζ介导胆管癌EMT转化后,可能通过关键分子GalNAc-T3调控OPN的O-糖基化。

目的:探讨牵牛子水煎液及化学拆分组分对大鼠上焦水饮内停模型药效学研究，寻找牵牛子对上焦水饮内停GNE-140模型作用的药效物质基础。方法:采用复合造模因素(大鼠腹部皮下注射异丙肾上腺素+气管插管+寒冷刺激)建立上焦水饮内停模型。模型建立后开始给予牵牛子水煎液0.63 g/kg、多糖组分0.37 g/kg、酚酸组分0.13 g/kg、树脂苷组分0.10 g/kg、脂肪油组分0.03 g/kg,灌胃给药连续14 d。试验结束后检测大鼠血清白蛋白(ALB)、肌酸激酶(CK)含量，计算肺干湿比，心、肺脏指数，测定肺泡灌洗液中蛋白含量，观察心、肺组织病理切片，综selleck合评价牵牛子水煎液及不同组分对上焦水饮内停模型大鼠利水功效。结果:与正常对照组比较，模型对照组ALB含量显著降低(P<0.01),肺泡灌洗液中蛋白浓度、肺干湿比、CK含量以及心脏、肺脏指数显著升高(P<0.01),心、肺组织受损较严重，上焦水饮内停模型建立成功；与模型对照组比较，牵牛子水煎液0.63 g/kg组显著升高ALB含量(P<0.01),降低心脏指数、肺脏指数、肺干湿比、肺泡灌洗液中蛋白含量(P<0.05或P<0.01);树脂苷0.10 g/kg组可降低CK含量、心脏指数、肺脏指数、肺干湿比、肺泡灌洗液中蛋白含量(P<0.05或P<0.01);多糖0.37 g/kg组明显升高ALB含量(P<0.05)。牵牛子水煎液0.63 g/kg组、树脂苷0.10 g/kg组对上焦水饮内停模型大鼠心、肺病psychotropic medication理改变有明显改善作用。结论:牵牛子水煎液可改善上焦水饮内停模型大鼠的心肺损伤。树脂苷组分治疗作用明显，为牵牛子对上焦水饮内停模型大鼠具有治疗作用的药效物质基础。

目的：探讨温笑散改善皮质酮诱导的小鼠抑郁样行为的作用机制。方法：雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、帕罗西汀组（20 mg·kg~(-1)）、温笑散低、高剂量组（3.27、6.54 g·kg~(-1)），正常组和模型组给予等体积的生理盐水，除正常组外其他各组在灌胃0.5 h后皮下注射皮质酮诱导抑郁模型。给药结束后检测小鼠抑郁样行为；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清皮质酮含量；尼氏染色观察海马神经元损伤情况；免疫荧光观察海马齿状回（DG）中双皮质素（DCX）表达；蛋白免疫印迹法检测海马组织中脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶受体Bpredictive protein biomarkers（TrkB）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）信号通路相关蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组小鼠糖水偏好率显著降低、悬尾不动时间显著增加（P<0.01），旷场中心区域的停留时间和运动总距离显著减少（P<0.01，P<0.05），血清皮质酮水平显著升高（P<0.01），海马DG区神经元体积明显缩小、细胞核染色加深，DG区的DCX表达减少，海马中BDNF、磷酸化（p）-TrkB、p-ERK、p-CREB蛋白表达显著降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组b比较，温笑散低剂量组糖水偏好、旷场、悬尾行为学指标显著STM2457配制改善（P<0.05，P<0.01），温笑散高剂量组糖水偏好、旷场行为学指标显著好转（P<0.01，P<0.05）；温笑散给药组血清皮质酮水平均显著降低（P<0.01），海马DG区神经元结构和形态正常Belnacasan细胞培养，细胞核明显、尼氏体丰富，DG区DCX的表达均升高，温笑散高剂量组海马中BDNF、p-TrkB、p-ERK、p-CREB蛋白表达显著升高（P<0.05，P<0.01）。结论：温笑散能改善皮质酮诱导的小鼠抑郁样行为，促进神经发生，其作用机制可能与激活BDNF/TrkB/ERK/CREB信号通路相关。