目的 运用网络药理学和分子对接技术预测白屈菜抗鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的作用靶点Torin 1试剂和机制,并通过实验验证主要活性成分对NPC细胞增殖和凋亡的影响。方法 借助在线数据平台TCMSP、ETCM和BATMAN-TCM检索白屈菜的化学成分和作用靶点。通过GEO数据库检索NPC相关靶点,生信在线工具分析白屈菜与NPC的交集靶点。使用STRING构建共同靶点的PPI网络,运用Cytoscape 3.7.1获得核心靶点。通过R软件编程进行GO功能富集分析和National Biomechanics DayKEGG通路富集分析。分子对接分析核心靶点与主要活性成分之间的结合情况。实验验证:(1)将5-8F细胞分为溶剂对照组、血根碱(2.5μmol·L~(-1)、5μmol·L~(-1))组、白屈菜红碱(2.5μmol·L~(-1)、5μmol·L~(-1))组、顺铂4μg·mL~(-1)组。MTT检测白屈菜主要活性成分对NPC细胞增殖的影响。(2)将5-8F细胞分为溶剂对照组、血根碱5μmol·L~(-1)组、白屈菜红碱5μmol·L~(-1)组、顺铂4μg·mL~(-1)组;Annexin-V FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡;Western blot检测白屈菜主要活性成分对NPC细胞增殖、凋亡、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和磷脂酰肌醇三激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路关键蛋白的影响。结果 检索得到白屈菜37个主要活性成分和1 419个作用靶点。检索GEO数据库共收集到7 852个NPC疾病基因,白屈菜与NPC共有3MRTX849试剂27个交集靶点,其中核心靶基因共10个,分别是EGFR、TP53、VEGFA、TNF、FN1、MMP9、JUN、FGF2、LYN、F2。GO分析主要涉及泛素蛋白连接酶结合、硫化物结合、整合素结合、肝素结合和糖胺聚糖结合,KEGG分析主要涉及MAPK、PI3K/AKT信号通路等,分子对接结果显示核心靶点与对应的活性成分具有良好的结合能力。实验验证显示,与溶剂对照组相比,血根碱和白屈菜红碱均明显降低NPC细胞相对增殖率(P<0.01),并提高细胞凋亡率(P<0.01),且血根碱和白屈菜红碱降低5-8F细胞中XIAP、PCNA、ERK1/2、AKT的蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论 白屈菜可通过多成分、多靶点和多通路发挥抗NPC的作用,且经实验验证,血根碱和白屈菜红碱均可抑制NPC细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与MAPK信号通路、PI3K/AKT信号通路有关。