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研究背景与目的脑肿瘤流行病学统计发现,原发性脑肿瘤约占所有癌症的2%,其发病随着年龄的增长而增加,其中32%为恶性脑肿瘤,68%为非恶性脑肿瘤。脑胶质瘤是最常见的原发性恶性肿瘤,产生于大脑及脊Bioaccessibility test髓胶质细胞的癌变。因脑胶质瘤具有高发病率、高复发率、高死亡率以及低治愈率等特点成为当下肿瘤领域研究的热点。目前脑胶质瘤的治疗过程中应用的一线药物主要为替莫唑胺,还有其他治疗方案如PCV化疗方案(甲基苄肼(Procarbazine,PCZ),长春新碱(vincristine,VCR),洛莫司汀(lomustine,CCNU))。针对脑胶质瘤的治疗药物缺乏,患者愈后差、生存期短等问题,寻找新的药物具有很重要的治疗意义。研究发现吲哚类化合物在对抗肿瘤中是通过影响多种靶点来发挥作用的,包括影响蛋白质、核酸、血管生成、Compound 3分子量侵袭转移、同时可以调控多种信号转导通路等,具有重要的研究意义及广阔的应用前景,在抗癌药开发中也一直深受关注,且已有研究发现吲哚类药物也可透过血脑屏障作用于脑瘤。因此本文选择了实验室中吲哚类系列活性化合物进行筛选,发现化合物3r具有较好的抗脑胶质瘤作用,并深入研究化合物3r在体内外对脑胶质瘤增殖、侵袭、迁移、血管生成的影响,探讨了化合物3r对脑胶质瘤的潜在治疗作用及作用机制。实验方法和结果1.采用MTT方法,顺铂(Cisplatin,DDP)作为阳性对照药,筛选抗脑胶质瘤活性化合物及脑胶质瘤敏感细胞株。结果发现化合物3r活性最强,对U87和U251细胞的抑制作用优于C6细胞。2.采用MTT方法,顺铂作为阳性对照药,检测了化合物3r对多种人正常细胞(HUVECs、bEnd.3、NHA)的细胞毒性,结果发现化合物3r具有较低的细胞毒性。3.在倒置荧光显微镜下观察化合物3r对U87和U251细胞形态的影响。结果发现,化合物3r可改变细胞的形态,使细胞由扁平变圆,且碎片化增多。4.采用克隆形成实验检测化合物3r对U87和U251细胞增殖及克隆形成能力的影响,结果发现化合物3r浓度依赖性地抑制克隆形成能力。5.采用Transwell实验、划痕实验检测化合物3r对U87和U251细胞侵袭、细胞迁移能力的影响,Western blot方法研究了相关蛋白表达水平的变化。结果发现化合物3r浓度依赖性地降低细胞内N-cadherin、MMP9和MMP2蛋白表达,增加E-cadherin蛋白表达,显著抑制细胞EMT过程,从而抑制侵袭迁移能力。6.采用血管生成拟态(vasculogenicmimicry,VM)实验,检测化合物3r对U87和U251细胞拟态血管生成能力的影响。实验表明,化合物3r对U87和U251细胞的拟态血管生成具有明显抑制作用。7.通过计算机模拟技术、分子模拟软件Schrodinger将化合物3r与多种相关蛋白进行分子模拟对接,发现化合物3r与微管蛋白以及GSK3β结合。8.采用Western blot方法检测化合物3r抑制U87和U251细胞侵袭、迁移能力的分子机制。结果发现,化合物3r通过调控GSK3β/β-catenin信号通路Bafilomycin A1临床试验,使GSK3β蛋白表达水平降低,β-catenin表达下降,进而减少β-catenin入核影响EMT过程抑制细胞侵袭迁移。9.通过免疫荧光实验检测化合物3r对U87和U251细胞微管组织的影响。化合物3r对细胞周期及周期相关蛋白的变化采用PI染色法,流式细胞仪和Western blot方法检测。结果显示,化合物3r能够浓度依赖性地抑制U87和U251细胞的微管形成,可以将细胞阻滞在G2/M期,其作用与降低G2/M期蛋白Cyclin B1、CDK1的表达水平有关。10.通过Hoechst 33342染色法定性,AnnexinV-FITC/PI双染法定量检测化合物3r对脑胶质瘤细胞U87和U251细胞凋亡的影响,Western blot方法检测了细胞凋亡蛋白表达水平的变化。Hoechst 33342染色法、AnnexinV-FITC/PI双染法检测表明,化合物3r可以促进U87和U251细胞的凋亡,增加Bax表达水平,使Bcl-2表达水平下调。11.采用吖啶橙(acridineorange,AO)染色法,检测化合物3r对脑胶质瘤细胞U87和U251细胞自噬的影响。结果发现,化合物3r对U87和U251细胞自噬的影响不明显。12.采用Chemdraw及ADMET软件预测化合物3r透过BBB的动力学性质。通过体外细胞摄取实验,质谱成像代谢组学检测化合物3r透过血脑屏障(BBB)的能力。结果发现,化合物3r具有透过BBB的动力学性质,在体外可以被脑微血管内皮细胞及脑胶质瘤细胞所摄取,同时化合物3r可透过血脑屏障分布在脑内,积累于脑肿瘤部位。13.建立裸鼠U87细胞原位脑胶质瘤的模型,通过小动物活体成像系统检测化合物3r对裸鼠U87细胞原位脑胶质瘤生长的影响。实验结果证实,随着化合物3r浓度的增加,对脑内肿瘤的抑制作用越来越显著。实验结论化合物3r对高侵袭性脑胶质瘤细胞的生长和侵袭迁移具有较好地抑制作用,可抑制脑胶质瘤U87和U251细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成等。作用机制研究发现,化合物3r可抑制微管组织的形成、影响其结构促进细胞G2/M期阻滞并且诱导细胞凋亡。另外化合物3r对脑胶质瘤高侵袭性特点的抑制作用与β-catenin上游GSK3β的结合有关,该作用是通过影响β-catenin的表达,降低β-catenin的入核进而抑制EMT过程发挥。两方面的作用机制介导了其抑制脑胶质瘤增殖和迁移作用。但是化合物3r与GSK3β分子结构中的结合位点及更深入的机制还需进一步探讨。研究意义本论文在筛选了系列吲哚类化合物的抗脑胶质瘤活性基础上,研究了活性化合物3r对脑胶质瘤的治疗作用。通过一系列体外实验及体内实验验证其抗高侵袭性脑胶质瘤的作用,并寻找化合物新的作用靶点GSK3β,进一步对化合物3r治疗脑胶质瘤的机制进行了探讨。为化合物3r成为一种新型靶向抑制剂用于脑胶质瘤治疗提供了理论与实验依据,对系列吲哚类化合物进一步的修饰合成开发提供新的思路。

目的:分析肺鳞癌患者基因变异谱及免疫治疗反应。方法:回顾分析254例肺鳞癌患者的临床特征、基因检测、PD-L1结果、免疫治疗随访。198例提供肿瘤标本，56例提供血浆。103例进行PD-L1检测。结果:突变频率最高的肺癌相关基因有TP53、EGFR、PIK3CA、FGFR、MET、KRAS、ERBB2。44例泛癌种panel基因检测的样本中位TMB是13.5 mut/Mb,组织样本的TMB显著高于血浆样本。与血浆相比，TP53、EGFR、PIK3CA和ERBB2变异在组织样本中更常见。血浆和组织中检测的驱动基因变异类型相似，但血浆样本中更多耐药相关变异。PD-L1表达<1%、1%～49%和≥50%的样本比例分别为30.1%、48.5%和21.4%。PD-L1表达与临床特征无明显相关性。12例患者接受免疫治疗，客观缓解率为16.7%,疾病控制率为66.7%。PD-L1阳性或TMB高的患者免疫治疗疾病控制率Breast cancer genetic counseling更好。结论:该研究揭示了点击此处肺鳞癌患者特异的基Baf-A1体内实验剂量因变异谱，证实了液态活检在临床中的应用价值。基因检测能够指导肺鳞癌患者按照个体化情况选取合适的靶向治疗，实现精准医学的实践。

皮肤病理教学大纲是开展教学AZD2281抑制剂活动的重要依据，严格落实大纲要求方能保证教学质量。优秀的大纲对提高培训质量非常重要。本研究在分析2版教学大纲的演变后，基于临床教学实践Functional Aspects of Cell Biology对大纲修订及落实大纲的举措提出建议。大纲修订方面包括：(1)调整需掌握的疾病种类，纳入青斑样血管病、蕈样肉芽肿和麻风，替换掉虫咬皮炎、多形红斑和黑变病，陈述调整的理由；(2)增加对直接免疫荧光的教学要求；(3)明确需掌握的特殊染色和免疫组化标记种类；(4)识图考核与病理文字描述考核并重等。落实大纲举措方面包括：(1)提出目前皮肤病理教学面临的最主要问题是教学师资分布不均衡、住院医师基础知识较薄弱且学习动力不足，以及缺乏持续性的皮肤病理教学体系；(2)对应策略包括建立皮肤病理区域协同培养机制、在阅片带教中使用大体模式教学法、举办住院医师皮Elexacaftor核磁肤病理大赛及开展每周皮肤病理组会学习新近的典型案例。

目的 探究深静脉血栓模型大鼠采用利伐沙班（rivaroxaban, RVXB）对下肢静脉血栓调节蛋白及中性粒细胞招募的影响。方法 选用SD大鼠，采用下腔静脉结扎制作深静脉血栓模型，灌胃RVXB进行治疗Microlagae biorefinery；用尼罗红标记含有脂质的血栓，测定同等单位血管内血栓的体积；Trichostatin A采购免疫荧光检测下肢静脉内血栓调节蛋白（thrombomodulin,TM）和溶解型血栓调节蛋白（soluble-thrombomodulin,s-TM）的表达以及中性粒细胞招募。结果 与模型组相比，治疗组血栓体积在术后3 d显著降低，以及在术后7 d显著降低；免疫荧光检测结果显示，治疗组大鼠下肢静脉的s-TM、TM表达得到显著改善，并且被Ly6G标记的中性粒细胞的招募被显著抑制。结论 TM的表达情况可反映深静脉血栓的进展，采用利伐沙班，可有效降低深静脉血栓模型大鼠血栓体积和其诱导的下肢静脉s-TM、TM的表达和中性粒细胞diABZI STING agonist体内实验剂量招募水平。

炎症性皮肤病是指由炎症反应引起的皮肤疾病，可引起不同程度的皮肤损害和瘙痒、疼痛等症状，给患者心理、生活质量造成严重负面影响，且症状易反复发作，临床治疗难度较大。苦参及其活性成分通过上调细胞因子信号传导抑制蛋白1的表达，以抑制Janus激酶/信号转导和转录激活因子3信号通路活化，抑制热激蛋白90/核因子κB信号通路活化，激活丝裂原活化蛋白激酶信号通路，调节免疫平衡，减少辅助性T细胞2型细胞因子的表达，抑制辅助性T细胞17介导的炎症反应，降低蛋白酶激活受体-2的表达，下调肿瘤坏死因子-α的表达，降低炎症反应，减轻皮肤炎症症状。苦参及其活性Trichostatin A浓度成分通过调控离子通道减轻瘙痒症状。苦参及其活性成分可抑制角质细胞增殖，阻止皮肤过度角化。苦参及其活性成分可促进上皮细胞凋亡，减轻表皮过度增殖。苦参及其活性成分可增强抗氧化确认细节作用，减轻皮肤氧化应激损伤Tuberculosis biomarkers。本研究综述了苦参及其活性成分在炎症性皮肤病的研究报道，为炎症性皮肤病的治疗提供依据。

抑郁症是一种常见的精神障碍,具有高自lethal genetic defect杀、高致残风险,对患者的生活和工作造成严重的负面影响,加重了家庭和社会的经济负担.在全球新型冠状病毒感染大流行期间,抑郁症的复发率和患病率显著上升,国家卫生和计划生育委员会等部www.selleck.cn/products/ag-221-enasidenib门将抑郁症的防治列入我国精神卫生工作的重点.抑郁症患者机体处于炎症和应激状态,肠道菌群发生紊乱.肠道菌群结构和组成的改变可能是抑郁症的潜在影响因素,其可作为抗BAY 73-4506抑郁治疗的靶点,在缓解和治疗抑郁症方面有一定的效果.本文综述了肠道菌群基于“肠-脑”轴在抑郁症炎症反应、氧化应激中发挥的作用,抗抑郁药与肠道菌群之间的相互作用以及其他通过调节肠道菌群抗抑郁的疗法,如饮食疗法、益生菌、益生元、后生元、粪便移植等,以期为促进以肠道菌群为靶点治疗抑郁症的精准医学发展提供参考.

目的 比较丙泊酚复合艾Cobimetinib核磁司氯胺酮或芬太尼应用于无痛人工流产术的效果。方法 选取2021年2月—2021年5月在清远市人民医院静脉全麻下行人工流产术的患者60selleck CCRG 81045例，采用随机数表法将患者分为A、B两组。A组：丙泊酚复合艾司氯胺酮组（30例），B组：丙泊酚复合芬太尼组（30例）。A组患者静脉注射艾司氯胺酮0.2 mg/kg、丙泊酚1.5 mg/kg,B组静脉注射芬太尼1μg/kg、丙泊酚1.5 mg/kg。分别记录两组患者术中丙泊酚用量，需要追加丙泊酚的例数，苏醒时间，采用疼痛数字评分法（NRS）评价两组患者苏醒后5 min、15 min、30 min静息和活动时子宫收缩痛的程度。记录与镇静相关的不良事件（低氧血症、心动过缓、恶心呕吐等）发生情况。结果 与B组相比，A组患者丙泊酚用量、丙泊酚追加例数、苏醒时间明显减少（P<0.05）。A组苏醒后5 min、15 min、30 min活动时NRS评分明显降低（P<0.05）。A组低氧血症bio distribution、心动过缓、需要开放气道干预发生率明显低于B组（P<0.05）。结论 丙泊酚复合艾司氯胺酮可以减少无痛人工流产术中丙泊酚用量，提高术后镇痛效果，不良反应较少，值得在妇科门诊手术中应用。

目的:本研究使用氯化锂-匹罗卡品诱导6周龄雄性C57BL/6J小鼠癫痫发作,检测小鼠癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)后不同时期(0天、2周、6周)与相应正常对照组小鼠相比海马组织中线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ(Mitochondrial ComplexⅠ、Ⅲ、Ⅳ,ComplexⅠ、Ⅲ、Ⅳ)活性改变、ComplexⅠ、腺嘌呤核苷三磷酸(Adenosine triphosphate,ATP)浓度变化、线粒体膜电位(mitochondrial transmembrane potential,ΔΨm)损伤情况及腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine5’monophosphate(AMP)-activated protein,AMPK)α不同亚基(AMPKα、AMPKα1、AMPKα2)蛋白水平表达变化,探讨在癫痫中AMPKα1对线粒体代谢功能影响的机制。采用苏木精-伊红染色(Hematoxylineosin staining,HE)染色方法,展示海马(Hippocampal,HP)CA1区、CA3区、DG区神经元细胞数量、形态变化,检测癫痫6周小鼠海马神经元细胞的变化。应用行为学相关实验检癫痫模型小鼠运动、社交及学习记忆能力。通过透射电镜技术,观察海马组织CA1区线粒体的超微结构变化。条件性过表达慢性癫痫模型小鼠,升高AMPKα1表达水平,观察慢性癫痫小鼠线粒体功能障碍及学习记忆能力减弱现象能否改善。方法:(1)54只健康6周龄雄性C57小鼠,按照SE后不同时期(0天、2周、6周)分为6组每组9只分别为正常对照组(0天、2周、6周)及癫痫模型组(0天、2周、6周),实验小鼠质量20g左右;(2)通过腹腔注射氯化锂-匹罗卡品(Lithium chloride–Pilocarpine,Li-Pilo)构建经典的颞叶癫痫SE模型,而正常对照组小鼠给予对应剂量氯化锂、地西泮注射,其余药品则被替换成相同体积的生理盐水。癫痫发作IV级或以上(持续30分钟)可纳入研究对象;(3)癫痫小鼠systemic autoimmune diseases造模成功后,0天,2周和6周海马组织标本均在同一时间段采集后进行实验;(4)蛋白免疫印迹实验(Wetern-blot,WB)检测海马AMPKα不同亚基的蛋白表达水平;(5)酶联免疫吸附实验(Elisa)实验检测小鼠海马组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性及ComplexⅠ、ATP浓度的变化趋势;(6)组织线粒体分离试剂盒提取纯化线粒体,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位水平的变化趋势;(7)HE染色检测海马细胞形态及数量变化;(8)透射电镜实验线粒体超微结构变化;(9)使用SPSS26.0统计软件分析实验数据;(10)健康6周龄雄性小鼠(20g±1.5g)36只,分为正常对照组、癫痫模型组、AMAZD6738使用方法PKα1条件性过表达组、AMPKα1条件性过表达癫痫模型组,腹腔注射氯化锂-匹罗卡品(,Li-Pilo)建立经典的颞叶癫痫SE模型,正常对照组生理盐水代替;(11)利用Flox(+/-)与Cre工具鼠交配繁育AMPKα1条件性过表达小鼠,小鼠出生后2周剪耳标记后剪尾(1cm左右);(12)试剂盒提取鼠尾组织中脱氧核糖核酸(Deoxyribo Nucle Acid,DNA),聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增,使用琼脂糖凝胶电泳实验进行初步基因型验证;(13)待基因小鼠6周龄时进行癫痫造模,造模成功6周后,行为学相关实验检测运动能力、认知功能、学习记忆能力、社交能力后断头取脑收集组织标本。(11)健康6周龄雄性小鼠(20g±1.5g)16只,分为正常对照组、癫痫6周模型组、正常对照组+A484954、癫痫6周模型组+A484954,腹腔注射氯化锂-匹罗卡品(Li-Pilo)建立经典的颞叶癫痫SE模型,正常对照组生理盐水代替;正常对照组和癫痫模型小鼠造模6周后给予腹腔注射A484954,疗程14天,其余各组注射相同浓度体积和疗程的5%DMSO。疗程结束,提取海马组织,通过蛋白免疫印迹实验检测AMPKα1表达变化。结果:(1)慢性癫痫小鼠海马组织AMPKα不同亚基蛋白表达降低;(2)慢性癫痫小鼠海马组织线粒体功能损伤严重;(3)慢性癫痫小鼠海马组织线粒体超微结构损伤严重;(4)AMPKα1表达水平与线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性密切相关;(5)AMPKα2表达水平与线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ活性密切相关与点击此处Ⅳ无关;(6)慢性癫痫小鼠海马组织脑细胞形态结构损伤严重、数量显著降低;(7)敲入AMPKα1基因治疗后慢性癫痫小鼠运动能力恢复正常;(8)AMPKα1条件性过表达慢性癫痫小鼠社交能力恢复正常;(9)AMPKα1条件性过表达后慢性癫痫小鼠认知功能恢复正常;(10)AMPKα1条件性过表达慢性癫痫小鼠学习与记忆能力改善。(10)注射真核细胞延伸因子2激酶(Eukaryotic elongation factor 2 kinase,e EF2K)抑制剂A484954后慢性癫痫小鼠海马组织AMPKα1表达水平恢复至正常水平。结论:(1)SE后海马AMPKα1表达下降可能与线粒体功能障碍密切相关,为减轻癫痫后线粒体功能损伤和神经保护的发展提供了新展望;(2)升高AMPKα1表达水平后,改善癫痫小鼠线粒体功能及学习、记忆、认知、社交能力。(3)AMPKα1过表达恢复慢性癫痫小鼠记忆能力可能与e EF2K信号通路有关。

目的 分析不同粒径微塑料和纳米塑料对犬肾上皮(MDadult oncologyCK)细胞的毒性作用,探究其引起MDCK细胞氧化应激的影响因素。方法体外培养MDCK细胞至对数生长期,将其分为对照组、聚苯乙烯(PS)组、聚乙烯(PE)组。以终浓度为0、5、10、50、100、200μg/ml的PS(粒径分别为0.1μm和10μm)和PE(粒径分别为10μm和50μm)悬液分别处理MDCK细胞,24h后,采用细胞增殖试剂盒(CCK8法)测定细胞的活力。以终浓度为0、5、50、100μg/ml的PS悬液(0.1μm和10μm)和0、5、50、100μg/ml的PE悬液(10μm和50μm)处理处于对数生长期的MDCK细胞,24h后,采用试剂盒检测细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,将结果与对照组进行比较。结购买CL 318952果 PS和PE悬液处理24h后,随着粒径和浓度增大,MDCK细胞活力降低。不同浓度的PS处理下,MDCK细胞SOD活力升高,GSH含量下降,0.1μm组GSH-Px活力下降,10μm组GSH-Px活力升高,MDA含量升高;不同浓度的PE处理下,MDCK细胞SOD活力升高,GRepSox核磁SH含量下降,GSH-Px活力升高,MDA含量升高。结论微塑料和纳米塑料暴露导致MDCK细胞活力下降并诱导氧化应激反应。

目的:通过实用性随机对照试验,探讨解毒利咽方治疗IgA肾病毒聚咽喉证的有效性和安全性。方法:本研High-Throughput究应用前瞻性实用性随机对照试验的临床研究方法。根据纳排标准从我院2021年8月-2022年10月肾病科门诊的患者中筛选IgA肾病患者72例,根据随机数字表法分为两组,即治疗组以及对照组,每组分别为36例。治疗组接受基础治疗和“解毒利咽方”治疗,对照组只接受基础治疗(以饮食治疗及ACEI治疗为基础,合并难以纠正的高血压者在ACEI基础上,加用CCB类药物,合并感染者进行抗炎治疗)。两组疗程均为1个月,详细记录两组患者治疗前、治疗后的症状及体征改变,然后进行量化评分,并记录患者的尿常规(尿红细胞计数)、24h尿蛋白定量、肾功能等实验室指标。最后用统计学软件SPSS 22.0对所收集的数据进行分析。结果:1.在中医证候疗效对比方面,治疗组可达87.88%的有效Barasertib率,对照组可达Elexacaftor作用75.00%的有效率,治疗组的疗效较对照组疗效更佳,且有统计学意义(P<0.01)。2.在临床疗效对比方面,治疗组可达93.94%的有效率,对照组可达71.88%的有效率,治疗组的疗效较对照组疗效更佳,且有统计学意义(P<0.01)。3.在中医证候积分方面,两组主要症状均有缓解(组内和组间对比P<0.05),且治疗组在咽喉肿痛、咽部异物感、面浮肢肿上缓解更加明显(组间对比P<0.01)。两组次要症状在咳嗽、头痛、发热恶寒、口干咽燥、夜尿、眩晕、大便稀方面均有缓解(组内对比P<0.05);治疗组在口干咽燥缓解更加明显(组间对比P<0.01)。4.在尿红细胞计数和24小时尿蛋白定量方面,与治疗前相比,两组均有显著降低(组内对比P<0.01),且治疗组较对照组降低更为显著,有统计学意义(组间对比P<0.05)。5.在尿素氮、血肌酐、肾小球滤过率(e GFR)方面,与治疗前相比,两组均没有统计学意义(组内和组间对比P>0.05)。结论:1.解毒利咽方对IgA肾病毒聚咽喉证患者的临床症状有明显的缓解作用。2.解毒利咽方能减少IgA肾病毒聚咽喉证患者尿红细胞计数和24小时尿蛋白定量。3.解毒利咽方治疗IgA肾病毒聚咽喉证安全有效,充分发挥了中医药辨证论治的特点。