桑黄作为我国传统名贵的药用真菌之一,含有多糖、三萜、多酚等活性成分,具有抗肿瘤、抗氧化、降糖、抑菌等生物活性。肿瘤是一种对人类生命造成严重威胁的疾病,也是至今人类不能攻克的一种疾病。目前,从具有抗肿瘤活性的药用真菌中筛选抗肿瘤药物已成为现在的研究热点之一。桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)是桑黄的一种,本研究在Support medium单因素实验的基础上优化了桑树桑黄总三萜的提取工艺,使用大孔树脂法联合葡聚糖凝胶LH-20柱层析法分离纯化出桑树桑黄总三萜,通过UHPLC-ESI-MS鉴定其三萜成分,使用CMirdametinib核磁CK8法研究其对人前列腺癌细胞PC3、人肝癌细胞Hep G2、人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人结肠癌细胞HCT-116和人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用,并结合网络药理及分子对接技术对其抗肿瘤的作用机理进行了探讨。本文主要研究内容与结果如下:1.研究超声辅助法提取桑树桑黄总三萜的工艺。在单因素实验的基础上,利用响应面法,以桑树桑黄中总三萜含量为响应值,最佳提取工艺为:乙醇浓度72.93%、料液比1:35.56(g/v)、温度45.15℃,最佳提取条件下总三萜含量10.34 mg/g,理论值为10.84mg/g,即实际值与理论值之间的拟合度较好。2.分离纯化采用大孔树脂和葡聚糖凝胶柱层析法。选用不同类型大孔树脂(AB-8、ADS-8、HPD-100A、D101和NKA-9),通过静态吸附和静态解吸实验,确定D101型为富集桑树桑黄总三萜的最佳树脂,使用该树脂初步纯化后的桑树桑黄总三萜纯度达到21.53%。使用葡聚糖凝胶LH-20柱层析对其进行进一步分离纯化,得到Fa组分和Fb组分,选择Fa组分测定其纯度上升至47.98%,比纯化前桑树桑黄总三萜的纯度提高了约3.8倍。3.利用UHPLSBE-β-CD体外C-ESI-MS检测Fa组分,通过数据库比对推测Fa中的三萜成分。结果显示Fa可能含有甘草次酸、黄柏酮、熊果酸、大戟醇、24,25-二氢羊毛甾醇、大豆皂醇、羊毛固醇和山楂酸8种三萜组分。4.利用CCK8法检测桑树桑黄总三萜粗提物和Fa组分对PC3、Hep G2、A549、MDA-MB-231、HCT116和SGC7901这6种肿瘤细胞增殖的抑制作用,结果表明Fa组分对PC3、Hep G2和A549的抑制作用较好,其IC_(50)值分别为53.39±0.95μg/m L,96.39±0.93μg/m L和92.08±0.97μg/m L,但与阳性对照5-FU差异显著(P>0.05)。5.以网络药理学和分子对接技术为基础分析8种三萜化合物对前列腺癌、肺癌和肝癌的潜在作用机理。发现均是通过“多化合物-多靶点-多通路”对三种癌症起防治作用。结果显示,8种三萜化合物可能是作用在AKT1、ESR1等核心靶点基因上,并通过癌症相关信号通路、信号转导通路等通路作出反应,从而在预防和治疗三种癌症中起重要作用。分子对接结果表明,各化合物与核心靶点对接结果均较好,可视化结果显示化合物配体与靶点蛋白间存在氢键、范德华力等,因此具有较强的结合力。