随着社会的不断发展与进步,宠物越来越受到人们的喜爱,给人们带来了无数开心和幸福的时光。随着宠物越来越多,宠物病毒性传染病的发病率开始逐渐攀升,宠物对于医疗方面的需求也随之增长。单克隆抗体作为一类非常重要的治疗分子,被广泛应用于肿瘤、自身免疫、代谢和病毒感染等多个治疗领域。但是,单克隆抗体只寻找更多有单一的抗原结合表位,而双特异性抗体因为能够弥补单抗的不足,被广泛应用。自然界中双特异性抗体是不存在的,需要通过基因工程等技术人工合成。并且目前市场上基于电荷的Fc突变均在专利期保护之内,无法直接用于原料、体外诊断试剂、新药的研发,因此我们希望研发出一种新的方法用于双特异抗体制备以解决专利限制的问题。本文利用静电转向机制,通过对位于外围的带电残基设计全新的突变,筛选出两组(Y409E+D287T/K392D和T223S/E362S/Y409K+D28symbiotic bacteria7T/K392D)新的突变位点。这两组突变体可以解决双特异抗体重链错配的难题,有效地促进异源二聚体的形成,并且均匀地抑制两种同源二聚体地形成。此外,我们使用不同的比例将两个片段共转染至293F细胞中证明了当scfv-fc(A)和fc(B)在共转染时使用不同的比例会对最终异源二聚体形成的比例有一定的影响,其中当A:B=1:2或A:B=1:3时,异源二聚体的产量可以达到最优。本验开发了一种解决双特异抗体错配的新方法,证明了稳健生产新型Fc异源二聚体分子的可行性,为高效的生产提供了技术支持并为后续双特异抗体新药的研发奠定了基础。这种新的构建双特异性抗体的方法有望解LY294002作用决临床治疗中不断变异的流行毒株、继发感染以及耐药或对药物产生不良反应等情况。