人参皂苷具有良bronchial biopsies好的生物活性,药理作用显著,是西洋参为代表的人参属药材中的一类主要活性成分。目前已有超过70余种人参皂苷被分离、鉴定表征,某些来源稀少的稀有人参皂苷,由于其突出的药理活性而受到广泛关注,生物转化法有望解决稀有人参皂苷来源稀缺的问题。本研究在建立了一种人参皂苷的包埋-分散固相微萃取快速检测方法的基础上,以多孔材料为载体固定化酶,以期提高人参皂苷的提取与转化效率。主要研究内容和结果如下:(1)建立了复杂样品中人参皂苷的包埋-分散固相微萃取结合高效液相色谱快速检测方法。基于卵磷脂对人参皂苷分子的包封作用,制备了大豆卵磷脂@硅胶作为分散固相微萃取的固体粒子,并采用扫描电镜进行了表征,在此基础上考察了固相粒子用量、吸附时间、样品溶液pH、洗脱溶剂种类及体积等影响人参皂苷微萃取的因素。结果表明,对于实验条件下不同工艺的酶解液样品,最佳微萃取条件为:固相粒子用量50mg、吸附时间为10min、复杂样品溶液pH=6、洗脱溶剂为甲醇、洗脱溶剂体积1.0m L。方法学验证结果显示,大豆卵磷脂@硅胶固体粒子能够有效萃取复杂样品中的4种人参皂苷,其中人参皂苷Rb1和Rd的样品加标回收率分别为102.57%和10MRTX849抑制剂1.30%,为从复杂水样中人参皂苷的快速检测提供了新的手段。(2)以介孔二氧化硅固定化果胶酶(介孔SiO_2@果胶酶),研究西洋参药材中的人参皂苷提取转化条件。在pH=8和pH=9的反应液中以β-CD用量为变量,制备了四种介孔SiO_2材料,比较了介孔SiO_2材料固定化酶催化转化人参皂苷的效果,并结合分子模拟软件(Auto Dock和VMD等)、扫描电镜图像和傅里叶红外研究了介孔SiO_2材料协同催化转化人参皂苷的机理。结果表明,4种SiO_2材料均具有固定化果胶酶提取转化西洋参中人参皂苷的效果,尤以pH=9、β-CD用量为0.55g时制备的介孔SiO_2@果胶酶催化转化的效果最佳。分子模拟软件计算结果证实了人参皂苷Rb1能够脱去C-21的末端糖基转化为人参皂苷Rd。另外,果胶酶成功地固定在介孔SiO_2上,并且果胶酶的负载并没有改变介孔SiO_2的骨架结构。以人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的收率为指标,确定了固定化酶酶解西洋参药材中的人参皂苷的最佳条件为:酶解时间2h,西洋参与固定化酶的料酶比为16.67:1,重复使用5次,人参皂苷Rb1和Rd的收率仍保持77.78%和71.50%,固定化果胶酶具有良好的可重复利用性,为酶法规模化制备人参皂苷Rb1和Rd提供依据。(3)基于共价有机框架固定化果胶酶(COF-BTDH@果胶酶),研究西洋参药材中的人参皂苷提取转化条件。通过扫描电镜、傅里叶红外光谱(FT-IR)进行了表征,并考察了COF-BTDH固定化果胶酶催化转化人参皂苷的最佳条件。结果表明,果胶酶成功地负载在COF-BTDH结构上,果胶酶的负载没有改变COF-BTDH的骨架结构,COF-BTDH固定化酶的稳定性得到进一步证实。以人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的收率为指标,确定了固定化酶酶解西洋参药材中的人参皂苷的最佳条件为:酶解时间2Belnacasan使用方法h,西洋参与固定化酶的料酶比为31.25:1,重复使用5次,人参皂苷Rb1和Rd的的收率仍保持96.23%和85.58%,可保持较高的提取和转化效率。