黄嘌呤氧化还原酶(xanthine oxidoreductase, XOR)是体内催化嘌呤生成尿酸的关键酶,以两种可以相互转化的亚型存在,分别是黄嘌呤脱氢酶(xanthine dehydrogenase, XDH)和黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XO)。本研究首先通过两亚型酶在催化过程中使用电子受体不同的原理,在牛奶来源纯酶中建立了XOR及亚型XO、XDH的活性测定方法,明确了测定体系中最适底物xanthine浓度为50μmol·L~(-1),最适电子受体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide, NAD+)浓度为50μmol·L~(-1),最适pH值为7.80, XOR、XO、XDH的可测定范围分别为0.97～17.5 Liproxstatin-1抑制剂U·L~(-1)、1～9 U·L~(-1)、66～1 191 mU·L~(-1)。随后在纯酶体系测定方法的基础上,建立了小鼠肝组织XOR及亚型XO、XDH的活性测定方法,明确了组织制样方法、测定体系中最适xanthine浓度为100μmol·L~(-1)、最适NAD+浓度为100μmol·L~(-1), XOR、XO、XDH的可测定范围分别为0.67～3.98、0.19～1.08、0.52～3.55 U·gprot-1。应用已建立的方法,测定了经典的XOR抑制剂别嘌呤醇(allopurinal, Allo)对牛奶及小鼠肝组织来源XOR、XO及XDH活性的抑制作用。所有动物实验经过中国医学科学院药物研究所实验动物管理与动物福利委员会审核并批准(00003346),符合实验动物伦理相关规范。本研究分别建立了牛奶来源纯酶体系adaptive immune中及小鼠肝脏中XOR及其亚https://www.selleck.cn/products/chir-99021-ct99021-hcl.html型XO、XDH的活性测定方法,该方法准确、便捷,对探究XOR在机体中不同的病理生理作用、研发新型XOR抑制剂等奠定了实验基础。