生防菌发挥生防作用的前提是在寄主植物以及其他生境稳定定殖,而定殖能力与其生物膜形成能力、运动能力等密切相关。研究生物膜形成能力相关基因并明确其在定殖中的功能,有助于明确生防菌的作用机理。解淀粉芽孢杆菌(BacillTransmembrane Transporters抑制剂us amyloliquefaciens) Sneb709是本实验室从番茄上分离获得的一株有效防治根结线虫病的有益芽孢杆菌,能在番茄植株上稳定定殖,应用前景广阔。为了深入研究影响该菌株生物膜形成能力的基因,明确其生防机制,本实验室前期已成功构建了B.amyloliquefaciens Sneb709 TnYLB-1转座子随机插入突变体库。本研究利用分子生物学技术结合表型检测,鉴定B.amyloliquefaciens Sneb709中影响生物膜形成能力基因,探究其在番茄叶内部和根内部定殖能力、对番茄促生长和防治南方根结线虫效果的影响。本研究以已筛选获得的364株生物膜形成能力显著selleck STM2457降低突变体为基础材料,通过随机插入突变体的验证、反向PCR和测序分析,确定转座子分别插入32个基因,其中参与抗生素生物合成的基因3个、参与细菌细胞代谢的基因8个、合成运输蛋白的基因10个、调控因子5个、未知功能基因6个。其中,转座子分别插入narI和rspA后,生物膜形成能力显著下降。而且,目前尚未见narI和rspA与生防解淀粉芽孢杆菌定殖相关性的报道。因此,本研究以narI和rspA为研究对象,成功构建了narI和rspA缺失突变体ΔnarI (pBE2)、ΔrspA (pBE2)和互补菌株ΔnarI(pBE2I)、ΔrspA (pBE2A)。与Sneb709 (pBE2)相比,缺失突变体ΔnarI(pBE2epigenetic biomarkers)、ΔrspA(pBE2)的生物膜形成能力和swarming能力显著下降,互补菌株ΔnarI (pBE2I)、ΔrspA (pBE2A)可恢复到野生型水平,表明narI和rspA促进B.amyloliquefaciens Sneb709生物膜的形成和swarming运动能力。在温室条件下,与Sneb709 (pBE2)相比,缺失突变体ΔnarI(pBE2)、ΔrspA(pBE2)在番茄叶内部和根内部的定殖和促番茄生长能力显著下降,防治根结线虫病效果显著降低,互补菌株ΔnarI(pBE2I)、ΔrspA(pBE2A)与Sneb709 (pBE2)无差异,表明narI和rspA影响B.amyloliquefaciens Sneb709的定殖能力、对番茄的促生长作用及对南方根结线虫的防治效果。本研究结果有助于解析B.amyloliquefaciens Sneb709生物膜形成途径,为深入研究该菌株的定殖和生防机制奠定基础。