ＯＡ 是老年人中最常见的慢性关节疾病，主要表现为关节软骨逐渐退化，滑膜发炎疼痛，严重者可能导致患者残疾［１２］。关节软骨是一种高度特化组织，主要由软骨细胞和细胞外基质组成，软骨细胞是形成关节软骨的唯一细胞，正常软骨细胞能够分泌细胞外基质， 维持软骨组织整体形态，并增加软骨组织韧度，但在炎 症条件下，炎症细胞因子和基质降解酶的过度产生，引 起细胞外基质的合成和降解失衡，从而引起关节软骨破坏、骨质增生等病理改变［１３］。本研究通过切断大鼠前交叉韧带和内侧副韧带，并摘除内侧半月板构建ＯＡ 大鼠模型，ＨＥ 染色结果表明模型组大鼠关节软骨表面粗糙，表层不完整，且出现局部软骨增厚和软骨纤 维化，细胞排列混乱，细胞因损伤出现簇集现象，与假手术组大鼠比较，ＯＡ 模型大鼠压痛阈值、热痛阈值显著降低，Ｍａｎｋｉｎ’ｓ评分显著升高，提示 ＯＡ 大鼠模型构建成功。细胞凋亡在维持人体内各组织稳态和调节 正常胚胎发育过程中起着关键的作用，研究表明在人ＯＡ 软骨细胞中发现了与 ＯＡ 有关的凋亡，而在正常软骨细胞中未发现［１４］，软骨细胞凋亡导致细胞外基质降解是 ＯＡ 发生和进展的主要原因［１５］。本研究结果表明 ＯＡ 组大鼠软骨细胞凋亡数目显著高于假手术组，与Ｓｈａｏ等［３］研究结果一致，提示软骨细胞凋亡可能与 ＯＡ 的发生有关。ＯＡ 是一种由多种因素介导的慢性炎症反应，炎症反应发生在 ＯＡ 的整个进展过程中，ＴＮＦ－α及ＩＬ－１β是常见的炎症细胞因子，有研究表明 ＴＮMK-1775分子量Ｆ－α及ＩＬ－１β是诱导软骨细胞凋亡和破坏软骨的关键细胞因子［１６］，本研究结果表明 ＯＡ 大鼠血清 ＴＮＦ－α及ＩＬ－１β水平显著高于假手术组，提示炎症细胞因子与 ＯＡ 的发生有关。
夏枯草属于唇形科多年生草本植物，是一种常见的中草药，具有清肝火、明目、消肿、散结等功效［１７］。夏枯草含有三萜类、多糖类、黄酮类、甾体类和有机酸类等多种化合物成分，具有降血糖、降血压、抗肿瘤、抗炎、退热等多种病理作用［１８］。李坤阳等［５］研究表明夏枯草黄酮能够减轻牙周炎大鼠炎性程度，对大鼠牙周 炎有很好的治疗效果。本研究发现夏枯草黄酮能够抑 制 ＯＡ 大鼠软骨组织损伤，抑制软骨细胞的凋亡和炎症因子 ＴＮＦ－α及ＩＬ－１β水平，提高大鼠压痛阈值和热痛阈值，并降低大鼠 RapamycinＭａｎｋｉｎ’ｓ评分，提示夏枯草黄酮对 ＯＡ 治疗具有一定的疗效，猜测可能与抑制炎症因子和软骨细胞凋亡有关，具体机制有待进一步研究。
ＲｈｏＡ 是 Ｒｈｏ家族的一个小 ＧＴＰａｓｅ单倍，在人体正常组织、胚胎组织和干细胞在内的所有组织中均有表达，ＲＯＣＫ 属于丝氨酸／苏氨酸激酶家族，是 ＲｈｏＡ 的下游效应因子，ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 信号通路与细胞生长、分化和凋亡等多种细胞过程有关，参与 ＯＡ、糖尿病、神经性障碍、癌症等多种疾病的发生［１９］。ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 信号通路能够被 ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β、转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）等炎性介质诱导激活，诱导 ＯＡ 中关节软骨的降解，参与 ＯＡ 的发生发展［２０］。本研究结果表明 ＯＡ 组大鼠软骨组织中 ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 蛋白表达显著高于假手术组，提示 ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 信号通路与 ＯＡ 的发生有关。Ｙ－ ２７６３２是 ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 信号通路的抑制剂［１０］，本研究中 Ｙ－２７６３２ 组大鼠压痛阈值和热痛阈值显著升高， Ｍａｎｋｉｎ’ｓ评分显著降低，且 ＨＥ 染色结果表明 Ｙ－２７６３２能够减轻 ＯＡ 大鼠软骨组织损伤程度，减少大鼠软骨细胞的凋亡，进一步提示 ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 信号通路参与 ＯＡ 的发生，猜测可能是炎性因子激活 ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ信号通路，导致软骨细胞的凋亡，引起 ＯＡ。本研究还发现夏枯草黄酮低、中、高剂量组大鼠软骨组织中 ＲｈｏＡ及 ＲＯＣＫ 蛋白表达显著低于 ＯＡ 组，且 Ｙ－２７６３２组大鼠软骨病理组织损伤程度、软 骨细胞凋亡数及 ＲｈｏＡ、ＲＯＣＫ 蛋白表达与夏枯草黄酮高剂量组无显著差异，提示夏枯草黄酮可能通过抑制 ＲｈｏＡ 及 ＲＯＣＫ 信号通路，进而抑制软骨细胞的凋亡，减轻大鼠软骨损伤，具体机 制有待进一步探讨。
综上所述，夏枯草黄酮能够抑制 ＯＡ 大鼠软骨细胞的凋亡，减轻大鼠关节软骨损伤，可能与抑制 ＲｈｏＡ及 ＲＯＣＫ 信号通路有关。本研究仅通过大鼠实验探讨了夏枯草黄酮在 ＯＡ 中的可能机制，下一步需结合细胞实验和临床研究，进一步分析其在 ＯＡ 治疗中的效应和可能机制，为 ＯＡ 治疗提供新思路。ABT-199化学结构