固本化瘀通络方对糖尿病肾病大鼠X连锁凋亡抑制蛋白、低等电点的IAP直接结合蛋白的影响

实验目的:探索固本化瘀通络方对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、低等电点的IAP直接结合蛋白(direct inhibitor of apoptosis-binding protein with PI,DIABLO)的影响。实验方法:以成medical intensive care unit年雄性SD大鼠为研究对象,予以高脂高糖饮食联合一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DKD模型,使用电脑产生用随机数字表,根据随机数字表将大鼠随机分为正常对照组、模型组、治疗组,每组12只。治疗组固本化瘀通络方14.6g/kg,灌胃,1日1次,模型组和正常对照组予以等体积蒸馏水灌胃,正常对照组予以常规饲料喂养,模型组和治疗组继续予以高脂高糖饲料喂养。分别在第4、8、12周处死各组4只大鼠,留取肾脏组织,使用多聚甲醛固定、脱水机脱水、石蜡包埋制备肾脏石蜡包埋块,使用恒温冷冻切片机制备4μm厚的肾脏切片,使用兔XIAP、DIABLO多克隆抗体,采用Elivision免疫组化法检测各组大鼠肾脏XIAP、DIABLO蛋白的表达变化。使用image proplus.6.0图像分析软件,在×400放大倍数下,以胞浆中出现棕黄色为阳性信号,每张切片选择5个视野,以累积光密度进行半定量分析,比较各组大鼠肾脏XIAP、DIABLO的表达情况。结果:(1)固本化瘀通络方对高脂高糖联合STZ诱导的DKD大鼠XIAP的影响:XIAP主要表达于肾小球系膜细胞、近端及远端肾小PKA抑制剂管上皮细胞胞浆。第4、8、12周时,正常对照组与模型组XIAP表达差异无统计学意义(P>0.05);第4、8周时,治疗组与模型组XIAP表达差异无统计学差异(P>0.05);第12周时,与模型组比较,治疗组XIAP表达升高(P<0.05)。(2)固本化瘀通络方对高脂高糖联合STZ诱导的DKD大鼠DIABLO的影响:DIABLO主要表达于肾小球系膜细胞、近端及远端肾小管上皮细胞胞浆内。第4周时,模型组与正常对照组、治疗组与模型组相比,组间DIABLO的表达差异无统计学意义(P>0.05);第8、12周时,与正常对照组相比,模型组DIABLO表达升高(P<0.05),与模型组相比,治疗组DIABLO表达降低(P<0.05)。结论:(1)在8,12周时,DKD大鼠中,DIABLO表达升高。(2)在8、12周时,固本化瘀通络方可抑制DKD大鼠模型中DIABLwww.selleck.cn/products/PF-2341066O的表达,在12周时,固本化瘀通络方可增加XIAP表达。