药物生殖毒性评估是药物安全性评价中必不可少的部分。传统生殖毒性试验周期长，动物使用量大，投入资金多，随着“减少、优化、替代（3R）”原则的实施，胚胎干细胞试selleckchem AY-22989验（EST）逐渐成为研究和应用的热点。EST是经欧洲替代方法验证中心验证并推荐的生殖毒性全体外替代试验，可在药物研发早期阶段通过全体外检测和快速高通量检测药物的胚胎毒性类型。近年来，为解决EST在体外替代试验中遇到的问题，研究者们对其进行了优化和改进，包括增加化合物验证数量及种类，代谢体系及体内外浓度的选择，增加除心脏以外的分化检测终点（如神经、成骨和血管内皮等）；增加定量检测方法，从基因和蛋白水平对分化情况进行分析（如流式细胞荧光分选技术等）；增加EST衍生模型（如ReProGlo模型和Bbio polyamideeWo运输模型等）以提高EST预测可靠性、模拟代谢活化过程、考虑体内外浓度一致性、对靶器官的毒性、增加定量分析终点。但目前有些检测方法还未明确其判断标准，有待进一步研究。EST更MRTX849 MW新及优化后，其评价范围不断扩大，风险评估准确性增加，有可能实现自动化、快速且高通量筛选潜在化合物。