目的：探讨连翘苷（PN）对糖尿病（DM）大鼠心肌纤维化的抑制作用，并对其相关作用机制进行研究。方法：将60只SD大鼠随机分为5组：对照组、DM组、PN低、高剂量组（10 mg/kg，30 mg/kg）和LY294002组（PN 30 mg/kg+PI3K抑制剂LY2835219配制100 mg/kg），每组12只，采用链脲佐菌素构建DM模型。药物干预8周后，血糖仪检测FBG，超声心动图检测LVFS、LVEF、LVPWT和E/A；HE染色和Masson染色观察心肌组织变化，并计算CVF；酶联免疫吸附测定（ELSIA）检测心肌中Vaspin、TNF-α、IL-1β、IL-6水平；Western blot检测心肌中α-SMA、FSP-1、CD31、COL1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、eNOS、p-eNOS蛋白表达情况。结果：与对照组相比，DM组大鼠出现心肌细胞肿胀、间隙增大、胶原纤维增多等病变，FSCH727965试剂BG、CVF、Vaspin、TNF-α、IL-1β、IL-6、α-SMA、FSP-1、COL1水平显著升高，LVFS、LVEF、LVPWT、E/A、CD31、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-eNOS/ebio metal-organic frameworks (bioMOFs)NOS水平显著降低（P＜0.05）。与DM组相比，PN低、高剂量组心肌细胞肿胀减轻、间隙正常、胶原纤维减少，FBG、CVF、Vaspin、TNF-α、IL-1β、IL-6、α-SMA、FSP-1、COL1水平显著降低，LVFS、LVEF、LVPWT、E/A、CD31、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-eNOS/eNOS水平显著升高（P＜0.05）。PI3K/AKT/eNOS通路抑制剂LY294002明显减弱了PN对DM大鼠心肌纤维化的缓解作用。结论：PN可能通过激活PI3K/AKT/eNOS通路，改善DM大鼠心脏功能，降低心肌纤维化水平，抑制EndMT过程。