目的:多发性骨髓瘤(MultipleRegulatory toxicology myeloma,MM)是浆细胞恶性肿瘤,目前难以根治。硼替佐米(Bortezomib)是多发性骨髓瘤治疗的一线用药,大多数骨髓瘤患者因为对硼替佐米的耐药导致疾病复发进展,预后不良。本课题旨在研究设计、合成出一种新型嘧啶类化合物,以诱导硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞凋亡,克服硼替佐米耐药,并探寻其对耐硼替佐米的多发性骨髓瘤细胞的药理活性及作用机制。研究方法:本实验第一部分设计、合成新型嘧啶类化合物BY4015,并采用高分辨质谱及核磁验证其分子结构。第二部分通过CCK-8法检测化合物BY4015对硼替佐米敏感的人多发性骨髓瘤细胞株(KM3)和硼替佐米耐药的人多发性骨髓瘤细胞株(KM3/BTZ)的存活率,及对人正常肝细胞L-02的毒性;自然光拍照观察BY4015对KM3Empagliflozin研究购买和KM3/BTZ细胞形态的影响;并采用AO/EB染色、DAPI染色及流式细胞术检测化合物BY4015对KM3/BTZ细胞凋亡及细胞周期的影响;Transwell实验评估BY4015对KM3/BTZ细胞迁移能力的影响;免疫组织化学染色和Western blot检测BY4015对STAT3信号通路蛋白的影响,验证化合物BY4015对STAT3信号通路的靶向作用。结果:1.高分辨质谱及核磁验证化合物BY4015分子结构正确。2.CCK-8法结果证明化合物BY4015能有效抑制KM3/BTZ细胞生长,并且显示出时间-浓度依赖性,并且BY4015对KM3/BTZ的抑制作用明显优于Bortezomib;BY4015对人正常肝细胞L-02的毒性小。3.自然光拍照实验、AO/EB染色、DAPI实验均显示细胞形态改变,肿瘤细胞数量减少、凋亡细胞数量增加,且BY4015对KM3/BTZ的促凋亡作用明显优于Bortezomib。4.Transwell实验结果显示,BY4015可抑制KM3/BTZ细胞的迁移。5.流式细胞术检测结果显示,BY4015将KM3/BTZ细胞的生长阻滞在G2/M期,且能促进KM3/BTZ细胞凋亡,促凋亡作用优于Bortezomib。6.免疫组织化学染色和Western blot实验结果显示BY4015可以抑制STAT3的磷酸化及其下游靶基因Bcl-2蛋白的表达,促进凋亡蛋白Bax的表达。结论:本实验合成的新型嘧啶类化合物BY4015具有显著的抗多发性骨髓瘤细胞增殖的活性,并且细胞selleck HPLC毒性低;尤其对硼替佐米耐药的KM3/BTZ细胞作用显著,优于参照药Bortezomib;BY4015可使KM3/BTZ细胞迁移能力减弱;通过将细胞生长周期阻滞于G2/M期来抑制细胞增殖;BY4015是通过抑制STAT3的磷酸化而发挥其抗KM3/BTZ细胞活性。