炎症癌相关成纤维细胞介导结直肠癌细胞耐药的机制研究

背景与目的：结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是常见的消化系统恶性肿瘤之一，但是其产生肿瘤耐药的机制仍不清楚。肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME），尤其是其中的癌相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblast,CAF），在肿瘤的发生、发展及耐药过程中都发挥重要作用。本研究旨在探讨炎症CAF(inflammatory CAF,iCAF)对CRC细胞耐药的影响及可能的分子机制。方法：提取来自上海中医药大学附属普陀医院（2022年8月——2022年9月）诊治的CRCinborn genetic diseases患者并经手术切除的CRC组织以获得原代CAF[获得上海RepSox供应商中医药大学附属普陀医院伦理委员会批准，编号：PTEC-A-2023-5(S)-1]，按照CAF的表面标志物血小板源性生长因子受体α(platelet derived growth factor receptor alpha,PDGFRA)对原代细胞进行分选，筛选出iCAF。使用不添加血清的培养基分别对人结肠成纤维细胞（human intestinal fibroblast,HIF）和iCAF进行培养以获取HIF条件培养基（HIF-conditioned medium,HIF-CM）和iCAF条件培养基（iCAF conditioned mediu3-MA小鼠m,iCAF-CM）。根据处理方式将结肠癌细胞分为对照组（不处理）、实验组1（加入HIF-CM）和实验组2（加入iCAF-CM）。观察经HIF或iCAF刺激后CRC细胞的存活率变化、凋亡率、蛋白水平、mRNA水平变化及对Wnt/β-catenin信号转导通路的影响。结果：经iCAF刺激后，CRC细胞的半数抑制浓度（half inhibition concentration,IC50）较对照组和HIF-CM组升高（P<0.05）。与对照组和HIF-CM组相比，iCAF-CM组肿瘤细胞的凋亡率明显下降，凋亡蛋白caspase-3的表达量下降，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL和survivin表达量均上升（P<0.05）。iCAF-CM组Wnt/β-catenin信号转导通路被激活。结论：iCAF可以介导CRC细胞产生耐药，其机制与激活Wnt/β-catenin信号转导通路有关。