目的 利用正交试验优选钩藤最佳提取工艺，研究钩藤总碱对小鼠急性毒性和对过氧化氢(H_2O_2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的保护作用。方法 采用L9(34)正交试验法，选择乙醇浓度、提取次数、提取时间、物料比为考察因素，用HPLC测定异钩藤碱、钩藤碱、去氢毛钩藤碱和毛钩藤碱含量并计算转移率，以主成分分析综合得分为指标，优选钩藤总碱的最佳提取工艺。选用KM小鼠，灌胃钩藤总碱溶液，进行最大耐受量(maximum tolerated dose,MTD)的测定，观察14 dAir medical transport内小鼠情况变化，后摘眼球取血，测定小鼠血清中的尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,GOT)含量变化。测定钩藤总碱对1.0 mmol·L~(-1)H_2O_2诱导损伤的HUVEC存活率和上清液乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)、内皮素(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(niCobimetinib体内实验剂量tricoxide,NO)含量的影响。结果 优选的钩藤总碱最佳提取工艺为用70%乙醇加热回流提取2次，每次2 h，物料比1∶8。急性毒性试验表明，给药后14 d内，各组小鼠活动正常、无明显不良反应、无死亡；钩藤总碱溶液对小鼠的MTD为21.0 g·kg~(-1)·d~(-1)，相当于临床成人日用量的1 377倍；与空白组比较，钩藤总碱组GPT显著降低(P<0.01)。与空白组比较，模型组HUVEC存活率及上清液中NO含量显著降低(P<0.01或P<0.05),LDH、ET-1含量显著升高(Pselleckchem NSC125066<0.01)；与模型组比较，钩藤总碱5μg·mL~(-1)细胞存活率显著升高(P<0.01),LDH、ET-1含量显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论 优选的钩藤总碱提取工艺简单可行，钩藤总碱对小鼠急性毒性较小，对HUVEC损伤有保护作用。