目的探讨动脉粥样硬化泡沫细胞中mi RNA-27a与铁死亡的关系及其作用机制,为延缓和治疗动脉粥样硬化提供新思路。方法体外培养RAW264.7单核巨噬细胞,经CCK-8法确定氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)的诱导浓度;将细胞分为Control组、ox-LDL组、Fer-1+ox-LDL组、DMElexacaftor说明书SO+ox-LDL组、mi R-27a-inhibitor+ox-LDL组和mi R-27a-NC+ox-LDL组;油红O染色观察单核巨噬细胞内的脂质堆积情况;总胆固醇(Total cholesterol,TC)、游离胆固醇(Free cholesterol,FC)试剂盒检测单核巨噬细胞内的TC和FC水平;实时荧光定量PCR技术检测mi R-27a和溶质载体家族7成员11(Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)的m RNA表达变化;Western Blot技术分析谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase,GPX4)和SLC7A11的蛋白表达水平;铁离子、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)试剂盒检测泡沫细胞内铁离子、GSH和MDA含量。结果1随着oGW-572016纯度x-LDL浓度增加,单核巨噬细胞的存活率呈现先递增后递减的趋势。与Control组相比,在50μg/m L时细胞存活率达到最高,100μg/m L时细胞存活率低于Control组,且有显著差异(P<0.05)。后续实验ox-LDL浓度均选取100μg/m L。2与Control组相比,ox-LDL组中单核巨噬细胞的细胞质中发现大量脂滴沉积;TC、FC和胆固醇酯(Cholesteryl ester,CE)均明显升高(P<0.05),胆固醇酯比重(CE%)超过50%。3与Control组相比,ox-LDL组细胞中铁离子以及MDA含量明显升高(P<0.05),而GPX4以及GSH明显下降(P<0.05);与DMSO+ox-LDL组相比,Fer-1+ox-LDL组细胞中铁离子及MDA含量明显下降(P<0.05),而GPX4及GSH水平明显升高(P<0.05)。4与Control组相比,ox-LDL组细胞中mi R-27a明显升高(P<0.05),而SLC7A11 m RNA及蛋白表达量明显下降(P<0.05);与mi R-27a-NC+ox-LDL组相比,mi R-27a-inhibitor+oxLDL组细胞中mi R-27a表达水平显著下降(P<0.05),而SLC7A11 m RNA及蛋白相对表达量明显升高(P<0.05)。5与mi R-27a-NC+ox-LDL组相比,mi R-27ainhibitor+ox-LDL组铁离子以及MDA含量明显下降(P<0.05),而GPX4及GSH水平明显升高(P<0.05)。结论1在动脉粥duck hepatitis A virus样硬化泡沫细胞中发生了铁死亡,提示铁死亡可能成为动脉粥样硬化治疗的新方向。2泡沫细胞内mi R-27a高表达,抑制mi R-27a的表达可以减轻泡沫细胞内的铁死亡,提示mi R-27a可能成为动脉粥样硬化治疗的新靶点。3mi R-27a可能通过下调SLC7A11诱导动脉粥样硬化泡沫细胞发生铁死亡,提示恢复SLC7A11表达可能是减轻动脉粥样硬化泡沫细胞铁死亡的有效方式。图 19 幅;表 10 个;参 156 篇。