桃褐腐病菌MfHOX1基因功能研究

桃褐腐病是一种世界性分布的真菌病害,RNA Isolation严重危害桃果实产量与品质,对我国的桃产业造成巨大的损失。桃褐腐病发病迅速,化学防治是控制桃褐腐病的重要手段之一,经过多年使用,病原菌对广泛用于防治其的DMI类杀菌剂逐渐产生抗性,其机理为DMI靶标基因CYP51的过量表达。因此为进一步探究桃褐腐病菌产生DMI抗性的原因,前期通过DNA pull-down数据比对分析,筛到一些Bucladesine分子式候选的MfCYP51调控蛋白,其中包括Homeobox转录因子MfHOX1。笔者通过同源重组技术敲除了桃褐腐病菌中的MfHOX1基因,构建了该基因的敲除突变体(ΔMfHOX1)。对转化子的生长发育情况、胁迫表型、抗药性等进行测定,结果显示:ΔMfHOX1突变体生长速率显著下降,其对盐胁迫敏感性显著降低,且对DMI类杀菌剂戊唑醇的抗性显著增强。与此同时,致病力试验结果表明,ΔMfHOX1突变体致病力显著降低。转录因子磷酸化/去磷酸化修饰对于其发挥功能具有重要意义,因此更多本研究通过同源重组技术敲除了桃褐腐病菌中的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因Pmk1。抗药性试验表明,ΔMfPmk1突变体对DMI类杀菌剂的抗性也有所增强。综上所述,MfHOX1是桃褐腐病菌生长发育、盐胁迫、DMI抗性、致病性的关键调控因子。