小麦籽粒硬度是影响小麦商品分类分级、小麦制粉工艺和小麦面粉最终加工用途的重要指标，分子标记辅助选择可以有效提高小麦籽粒JQ1硬度的选育效率。为了发掘和开发更多与小麦籽粒硬度紧密连锁的分子标记，本研究采用硬质小麦扬麦158与软质小麦西风配制VX-765采购重组自交系群体，利用55K SNP芯片分析群体基因型并构建了群体遗传连锁图，结合4年群体籽粒硬度的表型资料对影响小麦籽粒硬度的QTL进行了分子定位。结果显示，构建的遗传连锁图覆chemiluminescence enzyme immunoassay盖2784.9 cM，含有3830个非共分离的SNP标记；除PIN基因外，共定位到12个可重复的QTL位点，分别位于1A、1B、1D、2A(2个)、3A、4D、5A、5D、6B、6D和7A染色体，单个QTL可解释3.2%～15.2%籽粒硬度变异；11个QTL来自软质小麦西风，1个QTL由硬质小麦扬麦158贡献；7个QTL表现稳定，可在4年试验中重复，其中5个QTL未见报道，为新发现QTL，特别是5D染色体新发现的QTL最高可解释15.2%表型变异。与这些稳定QTL紧密连锁的SNP标记将为今后开展长江中下游麦区软质小麦的分子标记辅助选择提供帮助。