目的:岩藻多糖是一种提取自海洋褐藻的硫酸化多糖,具有多种生物活性,本研究拟通过观察岩藻多糖在支气管上皮细胞炎症反应中的作用,探究其涉及的相关分子通路,以期明确岩藻多糖在呼吸道炎症性疾病中的综合效应。方法:实验分组及药物干预:实验分为5组:对照组(无LPS刺激),LPS组(10μg/m L),LPS+岩藻多糖低浓度组(50μg/m L),LPS+岩藻多糖中浓度组(100μg/m L),LPS+岩藻多糖高浓度组(200μg/m L)。先用10μg/m L的LPS刺激细胞16小时建立细胞炎症模型,再依据药物分组选择不同浓度岩藻多糖干预8小时。采用CCK8法观察岩藻多糖对LPS诱导的细胞损伤模型的影响,使用活性氧检测试剂盒检测岩藻多糖和LPS对细胞活性氧产生的影响,ELISA实验检测各组细胞上清液中炎症因子(IL6、IL-1β、TNF-Torin 1 IC50α)的分泌水平,实时荧光定量PCR检测各组细胞炎症因子、TLR4及My D88的转录水平,Western blot检测各组细胞中TLR4、My D88蛋白表达差异,细胞免疫荧光实验观察各组细胞中TLR4的荧光强度差异。使用Graphpad prism 9.0进行作图、分析,应用SPSS25.0统计学软件包进行单因素方差分析,蛋白灰度值分析采用Image J软件。计量资料采用(?)±s。P<0.0点击此处5表示差异有统计学意义。结果:1.细胞在被10μg/m L LPS刺激16小时后活力下降,ROS表达增高,而实验范围浓度内的岩藻多糖不会影响支气管immune suppression上皮细胞活力,给予岩藻多糖干预被LPS刺激的细胞8小时后,细胞活力较对照组明显升高,而ROS表达下降;2.在ELISA和q PCR实验中,LPS组细胞炎症因子(IL6、IL-1β、TNF-α)的转录水平与对照组相比显著升高,经过给予岩藻多糖处理后转录水平下降,且呈浓度依赖性;3.Western blot实验发现,LPS组细胞中TLR4和My D88蛋白表达较对照组显著增多,给予岩藻多糖干预后,细胞TLR4及My D88的表达量均低于LPS组,差异有统计学意义;4.细胞免疫荧光实验中,LPS组细胞TLR4荧光表达增强,显著高于对照组;当给予岩藻多糖干预后细胞TLR4荧光强度明显低于LPS组细胞,差异具有统计学意义。结论:1.当LPS以10μg/m L的实验浓度刺激16HBE细胞16小时可建立细胞炎症和氧化应激模型;2.岩藻多糖可以通过降低LPS刺激细胞产生的高ROS水平来改善细胞损伤情况,可能具备抗氧化应激作用;岩藻多糖可能通过抑制TLR4/My D88通路减轻LPS诱导产生的炎症因子表达水平,降低炎症反应对细胞的损害;3.岩藻多糖具有抗炎、抗氧化作用,也许具有开发成为遏制呼吸道炎症的海洋来源药物的潜力。