目的:探讨生物钟(circadian clock)相关蛋白隐花色素1(cryptochrome 1,CRY1)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscular cells,VSMCs)从收缩型细胞向合成型细胞转化中的作用。方法:首先应用AngⅡ体外构建VSMCs表型转化模型,用不同浓度(10~(-8) mol/L、10~(-7) mol/L、10~(-6) mol/L、10~(-5) mol/L)的AngⅡ刺激C57小鼠主动脉VSMCs不同时间(12 h、24 h、48 h、72 h),RT-q PCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及CRY1在m RNA和蛋白水平的表达,确定构建表型转化模型的最佳浓度及最佳时间;然后在分别构建CRY1的干扰RNA(si CRY1)、Yes相关蛋白1(yes-associated protein 1speech-language pathologist,YAP1)的干扰RNA(si YAP1))进行基因沉默,构建CRY1的过表达质粒(pc DNA-CRY1)进行过表达,RT-q PCR、Western blot技术双重验证CRY1与YAP1在各组中m RNA和蛋白表达情况;最后将VSMCs分为4组,对照组、AngⅡ组、AngⅡ+si CRY1组、AngⅡ+pc DNA-CRY1组,将si CRY1、si YAP1、pc DNA-CRY1转染VSMCs表型转化模型,RT-q PCR和Western blot检测α-SMA、OPN、CRY1、YAP1 m RNA和蛋白的表达及CCK-8法检测细胞增殖情况。结果:不同浓度AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,VSMCs收缩型标志物在m RNA和蛋白水平表达减少,VSMCs合成型标志物在m RNA和蛋白水平表达增加,同时发现不同浓度AngⅡ刺激VSMCs后CRY1在m RNA和蛋白水平表达减少;转染si CRY1、si YAP1、pc DNA-CRY1处理VSMCs后,CRY1在siZD1839 CRY1组中m RNA及和蛋白水平表达下降,在pc DNA-CRY1组中m RNA和蛋白水平表达升高,YAP1在si YAP1组中m RNA及蛋白水平表达下降,在si CRY1组中m RNA及蛋白水平表达升高;转染si CRY1进一步减少AngⅡ诱导VSMC收缩型标志物的表达(P<0.05),增加合成型标志物、YAP1的表达,以及促进VSMCs的增殖(P<0.05);转染pc DNA-CRY1质粒增加AngⅡ诱导VSMCs收缩型标志物的表达(P<0.05),减弱合成PF-03084014使用方法型标志物、YAP1的表达(P<0.05)及抑制VSMCs的增殖(P<0.05)。结论:生物钟蛋白CRY1抑制血管紧张素Ⅱ诱导小鼠主动脉VSMCs表型转化和VSMCs增殖,该过程可能与Hippo-YAP信号通路有关。