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甘蓝型油菜(Brassica napus L.)是我国主要的油料作物,是食用油的重要来源。菜籽油的品质与油菜籽粒颜色密切相关,相对于黑籽油菜,黄籽油菜具有蛋白质含量高、种皮薄、油质清澈的特点,黄籽油菜是主要的育种目标。黄色籽粒的形成是由于种皮内皮层类黄酮物质原花青素合成受阻,种皮缺少色素而呈现种胚的颜色即黄色。甘蓝型油菜在自然种质中无黄籽资源,且遗传背景复杂,得到稳定遗传的甘蓝型黄籽油菜十分困难。目前甘蓝型油菜关于粒色的研究,大部分是以拟南芥类黄酮途径为基础,在油菜中找到其同源基因并进行验证。但甘蓝型油菜是异源四倍体,存在大量同源基因,与拟南芥相比,粒色调控机制更为复杂。前期已经通过QTL定位与全基因组关联分析找到一些重要QTL位点与相关候选基因,但候选基因功能并未进行验证,油菜粒色调控网络仍然需要完善。因此,挖掘调控油菜粒色的关键基因,解析甘蓝型油菜粒色的分子调控机制对育成高品质油菜具有重要意义。本研究通过对甘蓝型油菜中双11不同发育时期的种皮进行转录组共表达分析,发现了一个hub基因BnaC03.MYB56,可能参与苯丙烷合成途径、花青素与原花青素合成途径,目前BnaC03.MYB56在甘蓝型油菜中是否参与类黄酮途径物质合成还未见报道。本研究围绕BnaC03.MYB56在甘蓝型油菜种皮色素合成中的生物学功能进行初步探究,主要结果如下:(1)通过对中双11不同时期组织器官转录组数据和定量PCR结果进行分析,甘蓝型油菜中MYB56的六个同源基因,BnaC03.MYB56与BnaA03.MYB56两个基因在花后20-30天的种皮中高水平表达,且BnaC03.MYB56基因表达水平最高,此外在花、根中仅有少量表达。将BnaC03.MYB56基因启动子与带有GUS标签的表达载体融合并转化野生型拟南芥,对纯合转基因拟南芥进行GUS染色,在早期的种子、苗期的根、毛状体和花序中检测到较强GUS信号,与定量结果基本一致。亚细胞定位结果表明BnaC03.MYB56定位于细胞核中,转录活性分析显示BnaC03.MYB56具有较高的转录抑制活性。(2)我们构建BnaC03.MYB56超表达载体转化野生型拟南芥,观察其表型。与野生型拟南芥相比,突变体拟南芥未发现显著表型差异,但超表达拟南芥种子颜色偏黄,种皮色素积累减少;利用香草醛进行种子染色,发现超表达种子染色更浅;进一步利用UPLC-HESI-MS/MS对超表达种子进行次生代谢物分析,结果发现表儿茶素与原花青素的三种复合体含量显著减少。此外,超表达植株整体长势较弱,叶片小且卷曲,根系短,侧根发育异常,表明BnaC03.MYB56能影响拟南芥生长发育。(3)通过遗传转化和组织培养获得BnaC03.MYB56超表达油菜,表型分析发现超表达油菜花后25天的种子经过香草醛染色后,比对照的染色更浅。进一步对其进行UPLC-HESI-MS/MS检测,所检测selleck激酶抑制剂到的差异代谢物主要包括类黄酮类物质,其中表儿茶素与原花青素的五种复合体均显著减少,此外以山奈酚与芥子酸为标量的相关物质含量同样减少,而以槲皮素为标量的物质含量增加,但并不显著,结果表明BnaC03.MYB56影响油菜种子类黄酮物质和原花青素合成。(4)构建BnaC03.MYB56及其同源基因的敲除载体,通过遗传转化与组织培养获得了25棵植株,经靶点序列检测得到一株敲除成功的油菜以待后续研究。(5)我们对对照和超表达油菜种子进行转录组测序,KEGG分析结果表明,差异表达基因主要富集在苯丙烷合成途径、淀粉蔗糖代谢途径和类黄酮合成途径。我们筛选出BnaC03.MYB56下游调控的候选靶基因BAN2、CHIL2、4CL、LDOX、FLS2与DFR1,启动子分析结果显示,这些基因均具有MYB结合位点。q RT-PCR表明,相较于对照,所有候选靶基Entinostat体外因在超表达油菜中的表达水平均显著下调。我们对对照和超表达拟南芥类黄酮途径关键基因的表达水平进行q RT-PCR检测,发现At PAL、At C4H、At4CL、At CHI、At BAN、At LDOX、At DFR、At TTG1和At TT8均下调表达,表明BnaC03.MYB56通过负调控类黄酮途径相关基因表达减少原花青素及其衍生物的合成。通过Y2H和Bi FC实验发现BnaC03.MYB56与类黄酮调节因子BnaMYB61、根系发育蛋白BnaMYB77、木质素相关蛋白BnaMYB54以及功能未知蛋白Bnab HLH96相互作用。综上所述,BnaC03.MYB56能负调控类黄酮途径关键基因的转录水平,从而减少类黄酮和原花青素等物质的含量使种皮色素积累减少。BnaC03.MYB56在甘蓝型油菜粒色形成中具有重要意义,其分Cometabolic biodegradation子作用机制还需继续探究。

目的：观察富含血小板凝胶联合生肌玉红膏治疗糖尿病足创面的临床疗效。方法：选取平顶山市中医医院门诊及住院治疗的符合纳入标准的60例糖尿病足患者，按照随机数字表法随机分为两组，对照组30例，治疗组30例。治疗组给予富含血小板凝胶联合生肌玉红膏外用治疗，对照组给予生肌玉红膏外用治疗。两组均治疗2个疗程（14 d为一个疗程）。统计分析对照组和治疗组患者治疗前及治疗2个疗程结束后血清中炎性指标[白细胞计数（White Blood Cell Count,WBC）、C反应蛋白（C-reactive Protein,CRimmunocompetence handicapP）]、创面愈合有效率、创面面积变化及创PD-0332991研究购买面各症状体征积分变化等。结果：对照组中创面愈合总有效率为90.00%(27/30)，治疗组中创面愈合总有效率为96.67%(29/30)，治疗组创面愈合疗效优于对照组（P <0.05）。治疗2个疗程结束后两组糖尿病足患PF-07321332研究购买者创面面积均下降，治疗组创面面积情况优于对照组（P <0.05）；两组血清中炎性指标（WBC、CRP）均降低，治疗组炎性指标降低程度优于对照组（P <0.05）；两组创面各症状体征积分均下降（P <0.05），且治疗组优于对照组（P <0.05）。结论：富含血小板凝胶联合生肌玉红膏治疗糖尿病足创面效果显著，能明显改善患者临床症状，改善患者创面感染情况，减少创面的渗出，增加创面肉芽组织生长，提高创面愈合率，减轻患者及患者家属的经济及心理负担。

目的 分析老年良性前列腺增生(BPH)合并混合痔患者术后尿潴留的影响因素。方法 选取2020年1月—2023年5月安庆市中医医院收治的194例老年BPH合并混合痔患者。根据患者外剥内扎术术后是否发生尿潴留分为尿潴留组(n=72)和非尿潴留组(n=122)。比较2组的临床资料、术后24 h视觉模拟评分法(VAS)及术后24 h焦虑自评量表(SAS)评分。分析患者术后尿潴留的影响因素，构建术后尿潴留的人工神经网络模型，并对模型的效能进行验Infection and disease risk assessment证。结果 与非尿潴留组比较，尿潴留组便秘者和镇痛泵使用者较多，术前空腹血糖(FBG)更多水平较高，手术时间较长，静脉补液量较大，术后24 h VAS和SAS评分较高(P<0.05)。多因素分析结果显示，便秘、术前FBG升高、手术时间长、静脉补液量大、术后使用镇痛泵、术后24 h VAS和术后24 h SAS评分升高均为老年BPH合并混合痔患者术后尿潴留的独立危险因素(P<0.05)。人工神经网络预测模型的区分度良好，该模型的曲线下面积为0.733(95%CI:0.663～0.804,P<0.001);灵敏度为83.33%(60/72),特异度为85Liproxstatin-1小鼠.25%(104/122)。结论 便秘、术前FBG升高、手术时间长、静脉补液量大、术后使用镇痛泵、术后24 h VAS和术后24 h SAS评分升高可能是老年BPH合并混合痔患者术后尿潴留的影响因素。

目的:分析人工耳蜗再植入患儿的临床特点，总结术中的各种问题和应对措施，为人工耳蜗再植入手术以及为避免出现相关问题而在初次植入中应注意的事项提供参考。方法:回顾性分析2018年7月—2022年7月在北京大学第三医院耳鼻咽喉科行人工耳蜗再植入术的32例患儿资料，再植入距离初次植入的时间为1～8年。术后4周重新开机，评估人工耳蜗工作情况及患儿听觉情况。结果:术中特殊情况包括不同程度及部位的骨质增生(其中2例耳蜗造孔骨质增生明显，1例导线骨槽骨质增生明显)32例、重PCI-32765体内要骨性结构(包括骨性外耳道后壁、面神经乳突段骨管、接收-刺激器骨床等)缺损5例、胆脂瘤形成1例、术腔其他病变或异物4例、耳蜗内电极位置异常(部分脱出或电极背向蜗轴)4例等。均顺利完成再植入手术，无并发症发生，术后恢复及开机均顺利。结论:在初次人工耳蜗植入时Lorlatinib分子量应注意尽量保留残余听力、充分考虑术后骨质增生可能、避免大量应用不可吸收粘合材料、避免面神经管及外耳道后壁等重要结构损伤、植入电极时注意深度及朝向等。在人工耳蜗再植入术中应充分考ITI immune tolerance induction虑上述“隐性损伤”的可能性，避免发生新的损伤或并发症。

目的 研究积雪草酸对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）小鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制。方法 将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、柳氮磺胺吡啶组（450 mg·kg~(-1)）及积雪草酸低、高剂量组（3、30 mg·kg~(-1)），每组6只。小鼠自由饮用2.5%DSS溶液诱导建立UC模型，采用小鼠体质量变化及疾病活动指数（DAI）评分来评价造模效果。采用苏木素-伊红（HE）、过碘酸雪夫染色（PAS）法观察结肠组织病理变化；ELISA法检测小鼠血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β水平；RT-qPCGenetic selectionR法检测小鼠结肠组织中黏蛋白2(MUC2)、claudin-1、occludin、闭锁小带蛋白1(ZO-1)mRNA表达；Western Blot法检测小鼠结肠组织中MUC2蛋白表达；免疫组化法检测小鼠结肠组织中claudin-1、occludin、ZO-1表达。结果 与空白组比较，模型组小鼠的体质量显著下降（P<0.01）,DAI评分显著升高（P<0.01）；模型组小鼠的结肠隐窝结构严重丧失，杯状细胞结构破坏严重；血浆TNF-α、IL-6、IINCB018424化学结构L-1β水平显著升高（P<0.01）；结肠组织MUC2蛋白表达及MUC2、claudin-1、occludin、ZO-1 mRNA表达显著下调（P<0.01）；结肠组织中claudin-1、occludin、ZO-1阳性细胞表达显著减少（P<0.01）。与模型组比较，积雪草酸低、高剂量组小鼠的体质量显著增长（P<0.01）,DAI评分显著下降（P<0.01）；结肠隐窝结构恢复，炎性浸润减轻，杯状细胞结构和数量明显恢复；血浆TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显下降（P<0.05,P<0.01）；结肠组织MUC2蛋白表达及MUC2、claudin-1、occludin、ZO-1 mRNA表达明显上调（P<0.05,P<0.01）；结肠组织claudin-1、occludin、ZO-1阳性细胞表达明显增加（P<0.05,P<0.01）。结论 积雪草酸对DSS诱导的UC小鼠结肠组织病理损伤具有明显改善作用，可能与其上调MUC2selleckchem PF-07321332及紧密连接蛋白的表达，保护肠黏膜屏障的完整性有关。

背景低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary arterial hypertension, HPH)是一种以血管阻力持续性升高和血管重塑为特征的进展性疾病。研究表明Hoxa1参与血管生成过程，但Hoxa1在调控肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中的作用尚不明确。目的 本研究旨在确定Hoxa1对PASMCs增殖、迁移以及表型转化的调控作用。方法 使用Ⅱ型胶原酶消化分离培养原代大鼠PASMCs。采用1%低氧处理细胞构建低氧诱导的细胞模型，并检测24h、48 h、72 h低氧处理的PASMCs中Hoxa1 mRNA和蛋白表达水平。采用干扰或过表达Hoxa1慢病毒下调或上调细胞中Hoxa1表达。慢病毒干扰实验分为常氧组(Normoxia)、低氧组(Hypoxia)、低氧空病毒组(Hypoxia+shRNA-NC)、低氧Hoxa1干扰病毒组(Hypoxia+shRNA-Hoxa1)；慢病毒过表达实验分为对照组(Control)、过表达空病毒组(LV-NC)、过表达Hoxa1组(LV-Hoxa1)。采用EdU检测细胞增殖能力；RT-qPCR检测Hoxa1 mRNA表达；Western blot检测Hoxa1、表型转化标志蛋白、MEK/ERK信号通路蛋白表达；免疫荧光检测Hoxa1、α-actin表达；免疫共沉淀实验确定Hoxa1与MEK的相互作用。结果 成功分离培养PASMCs，并鉴定细胞表达α-SMA。低氧诱导下PASMLab EquipmentCs中Hoxa1表达上调(P<0.05)。低氧下Hoxa1沉默抑制PASMCs增殖和迁移，而常氧下Hoxa1过表达促进PASMCs增殖和迁移(P均<0.05)。低氧下沉默Hoxa1导致Hypoxia+shRNA-Hoxa1组收缩型标志蛋白表达增高，合成型标蛋白表达降低(P<0.05)。而在常氧下过表达Hoxa1导致LV-Hoxa1组收缩型标志蛋白降低，合成型标志蛋白增高(P均<0.05)。此外，Hoxa1表达增加促进MElexacaftor采购EK/ERK信号通路激活。免疫共沉淀结果显示，Hoxa1与MEK存在相购买ABT-263互作用。结论 Hoxa1可能通过激活MEK/ERK通路促进PASMCs增殖、迁移和表型转化。

目的：采用网络药理学和分子对接方法探讨积雪草酸（AA）调控铁死亡的作用机制，并在脂多糖（LPS）诱导的炎症巨噬细胞模型上进行初步验证。方法：检索SwissINCB018424研究购买TargetPredicDomestic biogas technologytion、SEA Search Server、HERB等9个数据库获得AA相关靶点，通过FerrDb 2.0、GeneCards 5.14、KEGG、NCBI等数据库获取铁死亡相关靶点，利用Venny 2.1.0在线工具映射获得AA和铁死亡的交集靶点。采用DAVID 6.9数据库对交集靶点进行GO和KEGG富集分析，String 11.5数据库和Cytoscape 3.9.1软件构建蛋白质相互作用（PPI）网络，并采用CytoHubba插件筛选出核心靶点。最后采用Autodock Tool 1.5.7软件将AA与核心Ceralasertib靶点进行分子对接，Pymol 4.2软件对分子对接结果可视化。构建LPS诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型，激光共聚焦法检测AA对炎症巨噬细胞内脂质活性氧（lipid ROS）荧光强度的影响；细胞免疫荧光法检测AA和Akt激活剂SC79对谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、p-Akt表达的影响。结果：网络药理学分析共筛选出203个AA与铁死亡交集靶点。富集分析结果显示，AA可能通过AKT1等核心靶点介导PI3K/Akt等信号通路调控铁死亡；分子对接结果显示，AA与AKT1等核心靶点均能稳定结合。在LPS诱导的巨噬细胞，AA明显降低巨噬细胞lipid ROS荧光强度，增强GPX4而减弱p-Akt荧光表达（与LPS组比较，P<0.01）;SC79使AA增强GPX4表达的作用明显减弱（与单用AA比较，P<0.01）。结论：AA抑制炎症巨噬细胞铁死亡，机制可能与负调控Akt活性有关。

急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)是指冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死,是心血管疾病中主要的死亡原因。《中国心血管病报告2021》公布数据显示,我国心血管患病率及死亡率仍处于上升阶段,心血管病现患病人数2.9亿,心血管死亡占居民疾病死亡构成的40%以上。近年来AMINaporafenib发病率呈明显上升趋势,每年新发至少50万,现患至少200万。尽管介入和溶栓技术广泛开展,但仍然难以避免AMI后心肌纤维化(Myocardial fibrosis,MF)发生。MF发生后难以逆转,是导致AMI后心功能降低的主要原因,是影响AMI远期预后的世界性难题。目前临床用于延缓AMI后MF的药物包括肾素-血管紧张素-醛固酮(rein-angiotensin-Aldosterone-system,RAAS)系统阻断剂、Ca2+通道阻滞剂、血管紧张素受体-脑啡肽酶抑制剂等。目前对AMI后MF的发病机制认识包括RAAS系统度激活、氧化应激和炎症因子损害心肌、细胞外基质过度沉积、心肌成纤维细胞过度增殖等。然而AMI后MF病理机制复杂,亟待进一步阐明AMI后MF的发病机制,寻找更多干预药物和治疗靶点,这对提高AMI患者远期预后,降低AMI后MF的发病率与死亡率具有重要的临床价值。MF的主要特征为成纤维细胞积聚,引起细胞外基质过度沉积,导致心室壁僵硬、组织顺应性降低和心脏舒缩功能不全。其主要来源于常驻成纤维细胞、骨髓源性纤维细胞、上皮细胞间质转分化和 内 皮 细 胞(Endothelial cells,ECs)间 质 转 分 化(Endothelial-tomesenchymal transition,EndMT)。其中内皮间质转分化是MF的重要来源之一,约占20至30%。传统中医学认为本病病机属本虚标实,以气虚为本,瘀血、痰浊为标。中医脉络学说提出AMI后心肌纤维化“气虚血瘀,络塞积成”病机特点和“益气活血,通络消积”治法。因此,本研究以“内皮间质转分化”为切入点,围绕神经调节蛋白-1(Neuregulin-1,NRG-1)介导的EndMT在AMI后心肌纤维化中的作用机制,应用C57BL/6小鼠建立AMI致EndMT模型,采用注射腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)方法对 NRG-1 过表达和敲低,观察 NRG-1及其下游通路介导EndMT在AMI后心肌纤维化中的作用机制。结合治法,分别以益气通络之人参、活血化瘀之丹参、化瘀通络之水蛭及通络代表药物通心络作为干预药物,探讨通络药物调控NRG-1介导的EndMT在心肌纤维化中的作用及机制,佐证“气虚血瘀,络塞积成”病机假说,开辟通络药物阻抑AMI后心肌纤维化的有效治疗途径。第一部分 NRG-1调控内皮间质转分化在急性心肌梗死后心肌纤维化中的作用机制研究目的:探索NRG-1在EndMT介导的AMI后心肌纤维化中的作用机制。方法:选用C57BL/6小鼠,随机分为5组:假手术组(Sham)、模型组(Model)、NRG-1 过表达组(NRG-1 OE)、NRG-1 敲低组(NRG-1 KD)、阴性对照组(NC)。结扎小鼠冠状动脉左前降支建立AMI模型,使用AAV原位注射方法对AMI小鼠心脏NRG-1基因进行过表达和敲低。4周后称量小鼠心脏重量和体重,计算心脏指数以评价心肌肥厚程度;使用小动物超声仪检测小鼠心功能;HE染色、Masson染色评估心肌细胞形态及心肌纤维化情况;免疫组化检测Collagen Ⅰ,CollagenⅢ以评估胶原蛋白表达情况;使用免疫荧光方法检测CD31、α-SMA以观察EndMT情况;蛋白印迹分析方法(Western blot)检测 CD31、VE-cadherin、α-SMA、FSP-1及NRG-1下游PI3K/AKT通路蛋白。探索NRG-1是否通过抑制EndMT改善AMI后MF。结果:1.AMI造模前后心电图改变及心脏形态变化造模前心电图为窦性心律,无ST段抬高。显微镜下观察小鼠心脏形态,心脏色泽鲜红,收缩舒张有力。结扎冠状动脉左前降支后出现明显ST段弓背抬高及心律减慢。显微镜下观察,小鼠心脏色泽由鲜红变为苍白,收缩及舒张幅度均明显降低。2.各组小鼠心脏指数比较与Sham组比较,Model组小鼠心脏指数升高(P<0.01),提示心肌肥厚明显。与Model组比较,NRG-1敲低组心脏指数升高(P<0.01),提示心肌肥厚程度加重;NRG-1过表达组心脏指数降低(P<0.05),提示心肌肥厚程度减轻;NC组无显著性差异(P>0.05)。3.各组小鼠心功能比较心脏超声结果显示:与Sham组比较,Model组和NC组小鼠均有心室壁变薄、室壁运动不协调等改变,射血分数显著降低(P<0.01)。与Model组比较,NRG-1 OE组射血分数降低(P<0.01),NRG-1 KD组射血分数降低(P<0.05),NC组无明显变化(P>0.05)。4.各组小鼠心肌纤维化情况Masson染色结果显示:Sham组心肌组织纤维排列紧密有序,无明显胶原纤维增生;与Sham组比较,Model组心肌纤维排列无序,胶原纤维面积显著增加(P<0.01)。与Model组比较,NRG-1 OE组后胶原纤维面积减少(P<0.01);NRG-1 KD组胶原纤维面积增大(P<0.01),同时伴有心肌细胞变形和减少;NC组无明显差异(P>0.05)。免疫组化检测Collagen Ⅰ,CollagenⅢ结果与 Masson 结果一致。5.各组小鼠AMI后EndMT相关蛋白CD31,α-SMA表达情况免疫组化检测CD31和α-SMA结果显示:与Sham组比较,Model组心脏微血管CD31表达减少(P<0.01),α-SMA表达增加(P<0.01)。与Model组比较,NRG-1 OE组CD31表达增加(P<0.01),α-SMA表达减少(P<0.05);NRG-1 KD 组 CD31 表达减少(P<0.01),α-SMA 表达增加(P<0.01);NC组无明显变化(P>0.05)。Western blot检测结果与组化结果一致。6.各组小鼠NRG-1及其下游PI3K/AKT通路蛋白表达情况Western blot检测NRG-1及其下游PI3K/AKT通路蛋白。结果表明:与Sham组比较,AMI后NRG-1、PI3K和p-AKT的蛋白水平显着降低(P<0.05)。与 Model 组比较,NRG-1 OE 组NRG-1、PI3K 和 p-AKT 蛋白表达增加(P<0.05);NRG-1 KD组NRG-1、PI3K和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05);NC组无明显差异(P>0.05)。小结:本研究表明EndMT参与AMI后MF形成,NRG-1通过激活下游PI3K/AKT通路抑制EndMT,从而改善AMI后MF,NRG-1是关键靶点。第二部分 益气活血通络药物在AMI后心肌纤维化中的作用及机制研究目的:揭示益气活血通络药物对AMI后MF的干预作用及机制。方法:实验一:造模方法同第一部分,随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、TXL 组(TXL)、TXL+NRG-1 敲低组(TXL+NRG-1 KD)、阴性对照组(NC)。Sham组、Model组和阴性对照组以等量羧甲基纤维素钠溶液灌胃。4周后,称取心脏重量、记录并计算心脏指数;使用心脏超声评价心功能;Masson染色方法检测心肌纤维化程度;免疫组化方法检测Collagen Ⅰ、CollagenⅢ的蛋白表达水平,免疫荧光方法检测CD31、α-SMA;Western blot检测CD31、α-SMA及NRG-1下游PI3K/AKT通路蛋白。实验二:造模方法同第一部分,随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、人参皂苷Rg1组(RS)、丹参酮ⅡA组(DS)、水蛭素组(SZ)、人参皂苷Rg1+丹参酮ⅡA组(RS+DS)、人参皂苷Rg1+水蛭素组(RS+SZ)、TXL组(TXL)、贝那普利组(Benazepril)。灌胃药物浓度:人参皂苷Rg1 20mg/kg/d,丹参酮ⅡA 20mg/kg/d,水蛭素20mg/kg/d,TXL 0.75 g/kg/d,贝那普利 10mg/kg/d。灌胃给药 4 周后,称取心脏重量、体重,记录并计算心脏指数;使用心脏超声评价心功能;Masson染色方法检测心肌纤维化程度;免疫荧光方法检测CD31、α-SMA表达。通过以上方法评价益气、活血、通络药物对AMI后MF的作用。探索通络代表药物通心络是否通过抑制EndMT对AMI后MF及的作用及机制。结果:实验一;1.各组小鼠心脏指数比较与Sham组比较,Model组小鼠的心脏指数显著升高(P<0.01);与Model组比较,TXL组心脏指数显著降低(P<0.01);TXL+NRG-1 KD组无明显变化,NC组无明显差异(P>0.05)。2.各组小鼠心功能比较心脏超声结果显示:与Sham组比较,Model组射血分数显著降低(P<0.01);与Model组比较,TXL组射血分数有明显改善提高(P<0.01),TXL+NRG-1 KD组无明显变化,NC组无明显差异(P>0.05)。3.各组小鼠AMI后MF情况Masson染色结果显示:Sham组心肌组织无明显胶原纤维增生;与Sham组相比,Model组出现大量胶原纤维增生(P<0.01),以心尖部最为明显;与Model组比较,TXL组心肌纤维化程度明显减轻(P<0.01);TXL+NRG-1 KD组无明显变化;NC组无明显差异(P>0.05)。免疫组化检测 Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ与 Masson 结果一致。4.各组小鼠AMI后EndMT相关蛋白CD31,α-SMA表达情况免疫荧光结果提示:在Sham组中,CD31在血管内皮中广泛表达,而α-SMA仅在血管壁中轻微表达。与Sham组比较,Model组CD31表达下调(P<0.01),α-SMA表达上调(P<0.01)。与模型组相比,NC组无明显差异;通心络组CD31表达上调(P<0.01),α-SMA表达下调(P<0.01);TXL+NRG-1 KD组无明显差异(P>0.05)。表明TXL能够抑制AMI后心肌纤维化小鼠EndMT进程,而通心络的保护作用被NRG-1敲低所减弱。Western blot检测CD31和α-SMA,与免疫荧光结果一致。5.Biochemical alteration各组小鼠NRG-1及下游PI3K/AKT通路蛋白表达情况Western blot检测显示:与Sham组比较,Model组NRG-1及其下游PI3K、p-AKT蛋白水平显着降低(P<0.05)。与Model组比较,TXL组NRG-1及其下游PI3K、p-AKT蛋白表达显着升高(P<0.05),TXL+NRG-1 KD组无明显变化(P>0.05);NC组无明显差异(P>0.05)。提示敲低NRG-1后可抵消通心络的保护作用。实验二:1.各组小鼠心脏指数比较与Sham组比较,Model组小鼠的心脏指数显著升高(P<0.01);与Model组比较,所有给药组心脏指数显著降低(P<0.05)与DS组比较,RS+DS两种单体联用、TXL组、Benazepril组对心脏指数降低更显著(P<0.05)三个单体之间比较无明显差异(P>0.05);与RS组比较,RS+DS、RS+SZ无明显差异(P>0.05);与SZ组比较,RS+DS、RS+SZ无明显差异(P>0.05);RS+SZ组、TXL组和Benazepril组之间无明显差异(P>0.05)。2.各组小鼠心功能比较心脏超声结果显示:与Sham组比较,Model组和NC组小鼠均有心室壁变薄、室壁运动不协调等改变,射血分数显著降低(P<0.01)。与Model组比较,各给药组对射血分数均有明显升高(P<0.05);与单用单体组比较,联用组效果更好,RS+DS组优于RS组和DS组(P<0.05),RS+SZ组优于RS组和SZ组(P<0.05);三个单体组之间无明显差异(P>0.05);RS+DS 组、RS+SZ 组、TXL 组、Benazepril 组之间无明显差异(P>0.05)。3.各组小鼠AMI后MF情况Masson染色结果显示:Sham组心肌细胞结构完整均匀,心肌组织纤维排列紧密有序,无明显胶原纤维增生。与Sham组相比,Model组心肌细胞数量略有减少并伴有心肌细胞形态改变,胶原纤维增多(P<0.01)。与Model组比较,各单体组、TXL组和Benazepril组均有改善(P<0.01),心肌结构趋于规则,胶原纤维增生范围减少;与RS、DS、SZ三个单体组相比,联用组RS+DS组、RS+SZ组的改善程度更为明显(P<0.05)。与RS+DS组比较,RS+SZ组、TXL组和Benazepril组改善程度更为明显(P<0.05)。4.各组小鼠AMI后EndMT相关蛋白CD31,α-SMA表达情况免疫荧光结果提示:Sham组CD31表达广泛,α-SMA仅在血管壁有少量表达;与Sham组相比,Model组CD31表达减少(P<0.01),α-SMA表达增多(P<0.01)。与Model组相比,各单体组、TXL组和Benazepril组CD31表达增加(P<0.05),α-SMA表达减少(P<0.01);与三个单体组相比,联用组的CD31表达增加(P<0.05),α-SMA表达减少(P<0.05)。与RS+DS组比较,RS+SZ组、TXL组和Benazepril组CD31表达增加(P<0.05),α-SMA 表达减少(P<0.05)。小结:以中医脉络学说为指导,提出AMI后MF的基本病机为“气虚血瘀,络塞积成”,并确立“益气活血,通络消积”治法。益气活血通络代表方通心络可通过抑制EndMT改善AMI小鼠的心功能和心肌纤维化情况,机制可能与激活NRG-1及其下游PI3K/AKT通路有关。益气、活血、通络中药单体对AMI后心功能均有改善作用,但水蛭素干预MF的效果优于人参皂苷Rg1和丹参酮ⅡA,可能与水蛭素抑制EndMT的作用有关。单体联用优于MS-275生产商单体单用,而且益气通络组合优于益气活血组合。通心络优于益气活血单体组合,与益气通络单体组合作用相当。在本病治疗中益气通络发挥更有利的作用,揭示通络药物不同于一般活血化瘀药物,可深入络脉,达到通络消积的目的。本研究进一步佐证了“气虚血瘀,络塞积成”的病机假说,为脉络学说指导的“益气活血,通络消积”治法提供科学数据和佐证。而益气通络单体组合抑制EndMT具体作用机制是否与激活NRG-1及其下游通路蛋白有关,仍有待深入探讨。第三部分 益气通络中药单体组合在AMI后心肌纤维化中的作用研究目的:揭示益气通络中药单体组合对AMI后MF的干预作用及机制。方法:造模方法同前,造模后将小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、益气通络单体组合组(RS+SZ)、益气通络单体组合+NRG-1 敲低组(RS+SZ+NRG-1 KD)、对照组(NC)。RS+SZ 组和RS+SZ+NRG-1 KD组给药浓度为:人参皂苷Rg1 20mg/kg/d+水蛭素20mg/kg/d,Sham组、Model组、NC组予羧甲基纤维素钠等体积灌胃。4周后使用小动物超声仪评价心功能;称取心脏重量、记录并计算小鼠心脏指数;Masson染色方法检测小鼠心肌纤维化程度;免疫荧光方法检测CD31和α-SMA的蛋白表达情况,通过以上方法评价益气通络单体组合对AMI后MF的作用,揭示益气通络单体组合在AMI后MF中的作用机制。结果:1.各组小鼠心脏指数比较与Sham组比较,AMI后心脏指数增大(P<0.01);与Model组比较,RS+SZ组心脏指数降低(P<0.05);RS+SZ+NRG-1 KD组、NC组无明显差别。2.各组小鼠心功能比较与Sham组比较,Model组和NC组均有心室壁变薄、室壁运动不协调等改变,小鼠的射血分数显著降低(P<0.01);与Model组比较,RS+SZ组射血分数显著升高(P<0.01);RS+SZ+NRG-1 KD组、NC组无明显差异(P>0.05)。3.各组小鼠AMI后MF情况Masson结果显示:Sham组心肌组织纤维排列紧密有序,无明显胶原纤维增生;与Sham组比较,Model组心肌纤维排列无序,胶原纤维显著增生(P<0.01);与Model组比较,NC组无明显差异;予单体组合后纤维增生程度减轻、面积减少(P<0.01);敲低NRG-1后抵消单体组合的作用(P>0.05)。胶原蛋白组化提示,Sham组collagen仅在血管壁有少量表达;与Sham组比较,Model组collagen表达上调(P<0.01);与Model组比较,单体组合组collagen表达下调(P<0.01);NC组无明显差异。敲低NRG-1可抵消单体组合的作用(P>0.05)。4.各组小鼠AMI后EndMT相关蛋白CD31,α-SMA表达情况免疫荧光结果显示,在Sham组中,CD31在血管内皮中广泛表达,而α-SMA仅在血管壁中轻微表达。与Sham组比较,Model组CD31表达下调,α-SMA表达上调。与模型组相比,NC组无明显差异;单体组合组CD31 表达上调(P<0.01),α-SMA 表达下调(P<0.01);敲低 NRG-1后可抵消RS+SZ的作用(P>0.05)。小结:人参皂苷Rgl和水蛭素的中药单体组合可以改善AMI后小鼠MF,其机制可能与激活NRG-1及抑制EndMT有关。结论:1.本研究以中医脉络学说为指导,提出AMI后MF的基本病机为“气虚血瘀,络塞积成”,并确立“益气活血,通络消积”治法。2.采用注射AAV的方式对AMI小鼠心脏NRG-1基因过表达和敲低,证实NRG-1通过激活下游PI3K/AKT通路参与抑制EndMT,减轻AMI后MF。3.通过应用益气活血通络代表方药通心络和“益气、活血、通络”药物单体进行干预,证实通心络可通过激活NRG-1及其下游PI3K/AKT通路,抑制EndMT,改善AMI小鼠MF和心功能。益气、活血、通络中药单体对AMI后心功能均有改善作用,但水蛭素通过抑制EndMT干预MF的效果优于人参皂苷Rgl和丹参酮ⅡA。单体联用抑制MF的作用优于单体单用,而且益气通络组合优于益气活血组合。通心络抑制MF的作用优于益气活血单体组合,而益气通络单体组合与通心络作用相当。在本病治疗中益气通络发挥主导作用,揭示通络药物是AMI后MF的有效治疗药物。4.益气通络单体组合通过激活NRG-1表达,抑制EndMT,从而改善AMI后小鼠MF,进一步佐证了“气虚血瘀,络塞积成”病机假说,揭示了通络药物干预EndMT发挥阻抑AMI后MF的作用和机制,为脉络学说指导的“益气活血,通络消积”治法提供科学数据,开辟通络药物干预AMI后MF的有效治疗途径。

目的:氧化应激被认为是暴露于PM_(2.5)可能导致不良健康影响的重要潜在机制。近年来不断有研究使用活性氧代谢衍生物(derivatives of reactive oxygen metabolites,d-ROMs)来反映疾病或生活方式相关疾病的氧化状态,而目前关于空气污染物暴露与d-ROMs的潜在关联罕见报道。同时,PM_(2.5)作为一种复杂的混合物,不同的化学成分或来源可能有不同的影响,而氧化潜势是表征PM_(2.5)相关成分和来源对人类健康造成不利影响的指标。本研究旨在探究PM_(2.5)质量浓度及氧化潜势与人体血清中氧化应激标志物d-ROMs的关联。方法:本研究使用固定群组重复测量的方法,于2021年12月至2022年8月在广东省广州市招募了30名大学生,分别在冬、夏两季采用PM_(2.5)个体采样器连续监测研究对象PM_(2.5)暴露情况,并重复采集研究对象指尖血液,离心后取上清液进行d-ROMs检测,同时进行问卷调查。通过二硫苏糖醇(DTT)分析法测量PM_(2.5)的氧化潜势。使用线性混合效应模型探寻不同滞后时间PM_(2.5)个体暴露浓度及氧化潜势与血清中氧化应激标志物d-ROMs的关系。结果:研究对象血清中d-ROMs水selleckchem Bemcentinib平的均值为333.71 U.CARR,重复测量的方差分析结果显示男女之间d-ROMs水平存在差异(P<0.05),表现为女性高于男性;冬季与夏季之间d-ROMs水平无显著性差异。研究期间不同滞后时间PM_(2.5)的日均浓度均值为36.34-41.22μg/m~3。在健康大学生中,PM_(2.5)质量浓度增加与血清中氧化应激标志物d-ROMs升高有关,在单独滞后效应中,lag0时影响最大,为PM_(2.5)浓度每升高10μg/m~3,d-ROMs增加3.36%(95%CI:1.23%,5.54%,P<0.01)。对冬季与夏季分别进行分析发现,在lag0时PM_(2.5)开始对其产生正向影响,且在lag0时的影响最大,而后随着滞后时间的增多而呈下降趋势。双污染物模型结果显示,与单污染物模型相比,PM_(2.5)质量浓度对d-ROMs的效应略有增强。根据性别进行分层分析,在女性中,PM_(2.5)暴露与d-ROMs水平仍呈正相关关系,而在男性中未发现显著关联。根据锻炼频率进行分层分析,在锻炼频率为0-1次/周和2-4次/周时表现为个体PM_(2.5)暴露与血清中d-ROMs水平呈正相关关系,其效应与总人群相比变化不大。PM_(2.5)质量浓度与OPICI 46474细胞培养~(DTTm)具有负相关性,而与OP~(DTTv)具有正相关性。将OP~(DTTv)按四分位数分组分析后发现,与第1四分位数组相比,第4四分位数组血清d-ROMs水平升高4.99%(95%CI:0.04%,10.19%,P<0.05);而未发现OP~(Dhepatic T lymphocytesTTm)与血清d-ROMs的变化存在显著性关联。进一步对冬季与夏季分别分析,结果显示,在冬季,将OP~(DTTm)按四分位数分组分析后发现,与第1四分位数组相比,第3四分位数组血清d-ROMs水平升高7.98%(95%CI:0.33%,16.21%,P=0.04),将OP~(DTTv)按四分位数分组分析,与第1四分位数组相比,第3四分位数组血清d-ROMs水平升高8.45%(95%CI:1.18%,16.24%,P=0.02);在夏季,将OP~(DTTv)按四分位数分组分析后发现,与第1四分位数组相比,第4四分位数组血清d-ROMs水平升高9.59%(95%CI:3.38%,16.18%,P=0.003),而未发现OP~(DTTm)与血清d-ROMs的变化存在显著性关联。根据性别分层分析,未发现OP~(DTTm)和OP~(DTTv)与血清d-ROMs的变化存在显著性关联。结论:1.PM_(2.5)短期暴露可引起广州健康大学生血清中氧化应激标志物d-ROMs升高,且具有即时和滞后效应。2.PM_(2.5)质量浓度与OP~(DTTm)具有负相关性,而与OP~(DTTv)具有正相关性。3.OP~(DTTv)也是反映暴露于环境中PM_(2.5)致人体氧化应激效应的健康指标。

目的：探讨经尿道绿激光汽化术（PVP）治疗高危前列腺增生症（BPH）的效果和安全性。方法：选取上饶市人民医院2020年3月—2022年4月收治的90例高危BPH患者，随机分为两组，分别为对照组（n=45）和观察组（n=45），对照组行经尿道前列腺电切术，观察组行经尿道PVP。比较两组围手术期相关指标，治疗前、治疗后3个月的相关GSKJ4化学结构指标，包括最大尿流率（Q_(max)）、生活质量量表（QOL）评分、国际前列腺症状评分（IPSS）、国际勃起功能指数评分问卷表-5(IIEF-5)分值和应激反应，以及治疗后3个月并发症发生情况。结果：观察组selleck NMR手术时长、膀胱冲洗时间、留置尿管时间及住院时间均短于对照组，术中出血量少于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗后3个月，观察组的Qmax及IIEF-5分值均高于对照组，QOL评分及IPSS评分均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；观察组皮质醇（Cor）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）及空腹血糖（FBG）均低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；观察组并发症发生率为13.33%，低于对照组的33.33%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：经尿道PVP能够有效治疗高危BPBiotoxicity reductionH患者，其不仅并发症发生率低，安全性较高，且术后恢复快。