研究旨在构建弓形虫鸡尾酒DNA疫苗并评价其对小鼠的免疫保护效果。研究将编码弓形虫棒状体蛋白ROP5、ROP9和ROP17的基因分别构建至真核表达载体p VAX1上，获得重组真核表达质粒p VAX1-ROP5、p VAX1-ROP9和p VAX1-ROP17，将上述质粒进行PCR和双酶切验证，并通过Western blot检测重组质粒在真核细胞中表达。将三种重组质粒按1∶1∶1的比例混合后，取100μg通过腿部肌肉注射免疫小鼠，加强免疫后，检测小鼠血清抗体、脾淋巴细胞增殖及细胞因子水平，并接种弓形虫RH强毒株进行攻毒，评价免疫后小鼠的保护效果。真核表达质粒p VAX1-ROP5、p VAX1-ROP9和p VAX1-ROP17经PCR和双酶切验证的结果显示：分别在1 68Dolutegravir6 bp、1 128 bp和1 836bp处出现特异性目的条带；Western blot检测结果发现，在约为62、41和68 kDa处出现目的条带，分别与预期目的蛋白ROP5、ROP9和ROP17的分子量大小相符。与空载体组和生理盐水组小鼠相比，疫苗免疫组小鼠产生的血清中抗体IgG和淋abiotic stress巴细胞产生的细胞因子IFN-γ和IL-6水平、脾脏淋巴细胞增殖的刺激指数（SI）均极显著升高（P<0.01），且接种弓形虫RH强毒株后，免疫组小鼠的存活时间（16.1±2.07）比对照组小鼠存活时间（9.2±0.74或9.0±0.77）极显著延长（P<0.01）。研究结果表明，成功构建的弓形虫鸡尾酒DNA疫苗p AX1-ROP5/ROP9/ROP17能激发小鼠的体液免疫反应和细胞免疫反应，并增强小鼠对弓Lorlatinib溶解度形虫感染的抵抗能力。研究结果为弓形虫新型疫苗研制提供借鉴和参考。