目的:通过对脓毒症大鼠血小板表面受体CD62P的表达、炎症因子的表达以及心肌损伤的情况进行观察,应用替格瑞洛不同剂量进行干预,探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法:采用SPF级SD雄性大鼠32只,6-8周龄,体质量为220-320g。以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(Sham)、脓毒症组(CLP)、低剂量给药组(low dose):给药剂量为10mg/kg、高剂量给药组(high dose):给药剂量为50mg/kg,每组8只。假手术组大鼠麻醉后进行开关腹并剥离盲肠,不进行盲肠结扎,其余各组大鼠采用盲肠结扎穿刺术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症大鼠模型,给药组分别按照10mg/kg及50mg/kg用量进行替格瑞洛灌胃给药,假手术组及脓毒症组Pexidartinib采购则按照1ml/kg进行生理盐水灌胃处理。分别于手术前12小时及手术后12小时两次对大鼠进行灌胃给药。各组大鼠造模后24小时经腹主动脉取血并采集病理标本。应用流式细胞术检测各组大鼠血小板表面受体CD62P的表达情况;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;应用检测试剂盒进行心肌损伤标志物的检测:肌酸激酶同工酶(Creatine Kinase-MB,CKMB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH);以及应用试剂盒检测谷丙转氨酶(ALanine aminotransferase,ALT)、肌酐(creatinine,CR)的浓度变化,全血细胞分析仪检测白细胞计数(white blood cell,WBC);对心肌组织进行苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining;HE染色)观察病理形态以及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Td T-mediated d UTP-biotin nick end labeling,TUNEL)观察心肌细胞凋亡情况。结果:1.血小板活化情况:应用流式细胞仪检测大鼠血小板表面受体CD62P的表达,结果显示与假手术组相比,CLP可显著提高大鼠血小板CD62P的表达(P<0.0001),替格瑞洛显著降低血小板CD62p的表达水平(P<0.05),高剂量给药组CD62P表达降低更为显著。2.炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化:CLP组大鼠体内TNF-α、IL-6水平均明显升高(p<0.05),IL-6水平升高更明显,替格瑞洛剂量依赖性降低了脓毒症大鼠的IL-6水平(P<0.05),然而应用替格瑞洛进行干预后对TNF-α水平无显著影响。3.心肌损伤标志物变化:应用生化分析仪检测大鼠血清CKMB、LDH变化,进行CLP后大鼠CKMB、LDH水平较对照组明显升高(p<0.0001),同时给药组大鼠心肌损伤标志物与脓毒症组相比显著下降(p<0.05),且呈剂量依赖性。4.肝肾功能及白细胞的变化:与假手术组相比,脓毒症组的谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(CR)及白细胞(WBC)水平明显升高(p<0.0001);同时,给药组肝肾功能及血象较CLP组显著改善(p<0.05),且高剂量组更为显著。5.心肌组织HE染色观察病理改变:对各组大鼠心肌组织进行HE染色可见,与假手术组相比,脓毒症组大鼠的心肌纤维排列相对不整齐,失去正常的形态,心肌组织结构疏松,纤维断裂,炎性细胞浸润增多,以及纤维空泡的形成。相比于脓毒症组,替格瑞洛给药组大鼠的心肌细胞损伤明显减轻,给药组大鼠心肌组织纤维结构相对正常,未出现明显组织坏死及空泡,但仍有部分心selleck肌纤维出现断裂。低剂量给药组与高剂量给药组相比,大鼠心肌细胞形态Antiviral immunity和细胞核的改变并不显著。6.心肌细胞凋亡情况:TUNEL染色结果证实,脓毒症组大鼠心肌细胞的凋亡与假手术组相比显著升高。同时,替格瑞洛低剂量给药组和高剂量给药组大鼠心肌细胞的凋亡数目比脓毒症组均有显著减少。结论:脓毒症可通过刺激CD62P的表达激活血小板,进而诱导炎症反应的过度激活,引起心肌细胞的凋亡和损伤,导致脓毒症相关心肌功能障碍;替格瑞洛的心脏保护作用可能与抑制血小板活化后CD62p表达的减少有关,且CD62p的表达水平与替格瑞洛之间存在剂量依赖关系。