目的:通过验证微小RNA-9-5p(miR-9-5p)与沉默调节蛋白1(SIRT1)之间的靶向关系,检测过表达miR-9-5p对SIRT1、核因子-κB(NF-κB)通路标志蛋白及凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,探究miR-9-5p对胰腺癌细胞凋亡的作用与分子机制。方法:(1)利用Target Scan数据库和双荧光素酶报告基因测试,预测miR-9-5p与SIRT1之间的互作靶点,并确定它们之间的靶向关系;(2)将miR-9-5p mimic慢病毒转染人胰腺癌细胞PANC-1作为mimic组,空载体转染作为阴性对照组(NC组),未处理的PANC-1作为空白组;(3)采用CCK-8实验检测细胞存活能力;(4)采用RT-q PCR测定PANC-1中miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3 m RNA的表达水平;(5)采用Pearson相关分析确定miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3 m RNA表达的相互关系;(6)采用Western Blot检测SIRT1、NF-κB p65、p-NF-κB p65及Caspase-3蛋白表达;(7)采用ELISA检测SIRT1及Caspase-3蛋白表达;(8)使用Hoechest染色法检测细胞凋亡情况。结果:(1)Target Scan数据库资料显示miR-9-5p与retina—medical therapiesSIRT1之间存在靶向关系;双荧光素酶报告基因实验显示miR-9-5p可抑制野生型SIRT1细胞的荧光活性,表明miR-9-5p可靶向调控SIRT1的表达;(2)RT-q RCR检测显示,与NC组及空白组相比,mimic组miR-9-5p m RNA表达明显升高(均P<0.01),结果有统计学意义,提示转染成功;(3)与NC组相比,mimic组细胞存活率显著降低(P<0.05);(4)与空白组及NC组相比,mimic组SIRT1 m RNA表达水平显著下调(均P<0.01),Caspase-3 m RNA表达水平显著上调RSL3配制(均P<0.01);(5)Pearson相关分析发现miR-9-5p和SIRT1的表达水平呈负相关(r=-0.849;P<0.05);miR-9-5p和caspase-3的表达水平呈正相关(r=0.796;P<0.05);(6)Western Blot检测显示,与空白组及NC组相比,mimic组SIRT1蛋白表达水平显著下调(均P<0.01),p-NF-κB p65与NF-κB p65蛋白表达量比值显著上调(P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平显著上调(均P<0.01);(7)ELISA检测显示,与空白组及NC组相比,mimic组SIRT1蛋白表达水平显著下调(均P<0.05),Caspase-3蛋白表达水平显著上调(均P<0.01);(8)Hoechest染色显示mimic组细胞明显出现寻找更多细胞核深染,细胞凋亡增加。结论:(1)miR-9-5p可以靶向抑制PANC-1细胞中SIRT1的表达;(2)过表达miR-9-5p可以促进PANC-1细胞凋亡,其机制可能与靶向SIRT1继而激活NF-κB通路有关。