目的:通过对湖北省2019～2022年流感样病例(influenza-like illness,ILI)病原学监测数据进行统计分析,掌握流感流行病学特征,同时对湖北省流感病毒HA、NA基因进行分子流行病学研究,揭示位点变异和分子演化规律,为后期流感流行趋势的预测以及防控策略的制定提供重要依据。方法:在“中国流感监测信息系统”中下载2019～2022年湖北省流感样病例监测资料,利用Excel2019软件建立数据库,绘制统计表格,通过描述性统计分析方法对IL点击此处I比例病原学监测结果进行统计学分析,掌握湖北省近年来的流感流行病学特点;选取2019～2022年具有代表性的流感毒株进行病毒RNA提取、PCR扩增及全基因组高通量测序,采用CLC Genomics Workbench(20.0.4)数据分析平台对测序数据进行拼接获得最终序列,运用MEGA(Version 11.0)进行多序列比对,以Neighbor-Joining(NJ)法对HA、NA基因构建系统进化树,同时以参考株进行氨基酸变异位点及耐药位点等分析,运用Net NGlyc-1.0Server进行糖基化位点分析。结果:1.2019～2022年湖北省流感流行呈现明显的季节性规律,主要集中发生在冬春两季,部分年份夏季也出现流感流行高峰。2020～2021年,流感流行全年处于一个较低的水平,而自2021年后流感样病例比例逐渐增高,流感流行活动水平升高;2019～2022年,湖北省流感样病例暴发疫情主要发生在小学和中学,以冬春两季为主,其中2019年12月暴发疫情报告75起疫情,事件明显增多。2.流感样病例年龄构成分布不同,0岁～4岁与5岁～14岁两个年龄组为流感的主要易感人群,构成比达70%以上。3.2019～2022年,湖北省每年各亚型流感病毒构成有所不同,2019年流感流行型别呈现多样化,三种优势毒株型别构成比均在30%以上,1～11周以新甲型H1N1为主,12周～20周以乙型Victoria系为主,43周之后以甲型H3N2型为主;而2020年只有在1月出现短时间的H3N2型流感流行;2021年流感流行型别单一,乙型Victoria系为全年的优势流感毒株;2022年流感优势毒株为乙型Victoria系和甲型H3N2。4.2019～2022年湖北省流感病毒遗传进化树分析显示,新甲型H1N1流感毒株HA、NA进化树均位于Clade 6B大分支,根据毒株具体变异情况又可分为Clade 6B.1A5和Clade 6B.1A7两个主要进化簇;甲型H3N2流感毒株HA、NA进化树均属于3C.2a大分支,具体又可分为3C.2a1b和3C.2a1b.2a.1进化簇;乙型Victoria系流感毒株HA、NA进化树位于V1A.3大分支,具体又可分为V1A.3a.1和V1A.3a.2两个进化簇。5.HA抗原决定簇及受体结合位点分析结果显示新甲型H1N1流感毒株发生的位点变异涉及Sa、Sb两个抗原决定簇区域及受体结合部位中的223位点;甲型H3N2流感毒株变异位点涉及到3个抗原决定簇区域以及受体结合部位中的131、135、137、190四个位点;乙型Victoria系流感毒株在4个抗原决定簇上均有位点变异的情况出现。6.本次对2019～2022年湖北省流感病毒株NA基因耐药位点分析研究未发现流感毒株的已知耐药位点发生变异。本次研究中的新甲型H1N1流感病毒株与参考株HA、NA蛋白相比,均未出现新的潜在糖基化位点。在34株甲型H3N2流感毒株HA蛋白中12株失去一个潜在糖基化位点NGTS、4株增加了NWTG与NYTY两个AZD9291临床试验潜在糖基化位点;13株因G484E位点变异使其糖基化位点由NGTY变化为NETY;在甲型H3N2流感毒株的NA蛋白中发现3株因T329S位点变异增加一个潜在糖基化位点NDSS。76株乙型Victoria系感毒株HA蛋白中存在19株因T195N位点变异增加了一个潜在糖基化位点NETQ。结论:1.2019～2022年湖北省流感样病例主要在冬春两季高发,15岁以下的青少年及婴幼儿是流感病毒的主要易感人群,提示需加强该年龄段的预防保护措施。2.不同亚型流感病毒流行规律有所不同,2019年季节性流感流行具有流行型别多样性特点,优势毒株不断变化。而自2020年后流感流行型别单一,2021年和2022年的主要流行毒株分别为乙型Victoria系与甲型H3N2。3.新甲型H1N1、甲型H3N2和乙型Victoria系流感毒株不断在发生变异,进化成新的分支;在HA蛋白的抗原决bacteriochlorophyll biosynthesis定簇区域及受体结合位点出现多个位点变异。4.本次研究未发现耐药位点变异,提示神经氨酸酶抑制剂对目前的流感病毒治疗有效,但应持续加强湖北地区流感病毒的耐药位点监测。5.本次研究发现在甲型H3N2的HA、NA蛋白和乙型Victoria系流感毒株的HA蛋白上均存在潜在糖基化位点的变化,提示流感病毒在不断发生变异的同时也加强了对宿主的适应能力,对于本次研究中出现的位点变化是否可能加强致病性及耐药性还有待进一步研究。