糖谱法分析灵芝子实体多糖特征及谱效关系研究

灵芝(Ganoderma spp.)是一种药用真菌,因具有广泛的药理作用和极低的毒性,已被大量应用于功能食品和中药产品中。多糖是其发挥免疫调节功能的主要成分,常作为灵芝类产品的质控指标。但由于灵芝来源多样、多糖结构复杂、缺失标志性活性多糖组分等问题,导致其质量控制体系还不成熟。本研究针对收集得到的100多份赤芝(Ganoderma lucidum)子实体水提粗多糖的分子量分布特征进行了系统分析,发现其主要由分子量为2.97×10~6~5.47×10~6 g/mol(GLP1)、2.15×10~6~5.73×10~6 g/mol(GLP2)和1.75×10~3~1.14×10~4 g/mol(GLP3)的三类多糖组分组成,其中GLP3为所有菌株的共有组分,而GLP1和GLP2在不同菌株中分布不同。对GLP1和GLP2进行了纯化和结构鉴定,明确GLP1是以β-(1→3)-连接为主链、以β-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,而GLP2组分是以α-(1→4)-连接为主链、α-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,GLP1组分与Dectin-1受体结合激活免疫的活性优于GLP2。不同菌株灵芝的低分子量组分(GLP3)MLN4924半抑制浓度是以葡萄糖为主并含有不同比例甘露糖和半乳糖的杂多糖,不同菌株GLP3组分诱导巨噬细胞释放NO、TNF-α和IL-6细胞因子的活性有差异。为了揭示GLP3组分特征selleck激酶抑制剂与活性的关系,明确活性多糖的特征识别峰,本研究建立了低分子量灵芝多糖的指纹图谱和谱效关系模型。通过分析多糖分子量分布、单糖组成以及部分酸水解产物与多糖活性的相关性,发现重均分子量在4.27×10~3~5.27×10~3g/mol和1×10~4~1.14×10~4g/mol之间的两个峰与多糖的免疫活性关联度更高;多元线性回归分析表明多糖中的半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸摩尔百分比与该组分刺激巨噬细胞释放NO的量呈正相关性,而岩藻糖与之相反。偏最小二乘回归分析表明部分酸水解产物图谱中的P2、P3、P8、P10组分与多糖的免疫活性密切相关,是多糖发挥免疫功能的主要物质基础。基于本研究中谱效关Bacterial cell biology系模型识别的特征峰可为灵芝多糖及其产品免疫活性的评价提供参考。