目的:口腔白斑(Oral leukoplakia,OLK)是口腔黏膜中最常见的口腔潜在恶性疾患(Oral potentially malignant disorders,OPMDs)之一,其恶变率达0.13-34.0%。目前存在的治疗方法存在一定的缺陷。可以以高表达受体作为靶点,联合药物治疗和光热治疗(Photothermal therapy,PTT)来为OLK的治疗提供新的方法。研究表明成纤维细胞活化蛋白(Fibroblast Activation Protein,FAP)在OLK中高表达。因此本研究目的为制备OLK的靶向纳米载药系统CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽,并通过体内外实验研究其治疗可行性。方法:1.通过免疫组织化学实验和细胞免疫化学实验验证FAP在OLK和DOK中高表达。Camelus dromedarius2.构建纳米载药系统CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽,并用紫外分光光度计、傅里叶变换红外光谱仪、透射电镜和动态光散射仪对制备成的材料进行表征。3.研究NGO、NGO-PEG、NGO-PEG-FAP靶向肽以及CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽的生物相容性,并观察其在PBS溶液和含FBS溶液中的稳定性。4.研究NGO-PEG-FAP靶向肽的载药率,并观察CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽在不同pH的PBS溶液中释放药物CXB情况。5.研究不同材料的光热性能。6.通过体外实验研究材料的毒性以及靶向性。实验组为DOK细胞,HOK细胞为对照组进行细胞毒性实验和细胞摄取实验。7.体内验证纳米载药系统对口腔白斑的靶向性、疗效以及生物安全性。结果:1.免疫组织化学实验验证FAP在OLK中高表达,细胞免疫化学实验验证FAP在DOK细胞中高表达。2.紫外分光光度计、傅里叶红外测量仪、透射电镜、Zeta电位和动态光散射分析仪显示纳米载药系统成功制备。经过荧光淬灭和恢复实验,我们发现:当NGO浓度达到0.1mg/ml的情况下,FAP靶向肽上的荧光能够彻底被淬灭,而在接触到FAP后,FAP能够特异性地切割纳米载药系统上的FAP靶向肽,使得荧光重新被激活,起到靶向作用。3.稳定性实验结果显示NGO通过被PEG修饰后,稳定性和生物相容性得到了明显的改善。4.不同pH下药物释放实验表明,pH为5.5时,释药速度和总量均高于其他两组。5.光热性能试验研究表明纳米载药系统有很好的光热性能,可用于治疗。6.细胞毒性实验结果显示,NGO-PEG基本没有毒性。在相同CXB浓度下,纳GW4869配制米载药系统组的细胞活力有所提升,当培养基pH降低后,药物得到释放,细胞活性也得到了下降。说明CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽在低pH条件下能够更好的杀死DOK细胞。细胞摄取实验结果显示:在DOK细胞中能观察到荧光信号,而在HOK细胞中观察不到荧光信号。7.通过4NQO饮水法成功构建口腔白斑小鼠模型,体内实验结果表明CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽能很好的靶向OLK,且对口腔白斑有好的疗效和生物安全性。结论:1.本实验成功验证FAP在OLK和DOK中高表达。2.本实验成功构建纳米载药系统CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽。3.pH响应实验和细胞毒性实验证实CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽对DOK细胞具有抑制作用,同时能减少对正常组的毒副作用。4.体外摄取实验证实CXB@NGO-PEG-FAP靶向肽能靶向DOK细胞。5.体内实验证实CXselleck合成B@NGO-PEG-FAP靶向肽能很好地靶向OLK,且对OLK有很好的疗效。