神经细胞是神经系统最基本的结构和功能单位,具有信息转换功能与记忆功能。随着社会的快速发展,与神经细胞损伤相关疾病的发病率逐年增加,寻找有效干预药物是当前亟需解决的问题。近年来具有显著神经保护功效的天然产物,已经成为研究热点,有望成为预防或治疗相关疾病的重要食物或药物来源,益生菌发酵产品也是一类备受关注的神经保护功能食品。因此,本课题以皮质酮诱导PC12细胞为损伤模型,MTT法检测不同乳酸菌发酵黑莓汁处理对细胞存活率的影响,筛选得到具有神经细胞保护能力的副干酪乳杆菌PC18发酵黑莓汁,在此基础上优化发酵工艺,并基于HPA轴和肠道菌群研究副干酪乳杆菌发酵黑莓汁对皮质酮诱导PC12细胞产生保护的作用,得出以下主要结论:1.以黑莓为原料,利用实验室自主分离的120株乳酸菌进行发酵,筛选得到显著提高细胞存活率,并具有耐酸性、耐胆盐、对Caco-2细胞具有良好黏附作用的乳酸菌PC18,经鉴定为Lactobacillus paracasei(副干酪乳杆菌)。2.以细胞存活率、抗氧化活性、总酚、花色苷含量为指标,对副干酪乳杆菌PC18发酵黑莓汁工艺优化。发酵产物代谢组学分析,结果显示,发酵黑莓汁中具有保护和修复受损神经细胞、心肌细胞功能的Aniracetam、Histidylleucine、Cimicifugoside、N4-Acetylcytidine、Pravastatin等物质含量显著提高。3.利用皮质酮诱导PC12细胞建立损伤模型,研究副干酪乳杆菌PC18发酵黑莓汁对神经细胞的保护作用。结果表明,皮质酮处理后,细胞凋亡率显著提高,与其相比,氟西汀与发酵黑莓汁处理后细胞凋亡率分别下降了17.39%、10.46%～12.8%;损伤组活性氧含量、乳酸脱氢酶释放导致的细胞毒性较空白对照相比显著提高,与其相比,氟西汀处理组显著降低,发酵黑莓汁处理组分别降低了52%～65%、6.68%～16.4%;损伤组线粒体膜电位、谷胱甘肽还原酶活力较空白对照显著降低,与其相比,氟西汀处理组分别提高了62.6%、30.56%,发酵黑莓汁处理组分别提高了58.3%～66.2%、40%～54.32%。与皮质Immune trypanolysis酮损伤组相比,以上指标未发酵黑莓汁组均无显著性变化。4.研究发酵黑莓汁对皮质酮损伤PC12细胞相关蛋白表达量的影响。结果表明,损伤组BDNF、BBemcentinib说明书cl-2、CREB蛋白含量较空白组分别下降了27.03%、46%、46.7%。与损伤组相比,氟西汀组BDNF、Bcl-2、CREB蛋白含量分别提高了蛋白含量19.17%、13.8%、169%,发酵黑莓汁组BDNF、Bcl-2、CREB蛋白含量分别提高了10.37%～33.97%、9.2%～18.3%、79.1%～250%。损伤组促凋亡因子Bax含量显著提高,是空白组的1.53倍,氟西汀组Bax蛋白表达量降低21.56%,发酵黑莓汁组降低了43%～56.18%。5.通过体外厌氧发酵人类粪便实验,探究黑莓汁对于人体肠道菌群、5-HT、GABA及短链脂肪酸的影响作用。结果发现:与发酵空白样本(F-CK)相比,发酵黑莓汁处理组(F-BJ)的物种丰富度显著提高,未发酵黑莓汁样品组(UF-BJ)物种丰富度显著降低。与F-CK相比,F-BJ组阿克曼菌属显著提高,UF-BJ组变形菌、乳杆菌属丰度显著提高。与空白对照相比,副干酪乳杆菌PC18发酵黑莓汁组及黑莓汁组5-HT、BIBW2992价格GABA等神经递质含量均显著提高,对短链脂肪酸产生不同的影响。