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盐胁迫是植物面临的重要非生物胁迫之一,严重影响包括烟草在内的作物品质与产量,进而影响了烟叶生产的经济效益。深入研究烟草等植物响应高盐胁迫的分子调控机制,对利用基因工程提高植物耐盐性具有重要意义。非特异性脂质转移蛋白(Non-specific lipid transfer proteins,nsLTPs)通常具有保守的结构相似性、低序列统一性,在植物生长和抗逆性方面具有广泛生物学功能。在课题组已经获得的过表达NtLTPI.38株系(OE)和敲除株系(ntltpI.38)的基础上,通过转录组、代谢组和脂质组联合分析,结合盐胁迫后形态结构、生理变化、物质代谢的研究,探究NtLTPI.38基因响应盐胁迫的分子机制。主要研究结果如下:1.正常生长条件下野生型株系K326(WT)与转基因株系的非靶向代谢组学分析表明:在OE vs ntltpI.38、ntltpI38 vs WT以及OE vs WT不同比较组中注释了 699、608和573种差异代谢物。其中,类黄酮物质(Flavnoids)在所有差异代谢物中比例最大,分别有74、51和54个差异代谢物。Types of immunosuppression3个组别中,分别有47、17和26个上调代谢物。过表达NtLTPI.38株系中类黄酮物质上调的数量均高于野生型和敲除株系。KEGG富集分析发现,三个组别均富集到甘油磷脂代谢(Glycerophospholipid metabolism)、三羧酸循环(Citrate cycle,TCA cycle)和花生四烯酸代谢(Arachidonic acid metabolism)。而在ntltpI38 vs WT 和 OE vs WT 组别中,KEGG代谢通路均富集在乙醛酸和二羧酸代谢(glyoxylate and dicarboxylate metabolism)、亚油酸代谢(linoleic acid metabolism)和嘌呤代谢(purine metabolism)途径中。2.非靶向脂质代谢组分析表明,基于OE vs ntltpI.38、ntltpI.38 vs WT和OE vs WT 比较分别注释了 28、32和19种差异脂质代谢物。其中,过表达株系中三酰基甘油(TGs)含量显著高于野生型和敲除株系。而神经酰胺(Cer)[如Cer(d42:4)和Cer(d44:4)]含量显著低于K326和敲除株系。此外,过表达株系中PC:PE的比率显著高于敲除株系。对差异脂质代谢物KEGG富集分析发现,在三个组别的比较中,差异脂质代谢物主要富集在甘油磷脂代谢(Glycerophospholipid metabolism)和甘油脂代谢(glycerolipid metabolism)途径。3.转录组分析表明,在OE vs ntltpI.38、ntltpI.38 vs WT和OE vs WT 比较组别中,分别发现4812、4253和4223个差异表达基因。其中,205个为三个组别共有差异表达基因。进一步对差异表达基因进行GO和KEGG分析发现,GO主要在蛋白质磷酸化(protein phosphorylation)和蛋白激酶活性(protein kinase activity)、DNA 模板化(regulation of BIBW2992 MWtranscription,DNA-templated)中富集。这些差异表达基因主要注释为钙调磷酸酶B样蛋白(CBL)、CBL相互作用蛋白激酶(CIPK)、钙依赖性蛋白激酶样蛋白(CDPK)以及转录因子。此外与盐胁迫下Ca2+信号传导有关的基因,包括FERONIA(FER),膜联蛋白(ANN),细胞壁相关激酶(WAK),呼吸爆发氧化酶同系物D(RbohD)和脱落酸受体;离子转运通道蛋白相关基因,如K+转运蛋白(AKT)、高亲和力K+AG-221分子式转运蛋白(HKT)、Na+(K+)/H+反转运蛋白(NHX)、环核苷酸门控通道(CNGCs)和氯离子通道(CLC)基因也在不同株系间差异表达。在KEGG富集分析中甘油磷脂代谢(Glycerophospholipid metabolism)和甘油脂代谢(glycerolipid metabolism)途径与代谢组学和脂质组学相对应。4.通过不同组学联合分析,构建了NtLTPI.38基因调控类黄酮物质和脂类物质基因表达和物质代谢的代谢调控网络图。NtLTPI.38基因通过参与三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、甘油磷脂代谢和甘油脂代谢途径,调控脂质代谢物合成。通过参与莽草酸代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成途径,调控类黄酮物质变化。5.对野生型和转基因烟草株系进行200 mM NaCl盐胁迫处理,结果发现,高盐胁迫下,过表达株系表现出更强的耐盐性。盐胁迫后,与野生型和敲除株系相比,过表达NtLTPI.38基因提高了烟草叶片的叶绿素含量、K+含量、Ca2+含量、可溶性糖和可溶性蛋白含量、脯氨酸含量、总黄酮含量、DPPH、ABA含量、抗氧化酶活性,降低了烟草叶片的相对电导率、Na+含量、Cl-含量、H2O2含量、O2·-含量、MDA含量,表明NtLTPI.38基因可以通过提高烟草渗透调节能力、抗氧化能力、维持细胞离子稳态能力和ABA激素含量等来增强烟草的耐盐性。综上所述,NtLTPI.38可以通过调节脂类物质含量,调控Ca2+信号和ABA信号传导、离子通道蛋白相关基因的表达,增加类黄酮物质合成等机制来提高盐胁迫下烟草的抗氧化能力、维持细胞离子稳态,从而提高烟草的耐盐性。

目的 初步探讨黄芪多糖(Aps)提高结肠癌SW480细胞对氟尿嘧啶(5-Fu)的敏感性，促进结肠癌细胞凋亡的分子机制。方法 选择SW480结肠癌细胞株为实验对象，将黄芪多糖100μmol·L~(-1)和5-Fu 30μg·mL~(-1)组单用或联用48 h作为药物实验组，另设不加药为对照组，分别采用实时定量PCR和Western-blotPUN30119使用方法ing检测各组细胞bcl-2、p21、caspase-3、caspase-9基因表达和蛋白表达情况，比较阈值法确定基因的相对表达量，以GAPDH为内参，半定量分析蛋白相对表达量，EMSA法检测各组细胞核因子-κB的DNA结合活性，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，组间样本均数比较采用LSD检验。结果 联合用药组caspase-3selleck合成、caspase-9和p21基因表达与蛋白表达均高于对照组、黄芪多糖组和5Median paralyzing dose-Fu组，联合用药组生存素与蛋白表达均低于对照组、黄芪多糖组和5-Fu组，差异均具有统计学意义(P<0.05),caspase-3、p21在两单药组的表达与对照组相比，差异也具有统计学意义(LSD检验，P<0.05)。结论 黄芪多糖与低剂量的5-Fu联用对结肠癌SW480细胞凋亡诱导作用显著大于高剂量5-Fu单独应用的效果，可能是通过黄芪多糖抑制核因子-κB的DNA结合活性，进一步上调caspase-3、caspase-9、p21及下调生存素起作用，提示黄芪多糖对5-Fu抗结肠癌细胞的作用具有协同和增强作用，为临床上结肠癌疾病的辅助化疗提供了一个新思路，黄芪多糖可为结肠癌化疗提供辅助治疗。

目的:探讨分析针灸联合消癖汤治疗乳腺增生的临床效果。方法:对2021年1月到2022年12月前来本院就诊的90例BIBW2992采购乳腺增生患者进行分组,按照时间先后顺序分为观察组和对照组两组,两组患者各为45例,分LGX818别采取针灸联合消癖汤治疗、消癖汤治疗,以两组患者的乳房结块、疼痛评分情况、不良情绪评分、治疗有效率、生活质量评分为观察指标,之后统计比较观察结果。结果:两Plant cell biology组患者疗程结束日的结块质地、结块大小、疼痛评分评分均比疗程前低,并且观察组患者的降低程度比对照组更明显,证明有统计价值(P<0.05);在干预后,两组患者观察组的焦虑评分、抑郁评分明显更低,与对照组之间差异显著(P<0.05)。在干预前,两组患者各项评价指标对比差异并不大(P>0.05);进行治疗总有效率调查,观察组患者的总体有效率(44/45,97.78%),显著高于对照组(37/45,82.22%),具有统计学差异(P<0.05);对照组的生活质量评分与观察组对比,对照组更低,组间差异显著,P<0.05存在统计学意义。结论:在治疗乳腺增生过程中,针灸联合消癖汤治疗具有较高的应用优势,不仅可以使患者的乳房结块与疼痛症状得到改善,保证患者良好的情绪状态,将治疗效果提升上来,而且也可以有效提升患者的生活质量。

近年来,苹果已经成为我国消费最广泛的水果之一。苹果汁、果酱等产品的生产需要大量的苹果,而苹果产量的上升必然产生大量的苹果果渣。苹果多酚是苹果在生长过程中的次生代谢产物,是从苹果皮渣中提取出来的天然活性物质,具有抗氧化、抗炎和免疫调节等特性。传统提取苹果渣中多酚的方法效率低,且容易造成环境污染,限制了多酚的利用,因而造成了巨大的资源浪费。淀粉纳米颗粒(SNPs)因其可再生、低成本和生物相容性好等优点受到广泛的关注。本文利用超声波辅助化学沉淀法制备不同粒径的SNPs并吸附苹果渣多酚提取液中的多酚类物质,研究SNPs粒径与多酚吸附量之间的关系;在此基础上拟合吸附多酚的动力学模型,评估了吸附多酚的淀粉纳米颗粒(P-SNPs)抗消化能力,抗氧化能力和多酚的模拟体外释放能力;随后进行体外细胞试验和小鼠毒理学试验验证了SNPs和P-SNPs的安全性;最后研究了SNPs和PSNPs对小鼠体内抗氧化活性和肠道菌群的影响。研究结果如下:1.通过超声波辅助化学沉淀法成功制备了五种不同粒径的SNPs,并进一步比较了它们对苹果渣提取液中多酚吸附量。研究表明,随着粒径的减小,SNPs表现出更好的吸附性能和更高的多酚吸附量,其中利用1%淀粉浓度制备的SNPs粒径为220.8 nm,60 min吸附量达到了1.10μg/mg;通过表征得知,天然玉米淀粉在被纳米化后,内部结晶面积减少,结构逐渐从紧密状态转变为疏松状态,这可促进随后物质的渗透进入吸附剂中,并且,制备出SNPs因超声和化学作用,暴露出更多的极性基团,导致多酚与SNPs之间的氢键增加。对吸附过程进行动力学拟合,发现拟二级动力学模型拟合程度更高。2.通过正交试验优化SNPs对多酚吸附工艺,最终确定使用浓度为1%的淀粉溶液制备SNPs作为吸附剂,在p H=5,温度为30℃的果渣液中以160 rpm振荡频率吸附多酚150 min,制得P-SNPs,多酚吸附量为4.65μg/mg。游离多酚经过高温和紫外线处理后,其DPPH自由基清除活性显著降低(P<0.05),然而,当多酚吸附在SNPs上时,DPPH自由基清除活性得到很好的保护,说明SNPs具有保护多酚抵抗环境中不良因素的能R428小鼠力;模拟体外消化试验表明吸附多酚后的SNPs具有良好的抗消化能力;在多酚的体外模拟释放过程中,处于胃酸等恶劣条件下时,SNPs对多酚的释放减缓,而在肠道条件下时,SNPs对多酚进行持Empagliflozin续的释放直至释放完全。3.通过细胞毒性试验证明了SNPs和P-SNPs的体外安全性。通过小鼠急性毒性试验和亚慢性毒性试验评价了SNPs和P-SNPs的体内安全性,小鼠急性试验结果显示,经过14天的喂养,雄雌小鼠的体重变化和饮食量均处于正常的波动范围内,小鼠形态未产生病理变化,毛色均正常,解剖后观察内脏器官无明显病变,肝脏和肾脏切片无明显差异。亚慢性毒性试验中,与对照组相比,各剂量组小鼠发育良好,肝肾切片无异常病变,血液生化指标和细胞因子都在正常范围内。4.探讨SNPs和P-SNPs的体内外抗氧化活性和对小鼠肠道菌群的影响,研究表明,SNPs和P-SNPs能提高短链脂肪酸的生成,其中乙酸和丁酸的含量最高,丙酸的变化量低于二者。对比高剂量SNPs组和P-SNPs组,除了乙酸,PH组的丙酸和丁酸均比SH组的含量高;在对小鼠肠道菌群的研究中发现P-SNPs可以促进小鼠肠道菌群中有益菌的生长,抑制致病菌的生长,维持肠道稳态,促进机体的健康发展;测定对照组和genetic parameter各剂量组小鼠血清、肝脏和肾脏中SOD、MDA、GSH-PX、CAT和T-AOC,发现灌P-SNPs的小鼠体内抗氧化活性均高于对照组和SNPs组,高剂量组P-SNPs体内抗氧化活性高于中低组P-SNPs。

基于中国知网、万方、维普数据库，以“中药+变应性鼻炎”“中药+过敏性鼻炎”“中药+鼻鼽”为主题，选取2000年1月至2022年2月公开发表的期刊文献，按照纳入与排除标准筛选临床治疗AR的中药方剂，统计高频药物的用药频次、剂GDC-0973浓度量、药味、药性、归经、功效等，并进行关联规则和系统聚类分析，共筛选符合标准的中药方剂有252首，共223味中药，其中用药频次≥30的高频中药有21种，以解表药和补虚药为主，药性以辛温为主，关联规则挖出21对频次≥64的药物组合，其中黄芪-辛夷药对出现频次最高。利用网络药理学对黄芪-辛夷药对的活性成分、靶点蛋白和通路等进行分析，结果显示黄芪-辛夷药对共有48个有效成分，对应的潜在靶点共306个，包括PTGS2、HSP90、CALM1、NOS2、CHRM1等；GO富集和KEGG通路分析显示核心靶点参与对外源性刺激的反应、氧化还原酶活性等多项Belnacasan小鼠进程，并通过神经活性配体-受体相互作用通路、钙离子信号通道等通路作用于AR,分子对接结果显示黄芪-辛夷可能通过细辛素、芒柄花素、山柰酚、槲皮素作用于PTGS2、CHRM1、CYP1B1等靶点发挥治疗AR的作用。基于上述结论进行体内实验验证，结果证实黄芪-辛夷药对能够有效降低AR小鼠血清、肺泡灌洗液以及鼻腔灌洗液中组胺、总IgE、RW特异性IgE、TNF-α和IL-6等炎性因子的水平，升高抗炎因子IL-10的水平，抑制炎症反应的发展，显著改善AR小鼠挠鼻和喷嚏症状，并降低肺组织中PTGS2、HSP90、NOS2蛋白的表达水平。因此，本研究表明黄芪-辛夷药对可能是通过抑制HSP90/PTGS2/NOS2通路进而抑制炎症反应、缓解AR小鼠的症状从而发挥治疗ARInfectious Agents的作用。

目的:1.大黄素已被证明具有多种药理活性。然而,大黄素也被报道在高剂量或长期使用下会引起肾毒性,其潜在的毒性机制尚未完全披露。2.本研究旨在探讨氧化应激和铁死亡在大黄素诱导肾脏毒性中的作用。找到作用靶点Notch1,使用激动剂激活Notch1信号通路增强抗氧化能力,对抗大黄素诱导氧化应激损伤和铁死亡现象,缓解其肾毒性,为其在临床应用时减少毒性提供安全性评价,也为预警类似中药的肾毒性提供参考。方法:1.动物分组给药:将BALB/c小鼠随机分为空白对照组(CON组)、大黄素低剂量组(0.4 g/kg)、中剂量组(0.6 g/kg)、高剂量组(0.8 g/kg),每个组别各6只,腹腔注射药物(对照组使用同等体积的生理盐水),一日一次,连续注射14天,期间观察小鼠的一般情况变化。2.检测小鼠肾功能及病理学改变:采用眼球取血法,检测小鼠血清中BUN,SCr指标水平。处死小鼠后,对小鼠肾脏进行称重,计算小鼠相对肾脏重量指数,并采用HE染色法观察小鼠Microbiology education肾组织病理损伤。3.培养NRK-52E细胞:用MTT和LDH法检测不同浓度大黄素(0,40,80,160,320 mmol/L)作用24小时对NRK-52E细胞活性的影响。4.检测小鼠肾脏及NRK-52E细胞内的氧化应激、脂质过氧化、铁离子水平及PTGS2基因表达:采用专项试剂盒SOD、GSH、ROS、JC-1等评价小鼠肾脏氧化应激的水平;MDA、LPO等检测脂质过氧化水平;铁离子测定以及其他相关指标的检测。5.采用Western blot和q RT-PCR法检测不同浓度大黄素处理小鼠肾脏与NRK-52E细胞中Notch1、c-Notch1、Hes1、Akt、p-Akt、t-Nrf2、HO-1、NQO-1、GPX4、p53、n-Nrf2等蛋白的活性水平和基因表达水平。6.采用Jagged1预处理激活Notch1、SC79预处理激活Akt或t-BHQ预处理激活Nrf2后检测大黄素对NRK-52E细胞活Pidnarulex半抑制浓度力、氧化应激、脂质过氧化、铁离子指标及相关蛋白表达水平和基因表达水平的影响。结果:1.大黄素可显著上调肾组织内的BUN、SCr、MDA、LPO和Fe~(2+)水平,降低SOD和GSH表达,诱导小鼠肾脏病理损伤。2.大黄素可降低NRK-52E细胞活力,促进LDH释放,诱导细胞内产生活性氧、脂质过氧化物,促进铁累积,并造成线粒体膜电位(ΔΨm)去极化现象。3.大黄素通过降低Notch1/Nrf2/GPX4通路轴的活性,使肾脏抗氧化能力减弱,促进细胞内氧化应激和selleck合成铁死亡现象发生,最终诱导肾脏毒性。4.通过Jagged1预处理激活Notch1、SC79预处理激活Akt或t-BHQ预处理激活Nrf2后均可减弱大黄素对NRK-52E细胞的毒性作用、氧化应激、脂质过氧化、线粒体损伤和铁死亡现象。结论:研究表明,大黄素会抑制Notch1/Nrf2/GPX4信号通路上的抗氧化系统,并通过ROS介导的铁死亡诱导肾脏损伤。而Notch1或Nrf2的激活可以逆转大黄素诱导的肾脏毒性,结果提示Notch1或Nrf2可能是临床实践中大黄素诱导肾脏损伤的潜在治疗靶点。

背景：骨质疏松症发病机制复杂，其本质是各种原因导致的骨形成减弱和骨吸收增强，引起骨代谢失衡。近年来研究发现N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化可以通过调控骨代谢，达到防治骨质疏松的目的。目的：以m6A甲基化调控骨代谢作为切入点，对m6A甲基化在骨Staurosporine molecular weight质疏松症中的相关研究进展进行系统性的整理和归纳，为寻找骨质疏松症新的治疗靶点提供一定的理论参考依据。方法：查阅国内外数据库，从各数据库建立至2023年发表的相关文献，设置中文检索词为“骨质疏松症，m6A甲基化，骨代谢，骨髓间充质干细胞，成骨细胞，破骨细胞”等，英文检索词为“Osteoporosis,m6A methylation,Bone metabolism,bone marrow mesenchymal stem cells,osteoblasts,osteoclasts”等，检索中国知网、万方、维普、PubMed、MEDLINE、Nature及Cochrane数据库，排除重复及陈旧无参考意义的文献，通过纳入TGF-beta/Smad抑制剂和排除标准共纳入73篇标准文献进行探讨。结果与结论：(1)m6A甲基化可以通过多种途径影响骨髓间充质干细胞、成骨细胞、破骨细胞的活性及分化过程，调节骨代谢防治骨质疏松症；(2)mCloning and Expression Vectors6A甲基化的调节过程极为复杂，其相关蛋白在不同的细胞中发挥不同的作用，甚至在同种细胞内，同类型的蛋白也会发生截然不同的作用，调控着不同的生理及病理过程。

姜黄素类似物分子EF-24 (C_(19)H_(15)F_(2)NO，分子量311.33)已被证实对多种肿瘤细胞增殖具有抑制作用。本研究首次将EF-24处理人多发性骨NBVbe medium髓瘤细胞MM.1S后，发现其能以时间和剂量依赖性地抑制MM.1S细胞的增殖。提取处理的细胞总RNA进行有参转录组测序分析，结果呈现292个上调和539个下调基因，GO功能注释显示差异基因隶属于细胞组分和分子功能本体居多，后续KEGG富集分析表明这些基因多在肿瘤发生和细胞代谢调节等过程中发挥重要作用。对其中的22个影响肿瘤细胞增殖、分化和参与细胞周期调控等进程的差异功能基因进一步进行网络互作分析，结果显示各基因对之间也呈现高度正相关性(相关性分数RFUT-175化学结构ho值≥0Wnt-C59核磁.95)。这些工作为未来深入阐明EF-24抑制骨髓瘤细胞增殖、分化和迁移等的细胞信号通路和抗肿瘤机制提供了前期基础。

目的：探讨多层低延展压力绷带包扎法对四肢烧伤患者创面愈合及瘢痕增生的影响。方法：选取2018年9月1日～2020年3月31日收治的40例四肢烧伤患者列入对照组，采用单层高弹力叠加缠绕包扎法；选取2020年4月1日～2021年9月AM-2282配制30日收治的40例四肢烧伤患者列入研究组，在对照组基础上采用多层低延展弹力绷带包扎法，第一层保护皮肤组织管状绷带包扎、第二层固位绷带、第三层包扎泡沫衬垫、第四层低延展绷带螺旋包扎Smoothened Agonist临床试验、第五层重叠螺旋包扎。比较两组干预前后疼痛程度[采用视觉模拟评分法(VAS)],创面愈合时间、换药次数，瘢痕增生[采用温哥华瘢痕量表(VSS)],满意度，并发症发生情况。结果：研究组干预后1、3个月VAS评分低于对Nasal pathologies照组(P<0.01),创面愈合时间短于对照组(P<0.01)、换药次数少于对照组(P<0.01),VSS评分低于对照组(P<0.01,P<0.05),满意度高于对照组(P<0.01),并发症总发生率低于对照组(P<0.05)。结论：对四肢Ⅱ度或深Ⅱ度烧伤患者采用多层低延展弹力绷带包扎法，可以减轻患者疼痛程度，缩短创面愈合时间，减少换药次数，有利于限制残余创面瘢痕增生，提高患者满意度，降低并发症发生率。

目的 探究吴茱萸碱通过调节高迁移率族蛋白Bl(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路减轻大鼠输血相关性Knee infection急性肺损伤（TRALI）的机制。方法 取72只SD大鼠随机分为对照组、模型组、吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱高剂量组、空载组、吴茱萸碱高剂量+HMGB1过表达组，每组12只，除对照组外，其余各组大鼠通过腹腔注射脂多糖（LPS）联合输注人血浆的方法制备TRALI模型。分组处理后检测各组大鼠肺功能指标吸气阻力（Ri）、每分钟通气量（MV）、呼气峰流速（PEF）；检测各组大鼠肺湿干比，苏木素-伊红（HE）染色检测肺组织病理形态变化；免疫荧光染色检测各组大鼠肺组织内血小板与中性粒细胞聚集情况；检测各组大鼠肺泡灌洗液（BALF）细胞总数和中性粒细胞百分比；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组大鼠BALF及血清促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平；免疫印迹检测各组大鼠肺组织HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果 与模型组相比，吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱高剂量组大鼠肺功能指标MV、PEF均升高（P <0.05）,Ri、肺湿干比、肺组织病理评分、肺组织内血小板-中diABZI STING agonist价格性粒细胞合光密度、BALF中细胞总数、中性粒细胞百分比、BALF及血清促炎因子TNF-α、IL-1β水平、肺组织HMGB1、TLR4蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低（P <0.05）。HMGB1过表达可减弱吴茱萸碱对TRALI大鼠肺功能的改善作用。结论 吴茱selleck产品萸碱可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号激活而抑制TRALI大鼠体内炎症，进而减轻其急性肺损伤，修复其肺功能。