外源性神经生长因子对肱骨骨折大鼠破骨细胞活性、血管形成及iRhom2/TACE信号通路的作用

目的 :探究外源性神经生长因子(NGF)对肱骨骨折大鼠破骨细胞活性、血管形成及iRhom2/TACE信号通路的作用机制。方法 :SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、NGF低剂量组、中剂量组、高剂量组,除正常组外,其他4组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立肱骨骨折模型,低、中、高剂量组分别于骨折部位注射2、4、8μg/kg的NGF,正常组、模型组同期于骨折部位注射同体积生理盐水,X线摄片检测大鼠骨折愈合程度,TRAP染色法及鬼笔环肽染色法检测破骨细胞活性,ELISA法检测大鼠血清中NGF及血管形成相关因子含量,免疫印迹检测大鼠骨组织中肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)/非活性菱更多形蛋白2(iRhom2)信号通路蛋白表达。结果 :与正常组相比,模型组可见明显骨折线,仅有少量骨痂生长且排列疏松;与模型组相比,低、中、高剂量组骨折线逐渐消失,骨痂明显增多且排列规则紧密,骨密度明显升高,且NGF剂量越高,Maternal immune activation愈合越明显。与正常组比较,模型组可见大量TRAP阳性表达的典型多核破骨细胞;与模型组相比,低、中、高剂量组破骨细胞体积及数目明显减少,且NGF剂量越高减少越明显。与正常组比较,模型组可见明显纤维肌动蛋白环形成;与模型组相比,低、中、高剂量组纤维肌动蛋白环面积明显缩小,且NGF剂量越高缩小越明显。与正常组比较,模型组血清中NGF、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管生成素-1(ANG-1)含量显著降低;与模型组相比,低、中、高剂量组血清中NGF、VEGF、bFGF、ANG-1含量明显升高,且NGF剂量越高,升高越明显。与正常组比较,模型组肱骨组获悉更多织中iRhom2、TACE蛋白表达明显升高;与模型组相比,低、中、高剂量组肱骨组织中iRhom2、TACE蛋白表达均明显降低,且NGF剂量越高,降低越明显。结论 :外源性NGF对肱骨骨折大鼠具有显著疗效,可显著改善破骨细胞活性、促进血管形成,并抑制iRhom2/TACE信号通路。