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为探究柴胡-川芎治疗抑郁症与肝损伤的共同作用机制,本研究采用网络药理学和体内试验研究柴胡-川芎治疗抑郁症和肝损伤的作用机制,使用TCMSP数据库筛选柴胡、川芎的活性成分和作用靶点,使用CTD、GeneCards、DisGeNET数据库搜索抑郁症和肝损伤的相关靶基因,利用STRING数据库和Cytoscape分析构建PPI网络并进行可视化分析,使寻找更多用Metascape平台进行GO功能分析和KEGG富集分析,通过分子对接,验证活性成分与关键靶点的结合能力,采用不可预测慢性温和刺激(CUMS)的方法,建立大鼠抑郁症模型,比较各组大鼠行为学改变。采用腹腔注射CCl4方法建立大鼠肝损伤模型,比较各组大鼠血清ALT、AST、ALP、GGTAngioimmunoblastic T cell lymphoma水平变化;最后采用Western blot法检测抑郁症大鼠脑内以selleckchem FG-4592及肝损伤大鼠肝脏TNF-α、IL-6的表达水平。结果显示,筛选得到柴胡-川芎活性成分31种,治疗二疾病的靶点212个,如TNF-α、IL-6等,主要富集在癌症通路、PI3K/Akt信号通路、MAPK信号通路等。分子对接表明,药物的主要活性成分与IL-6和TNF-α具有较为稳定的结合活性。Western blot试验显示,给药后,抑郁症大鼠脑内TNF-α、IL-6的表达下调;肝损伤大鼠肝脏TNF-α、IL-6的表达下调。根据网络药理学分析结果结合分子对接及体内试验验证表明,抑制炎症反应可能是柴胡-川芎“异病同治”抑郁症和肝损伤的重要机制。

目的 探讨复方嗜酸乳杆菌联合四联疗法在幽门螺杆菌（Hp）感染Trichostatin A分子量消化性溃疡患者中的应用价值。方法 选取兴国县中医院2019年6月—2021年6月收治的Hp感染消化性溃疡患者120例，按随机数字表法分为2组。对照组（60例）予以常规四联疗法治疗，研究组（60例）加用复方嗜酸乳杆菌治疗，均持续治疗8周。对比分析2组患者抗菌效果、临床疗效、炎症因子水平、肠道菌群及不良反应。结果 研究组Hp根除率、治疗总有效率分别为95.00%、96.67%，高于对照组的78.33%、83.33%，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗前，2组患者炎症因子水平、肠道菌群相比，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，研究组内皮素（ET）、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子（TNF-α）均较对照组低，产气荚膜梭菌低于对照组，乳杆菌、双歧杆菌、B/E值高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;2组患者不良反应相比，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 在Hp感染消化性溃疡患者中采用复方嗜酸乳杆菌联合四联疗法治疗能够有效提高Hp根除率，减轻炎症反应，改购买CB-839善肠道菌群，且不会增加不良反应，值得临床推广biocidal effect应用。

目的 建立一种慢性阻塞性肺疾病Steamed ginseng(COPD)相关性气管支气管软化症模型制备方法，并评价丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂(SB203580)的作用效果。方法 通过烟熏联合脂多糖气管滴入法制备大鼠COPD模型，分离COPD大鼠气管支气管软骨细胞、培养及传代，然后加入10 ng/ml白细胞介素(IL)-1β处理筛选的软骨细胞24 h诱导软骨细胞退变，建立COPD相关性气管支气管软化症模型。采用SB203580干预退变软骨细胞，流式凋亡和CCK8法分别检测软骨细胞凋亡、增殖活性；甲苯胺蓝染色和免疫组织化学法观察软骨细胞蛋白聚糖和Ⅱ型胶原含量；Western印迹检测软骨细胞caveolin-1、p38MAPK、IL-1β、基质金属蛋白酶(MMP)-13蛋白表达；荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测软骨细胞caveolin-1、p38MAPK、IL-1β、MMP-13表达水平。结果 COPD大鼠支气管软骨细胞分离鉴定成功，10 ng/ml IL-1β即能诱导构建稳定的COPD相关性气管支气管软化症细胞模型；通过CCK8法筛选确定第4代支气管软骨细胞、5μmol/LCL 318952体外 SB203580为最佳传代细胞和干预剂量，依上述条件分别处理各组软骨细胞48 h。甲苯胺蓝染色和免疫组织化学分析表明，SB203580处理可以有效提高COPD相关性气管支气管软化症细胞模型软骨细胞的蛋白聚糖和Ⅱ型胶原含量；细胞流式检测结果显示：SB203580可以显著降低细胞凋亡，显著增强细胞增殖活性(P<0.05);Western印迹检测结果表明：SB203580可以有效抑制caveolin-1、p38MAPK、MMP-13、1L-1β蛋白表达；qPCR检测结果表明SB203580可以有效抑制MMP-13、p38MAPK、caveolin-1、IL-1β基因的表达。结论 10 ng/ml IL-1β可诱导构建稳定的MCC950化学结构COPD相关性气管支气管软化症细胞模型；SB203580可提高该模型软骨细胞的蛋白聚糖和Ⅱ型胶原含量及提高细胞活性，同时减少软骨细胞凋亡。其作用可能与SB203580抑制caveolin-1-p38MAPK信号通路中关键信号分子caveolin-1、p38MAPK表达及降低下游效应产物MMP-13、1L-1β的表达水平有关。

目的 原核表达纯化重组蛋白GP900，初步探究微小隐孢子虫微线体蛋白GP900通过NF-κB/MAPK信号通路对RAW264.7细胞的免疫调节作用。方法 微小隐孢子虫GP900蛋白的氨基酸序列经在线网站ExPASy、SOPMA预测其的理化性质和二级结构；通过DNAStar软件和SYFPEITHI在线服务器预测GP900蛋白的B细胞及T细胞优势抗原表位，筛选获得最佳GP900重组蛋白氨基酸位置。以微小隐孢子虫卵囊cDNA为模板，PCR扩增GP900基因片段，构建pET-32a-GP900重组质粒并转化到BL21感受态细胞中诱导表达。重组蛋白经纯化、超滤浓缩并去内毒素。采用不同浓度的GP900重组蛋白刺激RAW264.7细胞24 h后，检测其对巨噬细胞的活力。以LPS(1μg/ml)为阳性对照，通过流式细胞术检测CD86表达量；通过RT-PCR和ELISA检测RAW264.7细胞中IL-6和TNF-ɑ表达量；采用Western blotting实验检测NF-κB和MAPK信号通路中P65蛋白和ERK蛋白磷酸化水平。结果生物信息学分析发现，当GP900蛋白的氨基酸位置位于871-1070时，重组蛋白为稳定的亲水性蛋白，二级结构中β转角和无规则卷曲的占比较高且含有较丰富的T、B细胞抗原表位。表达的重组蛋白GPGDC-0973900871-1070分子质量与理论值相符。CCK8结果显示重组蛋白GP900871-1070对细胞没有毒性作用，后续作用浓度选择0.16μg/ml、0.8μg/ml和4μg/ml。流式细胞术结果显示，CD86的表达量分别为13.500±0.815,18.670±0.657,20.470±1.271，后两者均高于空白对照组14.500±0.872 (t=3.818、3.872，均P <0.05)。RT-PCR结果显示，3个浓度梯度组巨噬细胞的IL-6 mRNA相对转录水平分别为1.409±0.050,2.052±0.098,3.284±0.097，三者均高于空白对照组1.010±0.096(t=3.700,7.595,16.700，均P <0.05);3个浓度梯度组巨噬细胞的TNF-ɑmRNA相对转录水平分别为1.077±0.034,1.440±0.021,2.378±0.037，后两者均高于空白对照组1.000±0.025 (t=13.380,30.850，均P <0.01)。ELISA检测结果显示，巨噬细胞培养上清中，3个浓度梯度组IL-6细胞因子的表达量分别为535Staurosporine细胞培养.400±17.230,572.800±8.286, 555.600±23.940，三者均高于空白对照组454.400±18.630 (t=3.193, 5.809, 3.339，均P <0.05);3个浓度梯度组TNF-genetic resourceɑ细胞因子的表达量分别为351.800±12.270,386.400±10.250,489.800±10.540，后两者均高于空白对照组324.200±11.070 (t=4.125,10.830，均P <0.01)。Western blotting结果显示，3个浓度梯度组巨噬细胞的p-P65蛋白和p-ERK蛋白相对表达量分别为2.294±0.254,1.714±0.205,1.877±0.309,1.522±0.054,1.760±0.066,1.582±0.027，三者均高于空白对照组1.0±0.0 (t=5.100,3.489,2.836,9.737,11.450,21.900，均P <0.05)。结论 不同浓度GP900871-1070重组蛋白刺激巨噬细胞后，通过激活NF-κB和MAPK信号通路诱导RAW264.7细胞活化,通过促进TNF-α和IL-6 mRNA的转录参与巨噬细胞的免疫调节，促进宿主防御寄生虫的感染。

随着纳米技术的发展,纳米银(AgNPs)在纳米尺度上显示出独特的物理、化学和生化特性,在生物医学领域和日常生活中应用广泛。AgNPs及其相关产品在生产、使用和废弃的过程中不可避免地导致了银颗粒在环境中的释放,极大地增加了职业人群和一般公众暴露的潜在风险。随着对环境安全和人类健康的日益关注,AgNPs的毒性机制尤其是其遗传毒性机制的研究以及评估AgNPs的潜在风险是目前两个急需解决的问题。本论文主要是以人鼠杂交瘤AL细胞为研究对象,在亚细胞器层面探究不同尺寸AgNPs诱导多位点基因缺失突变的作用机制。首先,研究了三种粒径AgNPs的内化途径差异对其遗传毒性的影响。利用透射式电子显微镜(TEM)结合细胞切片技术研究了不同粒径AgNPs在细胞内的分布情况,研究结果发现5 nm粒径AgNPs主要通过质膜的液相入胞,25 nm粒径AgNPs主要通过网格蛋白和小窝蛋白介导的胞吞作用内化到细胞中,75nm粒径AgNPs主要通过能量依赖的胞饮作用。通过微核形成率及CD59基因突变率的检测,发现AgNPs诱导的遗传毒性与其粒径呈负相关关系,而与处理时间、剂量呈正相关关系;利用CD59基因突变谱实验检测,发现了小粒径AgNPs可以诱导产生基因多位点缺失突变。其次,探究了 AgNPs对溶酶体及线粒体结构及功能的影响,研究溶酶体及线粒体功能障碍对AgNPs诱导的基因缺失突变的贡献。研究发现,AgNPs诱导了粒径依赖的线粒体及溶酶体结构和功能损伤;ROS清除剂N-Acetyl-L-cysteine(NAC)或Mito-TEMPO存在的情况下,可以显著降低5 nm AgNPs的遗传毒性;线粒体DNA缺失型—ρ0AL细胞对AgNPs诱导产生的CD59基因突变和微核形成的弱响应性,揭示了线粒体在AgNPs诱导遗传毒性中的重要作IDN-6556配制用。进一步研究显示,小粒径AgNPs一方面可以引起溶酶体渗透膨胀和溶酶体应激的结构损伤;另一方面可以影响溶酶体膜上质子泵H+-ATPase功能,诱发溶酶体碱化和内部酶活下降的功能损伤;而溶酶体的重新酸化可以一定程度上降低AgNPs诱导产生的遗传毒性。最后,在细胞自噬的层面上,发现了 AgNPs能够诱导产生粒径依赖的细胞自噬。其中,5 nm粒径AgNPs诱导了自噬流的阻断,并通过抑制自噬小体与溶酶体的融合,诱导产生自噬功能障碍;而溶酶体保护剂对自噬功能的重新激活降低了 5 nm粒径AgNPs诱导的遗传毒性。综上,AgNPs的内化途径,线粒体与溶酶体的交互作用及细胞自噬共同参与了 AgNPs诱导的基因多位点缺失突变。一方面,AgNPs诱导了粒径依赖的Keratoconus genetics溶酶体和线粒体的损伤;另一方面,其诱导产生的受损的细胞自噬无法清除损伤细胞器的积累和ROS的堆积,继而加剧了 AgNPs引起的DNA损伤、染色体畸变和CD59基因突变。本研究揭示了 AgNPs诱导基因多位点缺失突变的作用机制,为开发有效的纳米毒性评估方法开辟MLN8237细胞培养了新的思路和途径。

在“碳中和”的大背景下，污水生物处理过程中氧化亚氮（N_2O）的释放已经引起了人们的广泛关注，探究N_2O的产生机理和寻找缓解N_2O释放的策略也成为研究Auto-immune disease的热点.分析污水处理过程中能够产生N_2O的微生物及其特性，以及硝化过程和反硝化过程N_2O的产生机理，并从N_2O释放影响因素的角度总结缓解污水生物处理过程中N_2O释放的策略.随着对N_2O产生和消耗的研究不断深入，N_2O缓解释放的策略不再局限于工艺参数优化，微生物群落结构调控和Fer-1体内完全反硝化过程强化也成为N_2O减排策略研究的热点.生物处理硝化过程不能消耗N_2O，只能通过减少N_2O产生的方式来降低N_2O的排放；与硝化不同，N_2O是反硝化过程的中间产物，这也就意味着反硝化过程能够消耗N_2O，因此反硝化GW-572016使用方法过程作为N_2O的汇已经成为共识，如何有效促进反硝化过程是N_2O减量的重要途径.因此，可以通过改变微生物群落结构提高氧化亚氮还原酶（NOS）基因丰度来提升N_2O还原效率，添加生物炭调节电子分配实现完全反硝化过程，利用石墨烯促进反硝化酶活性提高N_2O的消耗等，以实现污水生物处理N_2O的减量排放.（图1表2参84）

目的 观察低剂量艾司氯胺酮(ESK)预处理对于肢体缺血再灌注损伤(LI/R)的作用。方法 对大鼠进行如下分组：sham组occult hepatitis B infection(即假手术组)、I/R组(即缺血再灌注组，对单侧肢体先实施3 h缺血处理，再实施2 h灌注)、ESK组(即ESK预处理组，经腹腔注入ESK,用量是5 mg/kg)。切取部分骨骼肌用于湿干重比检测；经由比色法测定血清内肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平；再对部分骨骼肌行冻存处理(-80℃),用于测定丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)及Western bselleckchem VX-445lot检测胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)、胞质血红素加氧酶购买NSC 127716(HO-1)蛋白的表达；通过免疫组化染色(IHC),对胞核Nrf2和胞质HO-1蛋白进行检测。结果 相较sham组，I/R组湿干比、CK、LDH、MDA、Nrf2和HO-1均上调，SOD下调(P<0.05);相较I/R组，ESK组湿干比、CK、LDH与MDA皆明显降低；而SOD、Nrf2和HO-1明显升高(P<0.05)。结论 艾司氯胺酮减轻骨骼肌缺血再灌注损伤，可能是通过提高细胞核内Nrf2水平，增强HO-1蛋白的表达来提升抗氧化的能力。

目的 对比研究耳穴压豆、针刺治疗肝郁化火型Erastin作用抑郁障碍合并失眠的临床疗效。方法 90例肝郁化火型抑郁障碍合并失眠患者,根据治疗方法不同分为药物对照组、耳穴压豆组、针刺组,各30例。药物对照组给予常规西药治疗,耳穴压豆组给予耳穴压豆治疗,针刺组给予针刺治疗。比较三组治疗前后的匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、副反应发生情况。结果 治疗后1、2、4周,耳穴压豆组PSQI评分分别为(12.11±1.37)、(9.85±1.33)、(5.34±0.98)分,针刺组PSQI评分分别为(12.16±1.71)、(9.76±1.41)、(5.32±1.03)分,均低于药物对照组的(13.01±1.25)、(11.42±1.56)、(9.17±1.21)分,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后1、2、4周,耳穴压豆组与针刺组PSQI评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后1、2、4周,耳穴压豆组HAMD评分分别为(15.55±1.36)、(9.75±1.34)、(3.65±1.22)分,针刺组HAMD评分分别为(15.53±1.21)、(10.17±1.20)、(3.78±1.17)分GSI-IX MW,均低于药物对照组的(19.76±3.34)、(13.56±1.7mediastinal cyst9)、(6.43±1.87)分,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后1、2、4周,针刺组与耳穴压豆组HAMD评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后1、2、4周,耳穴压豆组、针刺组副反应发生率低于药物对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后1、2、4周,耳穴压豆组与针刺组副反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 耳穴压豆、针刺治疗肝郁化火型抑郁障碍合并失眠疗效相当,患者耐受性均较好,值得推广。

目的：研究自拟壮骨益气汤联合伊班膦酸钠治疗老年骨质疏松性肱骨近端骨折（PHF）的临床疗效。方法：选取2020年1月—2022年6月我院收治的老年骨质疏松性PHF患者90例，按照随机数字表法分为观察组和对照组两组，每组各45例。两组术后均行常规治疗，其中对照组术后1 d给予伊班膦酸钠注射液mediastinal cyst；观察组术后1 d行自拟壮骨益气汤内服，联合伊班膦酸钠注射液治疗。连续观察12周。比较两组患者肩关节肿痛与功能改善、骨折愈合时间、骨折愈合治疗效果、氧化应激指标血清血红素加氧酶-1(HO-1)与超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果：治疗12周后，两组肩关节运动疼痛（VAS）评分、肿胀、肩关节功能康斯坦特（Constant）评分比较差异有统计学意义（t=10.609、6.548、2.801，均P <0.05）；治疗12周后，两组腰椎正位（L2-4）、右跟骨的骨密PLX-4720临床试验度与骨折愈合时间差异有统计学意义（t=2.030、2.187、7.029，均P <0.05）；治疗12周后，观察组的骨折愈合总有效率（88.89%）高于对照组（68.89%），差异有统计学意义（χ2=4.270,P <0.05）；CL13900供应商治疗1周后，两组血清HO-1、SOD水平比较差异有统计学意义（t=10.073、7.138,P <0.05）。结论：自拟壮骨益气汤联合伊班膦酸钠治疗有助于老年骨质疏松性PHF术后患者肩关节功能的康复，提高骨密度，促进骨折愈合，以及改善氧化应激反应。

【背景】印染废水的出水温度高，抑制了微生物对偶氮染料的降解，而关于嗜热菌在高温下降解偶氮染料的报道较少。【目的】富集能在高温下降解偶氮染料的嗜热微生物菌群，并研究其降解潜力和基因组特征。【方法】通过富集的方法获得嗜热微生物菌群，利用分光光度法测定其降解特性；采用全波长扫描、傅里叶变换红外吸收光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)和气相质谱(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)分析其降解机理；采用植物毒性的方法比较偶氮染料降解前后的毒性；采用高通量测序技术分析其功能基因和群落Z-IETD-FMK纯度结构。【结果】该菌群(SD1)可以在65℃降解偶氮染料，Caldibacillus、unclassified＿f＿＿Bacillaceae、Geobacillus等为优势属，在降解过程中起关键作用；菌群SD1能在较宽泛的p H (5.0-9.0)、温度(50-75℃)、染料浓度(100-5hepatic transcriptome00 mg/L)和盐度(1%-5%)降解酸性大红GR；偶氮还原酶和NADH-DCIP是主要的降解酶，GC-MS和FTIR结果selleckchem MK-4827表明菌群SD1通过偶氮键断裂降解酸性大红GR；植物毒性的结果表明，经菌群SD1脱色后酸性大红GR的毒性降低；与降解有关的功能基因有依赖NADH的黄素单核苷酸(flavin mononucleotide,FMN)偶氮还原酶基因和依赖FMN的还原酶基因。【结论】嗜热菌群SD1在处理高温印染废水中具有很大的应用潜力。